收藏本站
《吉林大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

重组脂联素对犊牛肝细胞糖异生的调控作用

黄海龙  
【摘要】: 本研究利用现代分子生物学实验技术,克隆了牛脂联素基因,构建了脂联素毕赤酵母表达载体,实现了毕赤酵母真核表达;同时证明表达的脂联素具有较好的生物学活性。在此基础上,应用荧光定量RT-PCR方法,通过体外肝细胞原代培养实验及动物实验,研究了脂联素对肝糖异生关键酶PEPCK mRNA和PC mRNA表达水平和酶活性的调控作用,为揭示围产期奶牛能量代谢负平衡的发生机制和从细胞因子水平寻找防治该类疾病的新途径奠定了实验基础。 脂联素基因的克隆与序列分析表明:所获得的669bp目的基因与GenBank中牛脂联素基因的编码序列相比,同源性为100%,证明所克隆的基因是正确的。 毕赤酵母表达实验表明:脂联素基因正确整合到了受体菌GS115的基因组上,成功实现了牛重组脂联素的分泌表达。纯化的蛋白经糖尿病小鼠模型实验检测具有较好的生物学活性。 荧光定量RT-PCR方法建立实验表明,建立的荧光定量RT-PCR方法准确性好、灵敏度高、稳定性强,可应用于PC、PECPK mRNA表达水平的定量分析。 肝细胞分离培养实验结果显示,ADPN对肝细胞PEPCK mRNA表达具有抑制作用,随剂量增加抑制作用增强。随着ADPN浓度的升高,与对照组比较,肝细胞PEPCK活性明显降低,且随脂联素浓度升高其作用越明显(P0.05);PC活性也呈下降趋势,差异不显著。 动物实验表明ADPN对PEPCK mRNA的表达及酶活性具有显著的抑制作用,对PC mRNA的表达及酶活性的抑制作用不明显。ADPN通过对PEPCK、PC活性的抑制降低血糖。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S823

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 郭冬生;彭小兰;夏维福;;反刍动物葡萄糖代谢与营养研究进展[J];广东农业科学;2011年08期
2 陈小玲;黄志清;毛湘冰;吴秀群;;FoxO1的功能研究进展[J];中国畜牧兽医;2011年09期
3 ;[J];;年期
4 ;[J];;年期
5 ;[J];;年期
6 ;[J];;年期
7 ;[J];;年期
8 ;[J];;年期
9 ;[J];;年期
10 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 周杰;;脂联素在猪脂肪-生殖互作中的信号作用[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
2 屈红林;刘瑞莲;;脂联素在运动生物组织工程中的研究进展[A];2009全国运动生理学发展与学科建设研讨会论文集[C];2009年
3 贾逸敏;魏师;孙钦伟;杨晓静;李润生;丛日华;赵茹茜;;母猪妊娠期蛋白限饲对新生仔猪肝脏糖异生关键酶基因表达的影响[A];“基因、进化与生理功能多样性”海内外学术研讨会暨中国生理学会第七届比较生理学学术会议论文摘要[C];2009年
4 盛晟;周杰;张佳;邵康;吴小雪;李维新;;重组脂联素对猪原代脂肪细胞的影响[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
5 陆炎;章志建;熊雪莲;李晋;王晓琳;宁光;李小英;;YY1基因参与肝脏糖异生的研究[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
6 张佳;周杰;盛晟;邵康;吴小雪;李维新;;重组脂联素对猪骨骼肌卫星细胞脂联素及受体和MyHC基因表达的影响[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
7 崔晓兵;王程;李丽;吴立玲;;胰岛素抑制大鼠心肌细胞脂联素受体1表达的机制研究[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
8 胡家;冯文焕;朱大龙;;Exenatide对肥胖大鼠肝脏Foxo1介导糖异生基因表达的作用[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
9 沈絮华;李虹伟;李卫萍;丁晓松;;胰岛素抵抗大鼠冠状动脉脂联素及其受体的表达和调控机制[A];第十三次全国心血管病学术会议论文集[C];2011年
10 李红山;冯琴;胡义扬;陈少东;彭景华;李雪梅;许丽莉;;脂联素及其受体在实验性脂肪肝中的变化及中药干预作用[A];第十八次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 孙庆伟;血糖是怎样维持稳定的[N];家庭医生报;2007年
2 华清;两种老药辅助治糖尿病[N];医药养生保健报;2008年
3 洪国强;茶水煮饭降“三高”[N];医药养生保健报;2009年
4 潘明政;糖尿病患者能饮酒吗?[N];健康报;2003年
5 刘燕玲;坏情绪与高血糖互为影响[N];健康报;2003年
6 张洪军;六类药易诱发高血糖[N];大众卫生报;2007年
7 唐山市滦南县畜牧兽医局 张学莲;奶牛酮病综合防治措施[N];河北农民报;2006年
8 张洪军;高血糖:有时是用药不慎惹的祸[N];科技日报;2006年
9 吴晓微;果糖注射液在烧伤和重症ICU中的应用[N];医药经济报;2004年
10 副主任医师 袁俊荣;久服激素别忘查血糖[N];中国老年报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 黄海龙;重组脂联素对犊牛肝细胞糖异生的调控作用[D];吉林大学;2010年
2 赵立玲;脂联素基因敲除小鼠血管钙化及其钙化机制的研究[D];中南大学;2009年
3 王敏;高脂高糖膳食诱导脂联素基因敲除鼠血管钙化及其钙化机制的研究[D];中南大学;2008年
4 王安平;白藜芦醇对脂联素表达和多聚化的调控及机制研究[D];中南大学;2011年
5 欧益伊;脂联素及其受体1基因遗传多态性对肿瘤患病风险和预后影响的研究[D];第二军医大学;2012年
6 袁芳;脂联素在糖尿病肾病中的保护作用及相关机制的实验研究[D];中南大学;2009年
7 周蕾;脂联素及其受体与系统性红斑狼疮患者胰岛素抵抗的相关性研究[D];天津医科大学;2011年
8 苏艳新;脂联素对mTOR介导的早期糖尿病肾病的干预及保护作用研究[D];重庆医科大学;2012年
9 王慧;脂联素对成年和老年缺血预处理保护作用的影响及脂联素与冠心病及其危险因素的研究[D];北京协和医学院;2012年
10 马彦卓;1型糖尿病缺血/再灌注心肌易损性增加的新机制:脂联素抵抗及低脂联素血症[D];第四军医大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李璇;脂联素对ApoE-/-小鼠颈动脉粥样硬化斑块和硝基化应激的作用及其机制[D];山东大学;2010年
2 李永宁;膳食调整对饮食诱导的肥胖大鼠脂联素表达的影响[D];华中科技大学;2009年
3 何显;脂联素及其受体在各型慢性乙型肝炎患者肝组织的表达和意义[D];河北医科大学;2011年
4 董国霞;高血压肥胖患者血清脂联素水平与动脉粥样硬化的相关性研究[D];吉林大学;2010年
5 范枝芳;血清脂联素与代谢指标及游离甲状腺激素的关系分析[D];山西医科大学;2010年
6 齐钊;不同浓度的高糖、高胰岛素对新生大鼠心肌细胞脂联素表达的影响[D];河北医科大学;2010年
7 张荷香;高脂饮食诱导的肥胖和肥胖抵抗大鼠脂联素表达水平比较研究[D];华中科技大学;2009年
8 熊波;脂联素及其受体在缺氧/复氧心肌中的表达及其上调机制[D];华中科技大学;2010年
9 张荷香;高脂饮食诱导的肥胖和肥胖抵抗大鼠脂联素表达水平比较研究[D];华中科技大学;2009年
10 荀靖琼;2型糖尿病脂联素水平与心脑血管病变关系的研究[D];桂林医学院;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026