收藏本站
《吉林大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

金属硫蛋白拮抗血管紧张素Ⅱ/p53通路诱导的心肌细胞凋亡的体内体外研究

刘秋菊  
【摘要】: 血管紧张素II(angiotensin II AngII)与心肌病的发生有密切的相关性,而抗氧化剂-金属硫蛋白(metallothionein MT)能够有效的预防糖尿病心肌病的发生。应用心脏高表达MT的小鼠模型,前期试验研究已经表明金属硫蛋白能够保护心脏免受各种应激损伤,包括化疗药物阿霉素、血管紧张素II以及糖尿病等。但血管紧张素II诱导心肌细胞凋亡的机制及金属硫蛋白发挥保护作用的机制都是不清楚的,对其机制的清晰了解使金属硫蛋白运用于继发性心肌病防治药物的研发成为可能。 肿瘤抑制因子p53通常由细胞应激所激发,通过诱导细胞周期停滞和凋亡而达到抑制生长的作用。对糖尿病心脏病心肌细胞p53表达情况已经有研究报道,然而,p53的表达是否直接参与糖尿病心脏内的细胞程序性死亡过程?这仍然是不清楚的。所以本实验拟解决的问题是血管紧张素II诱导的心肌细胞凋亡中p53发挥怎样的作用?金属硫蛋白是否能够直接抑制p53蛋白的表达? 本实验运用载体lipofectamine 2000,在大鼠心脏来源的H9c2细胞系稳定转染人的MT-IIA基因,RT-PCR明确基因的确切转入,和Western-blotting验证金属硫蛋白蛋白水平的稳定表达,并通过暴露于镉证明转染的金属硫蛋白具有重金属解毒功能,H2O2及缺氧/再充氧体系证明具有抗氧化特性。然后体外实验我们应用野生型H9c2和转基因型H9c2MT7这两个细胞系,体内实验应用已经建立的MT-TG转基因鼠和其野生型FVB小鼠模型,通过Cell Death Detection ELISA,western-blotting检测caspase-3及TUNEL staning证明血管紧张素II处理后心肌细胞凋亡的增加,随后蛋白水平检测T-p53,P-p53和Bax/Bcl-2的表达,结果表明在野生型H9c2细胞和FVB小鼠的心脏,血管紧张素II处理后凋亡明显增加,而在H9c2 MT7和MT-TG小鼠的心脏内却没有这种现象。同时蛋白水平western-blot检测也表明MT能够抑制T-p53,P-p53和Bax/Bcl-2的表达。所以结论是我们成功建立了稳定高表达人MT-IIA基因的心肌细胞系,这为阐明金属硫蛋白保护作用的机制提供了一个有效的研究工具。体外体内实验表明血管紧张素II主要通过p53途径诱导心肌细胞的凋亡,而p53通路的激活与血管紧张素II诱导的心肌细胞DNA损伤有关,金属硫蛋白能够预防这种损伤的发生,从而抑制p53通路的激活。
【学位授予单位】:

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 苏勇,夏云飞,郑芹,侯景辉,何洁华,吴秋良;放疗前中后鼻咽癌组织金属硫蛋白表达变化及其意义[J];广东医学;2003年11期
2 朱士雅;金属硫蛋白的特性及其检测方法[J];环境与职业医学;1987年04期
3 高崇明,张爱琴,杨立庄;小鼠肝脏金属硫蛋白消除OH自由基能力的变化动态[J];科学通报;1992年20期
4 葛淑君,唐朝枢,庞永政,程时;金属硫蛋白对大鼠肝脏线粒体氧自由基损伤的保护作用[J];北京医科大学学报;1996年06期
5 杨月欣,刘建宇;锌诱导金属硫蛋白体内合成的实验研究[J];微量元素与健康研究;1996年01期
6 郝福英,周先碗,田枫,刘学文;金属硫蛋白清除活性氧自由基的研究[J];中国老年学杂志;1998年03期
7 李侠;金属硫蛋白与肿瘤[J];卫生研究;1999年03期
8 樊启涛,章翔,费舟,吴景文,段光明,刘先珍,梁景文,王煊;人脑胶质瘤金属硫蛋白表达的生物学意义[J];第四军医大学学报;2000年09期
9 李淑莲,李载权,张英,薛琳,许松,王晓红,唐朝枢;高同型半胱氨酸血症对小鼠金属硫蛋白合成的影响[J];中国病理生理杂志;2000年08期
10 张瑞芬!100083,罗贤懋!100021北京,魏慧娟!100021北京;金属硫蛋白过表达对乳腺癌细胞生长和有关基因表达水平的影响[J];中华肿瘤杂志;2001年02期
11 陈伟强;;心理应激时脑金属硫蛋白的表达改变及其调控机制[J];营养健康新观察;2004年02期
12 曾克武;王旗;杨晓达;张宝旭;王夔;;金属硫蛋白电化学分析法的建立及应用[J];中华预防医学杂志;2007年04期
13 陈水锦;;环境接触镉者尿金属硫蛋白排泄增加[J];国外医学.卫生学分册;1983年02期
14 唐朝枢,李兆萍,苏静怡,程时,章京;诱导金属硫蛋白合成对大鼠内毒素休克的影响[J];北京大学学报(医学版);1989年02期
15 周杰昊,程时;金属硫蛋白与医学[J];生理科学进展;1995年01期
16 李金枝,奇云;金属硫蛋白的生物学特性及生理作用[J];微量元素与健康研究;1995年04期
17 淮清,方兴旺,王文清;哺乳动物CuMT和(Cu,Zn)MT与H_2O_2反应动力学的研究[J];北京大学学报(自然科学版);1997年06期
18 皋岚湘,丁华野,邓永江,刘光,吴霞,田玉旺,黄晓楠;乳腺癌组织中金属硫蛋白过表达生物学意义的探讨[J];中国肿瘤临床;1998年09期
19 何裕高,郑楚玉;金属硫蛋白在原发食管癌和转移淋巴结的表达及其意义[J];汕头大学医学院学报;2001年01期
20 李淑敏,胡大一,唐朝枢,樊晓雷,马晓光;锌诱导的金属硫蛋白在大鼠高血压发病中的保护作用[J];中国药理学通报;1997年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 董彬;王慧;曾勇庆;;金属硫蛋白(MT)基因的表达与肉猪的健康生长[A];中国畜牧兽医学会养猪学分会第五次全国会员代表大会暨养猪业创新发展论坛论文集[C];2010年
2 郭家彬;付泽;雷蕾;彭双清;;金属硫蛋白抗阿霉素心肌毒性的线粒体机制研究[A];中国毒理学会第三届中青年学者科技论坛暨2011年全国前列腺药理毒理学研讨会论文集[C];2011年
3 文镜;赵建;毕欣;张东平;金宗濂;;金属硫蛋白抗亚急性辐射的实验研究[A];中国营养学会第五次营养资源与保健食品学术会议论文摘要汇编[C];1999年
4 王文慧;张宝旭;路雪艳;李林峰;;金属硫蛋白的光保护作用:金属硫蛋白基因敲除小鼠对UVB照射的反应[A];2003中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2003年
5 师绿江;尹昭云;洪欣;辛益妹;贺鹏飞;任宏伟;韩行湛;关景芳;;金属硫蛋白对加速度致心肌细胞凋亡的影响[A];中国生理学会第六届应用生理学委员会全国学术会议论文摘要汇编[C];2003年
6 万灵燕;张杰英;马毓梅;史淑芬;张祥宏;;子宫内膜息肉病理形态学特点及Ki—67和P53表达特征的初步探讨[A];中华医学会病理学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年
7 刘亚男;;共表达siRNA-VEGF与p53质粒治疗前列腺癌的体内研究[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
8 蒋与刚;刘佃辛;葛玉章;韦京豫;郭长江;高兰兴;;金属硫蛋白对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用研究[A];中国营养学会第六届微量元素营养学术会议论文摘要汇编[C];1999年
9 郭军;辛银玲;向娟;周飞艨;;SECM-SPR联用技术研究金属硫蛋白构型变化[A];中国化学会第二十五届学术年会论文摘要集(下册)[C];2006年
10 陈萍;傅华;胡义德;;重组人p53基因腺病毒注射液胸腔灌注治疗肺癌所致胸腔积液的临床疗效[A];中华医学会第五届全国胸部肿瘤及内窥镜学术会议论文汇编[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 孙英威 呼涛;我国成功获取金属硫蛋白[N];中国乡镇企业报;2003年
2 记者李天舒;东亚人群p53基因与纬度相关[N];健康报;2009年
3 罗梅;适量饮用茅台酒有益于健康与金属硫蛋白有关[N];贵州日报;2005年
4 孙国根;人群中存在镉中毒易感人群[N];健康报;2008年
5 王松;基因破译国酒茅台[N];中华工商时报;2005年
6 记者 白毅;我国发现新型p53基因调控蛋白[N];中国医药报;2009年
7 记者 吴长锋;我科学家研究发现p53调控葡萄糖代谢新途径[N];科技日报;2011年
8 记者 邰举;抑癌基因p53活性调控机制有新说[N];科技日报;2009年
9 王炜;调整p53或可平衡衰老与癌变[N];医药经济报;2009年
10 王伦 肖绍文;p53基因药物结合放疗治疗宫颈癌成效显著[N];中国医药报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘秋菊;金属硫蛋白拮抗血管紧张素Ⅱ/p53通路诱导的心肌细胞凋亡的体内体外研究[D];吉林大学;2010年
2 李璐;新型微管结合蛋白NuSAP的有丝分裂期调控功能及DNA结合能力研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
3 赵宇;TAT-ODD介导的p53融合蛋白的靶向抗肿瘤作用的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
4 许钟;P53基因突变与胃癌临床病理关系的meta分析及P53抑制蛋白iASPP转录调控机制初步研究[D];重庆医科大学;2011年
5 申海莲;SGT及其相关蛋白功能的研究[D];复旦大学;2005年
6 陈颖;中心体与端粒酶在大鼠肝癌与小鼠皮肤癌发生中的动态变化及相关性分析[D];山东大学;2006年
7 邬国斌;肝细胞癌中ASPP1、ASPP2基因表达及其启动子区CpG岛甲基化的实验研究[D];广西医科大学;2008年
8 王昕;紫外照射后p53与septin2的相互调节作用[D];北京协和医学院;2011年
9 陈伟强;心理应激条件下脑金属硫蛋白的表达及其调控机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
10 庞然;蛇葡萄根乙醇提取物通过p53信号通路发挥抗乙肝病毒作用初步研究[D];华中科技大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李忠义;不同应激因子对小白鼠肝脏金属硫蛋白合成的影响[D];湖南农业大学;2003年
2 高燕;利用蛋白质芯片技术探索肺纤维化早期标志物及硒代金属硫蛋白的防护作用[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
3 吴力专;Zn-金属硫蛋白间接竞争型ELISA的建立与应用[D];湖南农业大学;2004年
4 李小龙;金属硫蛋白锌诱导合成及其在杜长大杂交猪和杂种野猪体内代谢规律的研究[D];湖南农业大学;2003年
5 张小河;金属硫蛋白-3基因转染对食管癌细胞株增殖活性的影响[D];河北医科大学;2010年
6 李琳;金属硫蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义[D];吉林大学;2005年
7 乔会珍;MT-4和MT-1X基因单核苷酸多态性与2型糖尿病的关联性研究[D];吉林大学;2006年
8 胡楠;香烟引起的心力衰竭机制及金属硫蛋白对小鼠心肌的保护研究[D];河北农业大学;2011年
9 李翠杰;植物金属硫蛋白拟南芥细胞表达与抗重金属能力研究[D];东北林业大学;2006年
10 李峥;金属硫蛋白对全脑缺血再灌注后神经损伤的保护作用及其机制研究[D];重庆医科大学;2009年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978