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《延边大学》 2011年
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Nelin基因与冠心病的相关性研究

王琛  
【摘要】:目的:探讨Nelin基因突变与冠心病易感性及危险因素的相关性,同时探讨缺血缺氧损伤对大鼠心肌细胞Nelin基因表达的影响。 方法:(1)采用DNA序列测定技术,检测101例冠心病患者和114例健康人Nelin基因外显子及外显子/内含子连接区的核苷酸序列。利用核酸序列分析软件与Genbanlc的Nelin基因序列比对,对SNP位点进行序列分析。(2)检测受试对象的身高、体重和血压,用ELISA法检测血清Nelin水平,全自动生化分析仪检测血清TC、HDL-C、LDL-C、TG、Hs-CRP、Glu、Cr水平,分析Nelin基因变异与以上各指标之间的关系。(3)培养新生大鼠心肌细胞,体外模拟心肌细胞缺血缺氧条件,用RT-PCR、Western blot方法检测缺血缺氧损伤的心肌细胞Nelin基因的表达。 结果:(1)通过对Nelin基因外显子SNP位点的序列分析,共发现2个SNP位点。其中1个为NCBI数据库中报道的rs1166698位点,新发现1个位点。rs1166698位点为第8外显子区G/A错义突变(48364365 G/A),对照组基因型频率为GG:31.6%,GA:52.6%,AA:15.8%,等位基因频率为G:57.9%,A:42.1%。冠心病组基因型频率为GG:33.7%,GA:49.5%,AA:16.8%,等位基因频率为G:58.45%,A:41.45%。冠心病组Nelin基因rs1166698位点AA基因型和A等位基因频率均较对照组偏低,但二者均无统计学意义。(2)冠心病组血清Nelin水平为0.88±0.74ng/ml,对照组为0.31±0.18ng/ml,冠心病组明显高于对照组(P0.001),冠心病有60.4%的患者Nelin水平升高。冠心病组Hs-CRP、Glu、LDL-C水平明显高于对照组(P0.001),HDL-C水平明显偏低(P0.001)。(3) Nelin基因rs1166698位点AA型与GG+GA型比较,Nelin水平、HDL-C偏高,其它指标均偏低,但均无统计学意义(P0.05)。(4)缺血缺氧诱导的心肌细胞,经RT-PCR、Western blot检测,结果随着缺血缺氧时间的增加,Nelin基因mRNA和蛋白的表达量逐渐减少。 结论:冠心病组血清Nelin水平明显高于对照组,60.4%的冠心病患者Nelin水平升高,说明Nelin基因与冠心病存在一定关联,实验结果未发现Nelin基因rs1166698多态性位点与冠心病相关。缺血缺氧下调心肌细胞Nelin表达。提示Nelin基因很可能在冠心病的发生发展过程中起重要作用。
【学位授予单位】:延边大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R541.4

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