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关龙胆抗肿瘤活性成分的研究

郭海凤  
【摘要】: 关龙胆(Gentiana scabra)是龙胆科龙胆属(Gectiana L.)植物,吉林省资源丰富,是民间抗肿瘤效果较好的长白山道地药材。目前的抗肿瘤药多为合成药,具有很大的毒副作用(如免疫功能抑制,肝肾功能损害等),因此寻找天然、高效、低毒的中药成为现今医学研究热点。近年来,各国研究人员从龙胆中分离出多种裂环环烯醚萜类、三萜类、黄酮类等化合物。日本学者对吉林龙胆的三萜类及裂环环烯醚萜类成分进行过研究,而国内未发现对关龙胆抗肿瘤活性成分的相关报道。为了进一步开发和利用关龙胆这一长白山道地药材,并从中寻找和发现具有抗肿瘤活性的单体化合物,本实验对采自吉林桦甸的关龙胆进行了较系统的研究。 本实验体内以小鼠S180肉瘤为模型,观察关龙胆乙醇提取物抗肿瘤作用,结果表明有较好的肿瘤抑制作用。在此研究工作的基础上,分别采用乙醇热回流法和甲醇冷浸法进行提取,再分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,其中乙醇热回流法提取的各部位以胃癌(MGC-803)、宫颈癌(Hela)与肝癌(HepG-2)细胞株体外细胞毒性和体内小鼠S180肉瘤抑制实验进行筛选,确定关龙胆抗肿瘤有效部位为石油醚和乙酸乙酯萃取部位,其中乙酸乙酯萃取部位为强活性部位。 采用硅胶柱层析分离方法对石油醚萃取部位以及两种乙酸乙酯萃取部位进行分离,共分离得到12个单体化合物,应用波谱技术(1H-NMR, 13Cc-NMR, DEPT, HMBC, HSQC, 1H-1H COSY, GC-MS等)和多种化学方法鉴定了其中11个化合物的结构:分别为Chirat-17(22)-en-3-one (Ⅰ), Chiratol (Ⅱ),β-谷甾醇(Ⅲ),α-香树脂醇棕榈酸酯(Ⅳ),Chirat-16-en-3-one (Ⅴ), Chiratenol(Ⅵ),3,4-dihydro-1H,6H,8H-naphtho[1,2-c:4,5-c',5']dipy-rano-1,8-dione (Ⅶ),胡萝卜苷(Ⅷ),胆甾醇(Ⅹ),龙胆苦苷(Ⅺ),蔗糖(Ⅻ),其中化合物Ⅱ、Ⅳ、Ⅶ、Ⅹ和Ⅻ为首次从该植物中分离得到。化合物Ⅴ、Ⅵ、Ⅷ和Ⅻ在100μg·mL-1时对Hela细胞具有一定的抗肿瘤作用,细胞抑制率分别为69.94、52.31、51.74和50.93%。 本实验不仅丰富了对关龙胆化学成分及其抗肿瘤活性的了解,而且为进一步研究与开发关龙胆提供了科学依据。


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