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《吉林农业大学》 2011年
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甜菜多糖的提取纯化及其生物活性的研究

刘洁心  
【摘要】:本文以甜菜榨糖后剩下的甜菜渣为原料,采用水提醇沉的方法提取甜菜多糖,并对甜菜(?)糖的提取分离纯化、纯度鉴定、理化性质以及生物活性等方面做了研究,得到如下结论: 1.采用热水浸醇沉的方法提取甜菜多糖,通过单因素以及L9(33)正交试验确定了最佳工艺(?)件为:料液比为1:90,提取温度为85℃,提取时间为2h,提取次数为2次,此条件下甜菜(?)糖总得率为3.74%;醇沉的最佳条件为:乙醇终浓度为80%,4℃醇沉6h,采用苯酚-硫酸(?)测定多糖含量方法简单快速。 2.研究了三种方法对甜菜多糖中蛋白质的脱除效果,结果表明:三种方法中以酶法和三(?)乙酸结合法效果最好,即酶用量为0.1%,pH=4.0,40℃酶解1.5h,离心去除沉淀后再加入三氯乙酸至终浓度为2%,此时蛋白质脱除率为73.72%,多糖保留率为90.29%。 采用活性炭法对糖液进行脱色,最佳工艺为:在60℃,pH=3条件下,活性炭用量为0.4%,(?)色时间为3h,此条件下糖液的脱色率为74.5%,多糖保留率为96.67%,此方法多糖损失不(?),简单可行。 甜菜多糖经过DEAE-52纤维素柱后,经过0-0.5mol/LNaCl洗脱后出现五个洗脱峰,以3mol/LNaCl洗脱多糖含量最高,收集主峰后得到多糖BPS-D,再将其过sephadexG-200凝(?)柱进一步纯化,得到两个洗脱峰,收集主峰后命名BPS-D-G,此多糖经sephadexG-200凝(?)柱层析、紫外检测以及冻融实验,证明BPS-D-G为均一多糖。 3.采用高效液相色谱和sepharose CL-6B凝胶柱层析法,测定甜菜多糖的分子量为130kd,(?)糖含量为95.7%,高效液相法测定多糖BPS-D-G的单糖组成为半乳糖醛酸55.9%,阿拉伯(?)23.8%,半乳糖13%,葡萄糖醛酸6.2%,葡萄糖1.1%。红外光谱显示含有β-糖苷键。 4.为探讨甜菜多糖对体外肿瘤细胞的效果,分别对甜菜粗多糖、DEAE-52纤维素柱层析(?)集组分DEAE-D、以及sephadexG-200凝胶收集组分DEAE-D-G进行体外抗肿瘤活性的研究,采用宫颈癌HeLa细胞,给药浓度分别为400μg/mL,600μg/mL,800μg/mL,1000μg/mL 200μg/mL。采用MTT法测定多糖对肿瘤细胞的抑制率。结果表明,不同浓度的甜菜多糖对肿瘤细胞均具有一定的体外抑制作用,多糖DEAE-D的抑制效果最强,最适给药浓度为000μg/mL。
【学位授予单位】:吉林农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S566.3

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【参考文献】
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