收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

RsmI和BACE1蛋白纯化及其晶体结构的研究

赵默晗  
【摘要】:RsmI是大肠杆菌中的一个甲基化酶,负责催化与mRNA的P位点密码子直接相互作用的16S rRNA上的1402位胞嘧啶(C1402)的2’-O-甲基化,影响着P位点的功能和翻译的起始。目前国内外,关于这个甲基化酶的结构以及其与底物作用方式的研究很少,本研究对RsmI以及其截短体RsmI12-258进行了表达纯化以及结晶,得到了较高质量的RsmI12-258的晶体,且获得了很好的衍射数据,分辨率均在2-3之间,并解出了RsmI12-258与底物S-腺苷甲硫氨酸(S-Ado-Met,SAM)结合后复合物的三维空间结构。 在人体中,β-淀粉样蛋白(Aβ)是形成老年斑的主要成分,这种淀粉样斑块具有神经毒性,会导致神经细胞的死亡。淀粉样斑块的形成以及累积是导致阿尔茨海默症发病的重要机制。β-分泌酶(BACE1)是一种新型的跨膜天冬氨酸蛋白酶,在Aβ产生过程中起着限速的作用。通过抑制BACE1的活性即可以抑制β-淀粉样蛋白的产生,从而抑制或减慢阿尔茨海默症的发病。本研究利用大肠杆菌表达人BACE1基因,并对在大肠杆菌中以包涵体的形式存在的BACE1进行了变复性及纯化,得到了活性较好且均一稳定的BACE1蛋白。 本实验严格按照X射线晶体学流程,以E.coli作为宿主,从对RsmI和BACE1两个蛋白RsmI和BACE1进行克隆、表达、纯化、结晶,并通过X射线衍射法对RsmI的截短体与底物的复合物晶体进行了衍射数据的收集,完成了对这个复合物结构的解析。


知网文化
【相似文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 赵默晗;RsmI和BACE1蛋白纯化及其晶体结构的研究[D];吉林农业大学;2014年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978