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《吉林农业大学》 2017年
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萱草属植物的形态学性状与分子标记研究

任阳  
【摘要】:萱草(Hemerocallis fulva)自然种类14种,主要分布在欧亚大陆温带至亚热带地区。我国是萱草属植物种类最全、分布范围最广的国家,现有11种为我国原产,主要集中在秦岭以南的亚热带地区。近代以来,国内外萱草属植物的选育工作不断发展,园艺品种不断出新,仅美国已有上百个新品种被选育出来。进入新世纪,我国从国外陆续引进了许多园艺品种,加上国内自主培育的新品种,种类繁多,中文名称混杂,易引起混乱。因此,对于萱草园艺品种资源的分类工作变得十分必要。本试验分别从形态学性状、SSR分子标记、ISSR分子标记等三种方法对50份萱草植物材料进行分类研究,为萱草属植物生长发育和分类工作奠定基础。研究结果如下:1.本试验选取萱草属17个生物学性状对50份萱草属材料进行调查、评价与鉴定,研究结果表明,就7个生物学质量性状指标差异明显,变异系数变化范围为8.51%至226.68%,平均为60.98%。就性状变异来源而言,50份萱草属植物材料质量性状变异因素主要源于花色、花香以及重瓣等。10个数量性状指标中,株高、花梗长以及叶长变异较为明显,变异系数分别为44.12%、36.64%、33.90%,平均的变异系数为24.10%。2.通过对44份材料的R型聚类结果表明,本试验所选取的生物学性状彼此之间存在着一定的联系,又彼此独立,可以作为萱草属植物材料的特征性状;Q型聚类结果表明,44份材料之间,在遗传距离为6的时候迅速分散,而两份原始种萱草品种在遗传距离为12的时候就已经分开了。在遗传距离为15时,44份材料被分成4个大类。3.本试验在NCBI上查找出萱草属植物相关的微卫星序列,利用SSR hunter软件查找出SSR序列100条,通过Primer5.0软件对查找出的微卫星序列进行引物设计,共设计出246对评价较高的引物,最后经比对、筛选,选择其中的100对引物进行PCR扩增试验,最终从中筛选出具有多态性好的引物20对。利用Popgene32软件对结果进行分析,发现RY31与HemC203两对引物对材料的扩增效果最好,分别扩增出了8条片段,多态性条带均为8条,多态率为100%。引物RY22与RY34扩增出的片段最少,仅为2条,多态性条带分别为2条,多态率为100%。20对引物对50份材料共计扩增出101个条带,每条引物平均扩增5.05条条带,其中多态性条带92条,多态性百分比为91.10%。4.通过对50份材料进行SSR-PCR扩增,扩增出的片段经过统计,利用Popgene32及NTSYS软件对50份选草属植物材料进行遗传距离及相似系数的计算统计,计算结果显示,遗传距离在0.0798至0.7794之间,而相似系数则在0.5510至0.8418之间。5.利用17条引物对50份萱草材料进行ISSR-PCR扩增,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对扩增的产物进行检测,17对引物共扩增出196条条带,其中多态性条带189条,多态性百分率为96.43%,平均每条引物扩增出11.53条。其中引物UBC811扩增出条带最多,扩增条带18条,多态性条带18条,多态性100%;引物UBC829与UBC864两条引物扩增出的条带最少,都为8条,多态性条带都为8条,多态性为100%。6.通过对50份材料进行ISSR-PCR扩增,扩增出的片段经过统计,利用Popgene32及NTSYS软件对50份选草属植物材料进行遗传距离及相似系数的计算统计。结果显示50份材料间的遗传距离在0.0085至0.6794之间,相似系数则在0.4920至0.6031之间。
【学位授予单位】:吉林农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:S682.19

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