收藏本站
《吉林农业大学》 2018年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

牛源多杀性巴氏杆菌转录组学分析及DnaJ蛋白表达与免疫原性分析

王羽  
【摘要】:牛多杀性巴氏杆菌主要引起牛肺炎,在世界各地广泛流行和分布,影响着养牛业的发展。多杀性巴氏杆菌根据荚膜抗原可分为A、B、D、E和F型5个血清型。多杀性巴氏杆菌的毒力因子种类繁多,但对其致病机制及相关毒力因子的作用仍有待于进一步研究。本研究在确定牛荚膜A型多杀性巴氏杆菌的基础上,通过动物试验及部分多杀性巴氏杆菌毒力基因的扩增筛选出强毒株与弱毒株,并将强、弱毒株进行转录组测序分析。将差异表达基因进行分析,筛选毒力基因并富集到KEGG_-map上,综合分析多杀性巴氏杆菌的致病机制。1.牛源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定本研究采集疑似感染牛肺炎的病料进行细菌的分离,通过生化鉴定及多杀性巴氏杆菌特异性引物对分离菌株进行鉴定,共分离出12株多杀性巴氏杆菌,并采用PCR技术对12株多杀性巴氏杆菌进行荚膜血清型鉴定,结果表明12株菌株均为荚膜A型多杀性巴氏杆菌。2.基于强、弱毒株转录组学分析通过动物试验及多杀性巴氏杆菌部分毒力基因扩增筛选出强毒株与弱毒株,利用转录组学分析,从cDNA文库中筛选到72个差异表达的基因。显著性分析发现,在强、弱毒株中共有69个表达基因下调和3个表达基因上调。本次测序结果显示弱毒株与强毒株相比毒力基因Znua与Rope表达显著下调。3.DnaJ蛋白的提纯及功能验证在转录组学测序结果中弱毒株Dnaj表达下调最为显著。在本研究中,将Dnaj基因与pET-28a载体连接,构建重组质粒,并将重组质粒转入DE3细胞中,经IPTG诱导表达,获得大小约为37.8kDa的重组蛋白。通过亲和层析法(Ni-NAT)纯化DnaJ蛋白。将纯化的蛋白免疫小鼠,通过Western blot对DnaJ蛋白的免疫原性做出初步分析。
【学位授予单位】:吉林农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:S852.61

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 贾昌路;张瑶;朱玲;张锐;;转录组测序技术在生物测序中的应用研究进展[J];分子植物育种;2015年10期
2 蔡广强;;多杀性巴氏杆菌毒力因子研究进展[J];上海畜牧兽医通讯;2013年06期
3 陈光宏;贺晓龙;;猪源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定与药敏试验[J];畜牧与兽医;2012年08期
4 刘万飞;王西亮;赵宇慧;曾瀞瑶;耿佳宁;胡松年;;基于第二代测序技术的细菌基因组与转录组研究策略简介[J];微生物学通报;2011年11期
5 马晓菁;王静梅;剡根强;;犊牛肺炎多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定[J];中国兽医学报;2010年09期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 汤细彪;猪源多杀性巴氏杆菌的分子流行病学与致病性研究[D];华中农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 王林柏;多杀性巴氏杆菌△rpoE突变株的构建及其生物学特性研究[D];中国农业科学院;2016年
2 孔令聪;牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及对喹诺酮类抗生素耐药机制研究[D];吉林农业大学;2013年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李卉;;多杀性巴氏杆菌毒力因子及基因表达的研究进展[J];中国畜牧兽医文摘;2015年09期
2 李卉;;多杀性巴氏杆菌毒力因子及基因表达的研究进展[J];中兽医学杂志;2015年09期
3 王梓;孔令聪;贾博岩;刘树明;马红霞;;7株牛源A型巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析[J];中国兽药杂志;2015年07期
4 李琳;冯帅;汪莹;代兴杨;杨艳菲;曾明华;;鼠伤寒沙门菌ATCC13311诱导耐药株的转录组测序和分析[J];中国兽医学报;2015年07期
5 王辉;任丽;李亚莉;骆爱国;肖伟;崔晓龙;周红杰;;普洱茶发酵过程中不同层间细菌群落结构研究[J];食品安全质量检测学报;2015年05期
6 朱帅旗;龚一富;杭雨晴;刘浩;王何瑜;;绿色杜氏藻转录组分析[J];遗传;2015年08期
7 沈思;徐小艾;侯艳飞;张玥琨;王真;;奶牛多杀性巴氏杆菌病诊断和防治建议[J];北京农学院学报;2015年02期
8 高家登;杨铭伟;剡根强;王静梅;王超丽;杨龙龙;;抗牛支原体及多杀性巴氏杆菌二联卵黄抗体的制备及初步临床应用观察[J];中国奶牛;2014年22期
9 张春燕;李伟;孙海燕;邓渊钰;张爱香;陈怀谷;王志伟;;实时定量PCR法预测禾谷丝核菌Rhizoctonia cerealis基因组大小[J];微生物学通报;2014年09期
10 刘跃生;潘陈苗;姚宁屏;邵忠海;;直接肉汤药敏试验在猪病防治中的应用[J];浙江农业科学;2014年08期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 刘英玉;副猪嗜血杆菌耐药性调查和耐药机制研究[D];华中农业大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前5条
1 马晓玲;加米霉素注射液对犊牛安全性评价及Ⅱ期临床试验[D];石河子大学;2018年
2 王羽;牛源多杀性巴氏杆菌转录组学分析及DnaJ蛋白表达与免疫原性分析[D];吉林农业大学;2018年
3 王元智;水貂阿留申病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立与应用[D];中国农业科学院;2017年
4 贾博岩;牛支原体对氟喹诺酮及氨基糖苷类抗生素耐药机制的初步研究[D];吉林农业大学;2017年
5 高铎;牛支原体的分离鉴定及对大环内酯类抗生素耐药机制研究[D];吉林农业大学;2015年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张召宝;侯林;潘晴;王绪敏;崔清华;田景振;马鲁豫;;中药高通量转录组研究进展[J];中国中药杂志;2014年09期
2 许波;张伟强;冯晓曦;王成业;张海申;许海涛;王友华;张今瀚;;转录组测序技术在玉米中的应用研究进展[J];玉米科学;2014年01期
3 周超平;李鑫辉;;单细胞转录组研究进展[J];生物化学与生物物理进展;2013年12期
4 张凤霞;王国栋;;植物代谢组学应用研究——现状与展望[J];中国农业科技导报;2013年02期
5 刘红亮;郑丽明;刘青青;权富生;张涌;;非模式生物转录组研究[J];遗传;2013年08期
6 张春兰;秦孜娟;王桂芝;纪志宾;王建民;;转录组与RNA-Seq技术[J];生物技术通报;2012年12期
7 夏天;肖丙秀;郭俊明;;长链非编码RNA的作用机制及其研究方法[J];遗传;2013年03期
8 郝大程;马培;穆军;陈士林;肖培根;彭勇;霍利;许利嘉;孙超;;中药植物虎杖根的高通量转录组测序及转录组特性分析[J];中国科学:生命科学;2012年05期
9 李湘龙;柏斌;吴俊;邓启云;周波;;第二代测序技术用于水稻和稻瘟菌互作早期转录组的分析[J];遗传;2012年01期
10 梁烨;陈双燕;刘公社;;新一代测序技术在植物转录组研究中的应用[J];遗传;2011年12期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 孙亚妮;GN52株鸭疫里默氏杆菌的传代培养和鸭疫里默氏杆菌分离株耐药性的研究[D];山东农业大学;2008年
2 刘颖;鸭疫里默氏菌耐药性监测与分析[D];中国农业大学;2005年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 方仁东;雷桂花;杜慧慧;彭远义;;多杀性巴氏杆菌毒素的研究进展[J];中国兽医学报;2016年11期
2 常春龙;王士霞;翟军军;倪宏波;;牛多杀性巴氏杆菌菌影的制备[J];黑龙江八一农垦大学学报;2017年03期
3 李军朝;邸涛;陈静;刘慧谋;张信军;王彦红;;1株鹦鹉源多杀性巴氏杆菌的鉴定[J];中国兽医杂志;2016年07期
4 彭苗苗;傅胜才;;猪多杀性巴氏杆菌的鉴定方法和耐药性的研究进展[J];湖南畜牧兽医;2015年05期
5 康艳红;;多杀性巴氏杆菌的研究进展[J];中国畜牧兽医文摘;2013年06期
6 李伟杰;赵耘;杜昕波;康凯;陈敏;;产毒素多杀性巴氏杆菌的鉴定[J];中国畜牧兽医;2010年01期
7 唐先春,吴斌,陈焕春;产毒多杀性巴氏杆菌研究进展[J];动物医学进展;2003年05期
8 李凯年;用捕获酶免疫测定检测多杀性巴氏杆菌抗体[J];畜牧兽医科技信息;1997年15期
9 房海;陈翠珍;汤生玲;;76株鸡源多杀性巴氏杆菌分离与鉴定[J];浙江畜牧兽医;1987年02期
10 Э.А.ШЕГИДЕВИЧ;谢敏康;;D血清型多杀性巴氏杆菌的鉴定[J];国外畜牧科技;1987年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 曹长福;黄显会;丁焕中;孙美珍;卢燕;曾庆林;刘伟;曾振灵;;马波沙星在牛感染多杀性巴氏杆菌组织笼模型中的药动/药效学研究[A];中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会论文集[C];2015年
2 王晓丽;王永明;朱万光;李世成;;兔病毒性出血症与兔多杀性巴氏杆菌二联蜂胶灭活疫苗的研制[A];中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会(第三届中国兽药大会学术论坛)论文集[C];2010年
3 彭远义;;牛源多杀性巴氏杆菌A型相关研究[A];第四届全国牛病防制及产业发展大会论文集[C];2012年
4 罗琼;李力施;林志雄;;从澳大利亚进口病死种羊中分离出多杀性巴氏杆菌[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
5 余旭平;朱军莉;何世成;王丽辉;牛冬;阮辉;;多杀性巴氏杆菌跨膜蛋白基因片段的克隆与分析[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
6 蓝玮璇;江礼捷;肖霞;王志强;;氟苯尼考对多杀性巴氏杆菌的药效学研究[A];中国毒理学会兽医毒理学委员会与中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会联合学术研讨会暨中国毒理学会兽医毒理学委员会第5次全国会员代表大会会议论文集[C];2017年
7 赵战勤;李静;薛云;刘志军;王乐;廖成水;龙塔;;猪源多杀性巴氏杆菌的病原流行病学及其毒力特性研究[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会2016年学术研讨会论文集[C];2016年
8 常春龙;王士霞;翟军军;倪宏波;;牛多杀性巴氏杆菌菌影疫苗的制备及其免疫效力分析[A];中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会论文集[C];2016年
9 程龙飞;许利娜;林建生;陈红梅;仇微红;施少华;叶和佳;胡秀美;梁昭平;黄瑜;;福建及邻近省份禽源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会论文集[C];2015年
10 姜轩;刘梦月;孙英峰;马吉飞;赵瑞利;张奥;付超;石青青;;猪源A型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及小鼠致病性分析[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十三次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第三次学术研讨会、中国兽医病理学家第三次学术研讨会论文集[C];2018年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 山西太原神龙应用技术有限公司 李宝丽;猪多杀性巴氏杆菌感染的救治[N];中国畜牧报;2002年
2 贾冬梅;传染性萎缩性鼻炎的诊治[N];农民日报;2015年
3 周康;母猪传染性萎缩性鼻炎的防治技术[N];河南科技报;2014年
4 山西恒丰强动物药业有限公司广州分公司技术部 屈仁健;冬季注意预防鹅出败[N];中国畜牧兽医报;2006年
5 张家口市畜牧技术推广站 李海明;如何防治猪传染性萎缩性鼻炎[N];河北科技报;2015年
6 行唐县兽医防疫站 王金合;春季猪传染性胸膜肺炎的防治[N];河北科技报;2015年
7 冯爱华;夏秋季鸭出败诊疗方法[N];中国畜牧兽医报;2015年
8 华南农业大学 许家强 广州牧马人动物保健有限公司 刘旭光;猪病的诊断与对症下药[N];广东科技报;2001年
9 河北威远动物药业有限公司;秋季要预防巴氏杆菌病[N];中国畜牧兽医报;2011年
10 王永存;兔支气管败血波氏杆菌病的防治[N];河北科技报;2014年
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 郭东春;多杀性巴氏杆菌兔体内差异表达基因及其突变株构建的研究[D];中国农业科学院;2012年
2 杜慧慧;牛多杀性巴氏杆菌比较基因组学分析及保护性抗原的筛选[D];西南大学;2016年
3 孔令聪;牛A型多杀性巴氏杆菌耐药性分析及对部分常用药物耐药机制研究[D];吉林农业大学;2016年
4 汤细彪;猪源多杀性巴氏杆菌的分子流行病学与致病性研究[D];华中农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王羽;牛源多杀性巴氏杆菌转录组学分析及DnaJ蛋白表达与免疫原性分析[D];吉林农业大学;2018年
2 雷桂花;牛源A型多杀性巴氏杆菌强弱毒株诱导IL-1β成熟与分泌差异的研究[D];西南大学;2018年
3 伍晨露;牛源多杀性巴氏杆菌感染小鼠肺组织的转录组学分析[D];西南大学;2018年
4 王蕾;羊呼吸道感染主要细菌性病原多重PCR诊断方法的建立与应用[D];石河子大学;2018年
5 梁禄;牛源A型多杀性巴氏杆菌的生物学特性研究及致病基因检测[D];内蒙古农业大学;2018年
6 朱玲;牛源荚膜A型多杀性巴氏杆菌疫苗候选株的筛选[D];石河子大学;2018年
7 乔鹏芸;猪源多杀性巴氏杆菌的分型及其毒力特性研究[D];河南科技大学;2017年
8 罗季委;猪多杀性巴氏杆菌外膜蛋白和分泌蛋白保护性抗原筛选[D];湖南农业大学;2016年
9 郝杰;猪多杀性巴氏杆菌保护性抗原筛选[D];湖南农业大学;2015年
10 雷生妍;多杀性巴氏杆菌OmpH介导牦牛出血性败血症的致病作用研究[D];青海大学;2017年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026