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《吉林农业大学》 2002年 博士论文
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黄果、红果人参和西洋参种源的系统研究与鉴定

任跃英  
【摘要】: 本文首次对黄果、红果人参和西洋参4种种源的差异进行系统比较鉴定研究。其创新点在于首次进行了人参、西洋参超微结构研究,将RAPD扩增及特异片段的克隆、测序研究应用到人参、西洋参的研究中,填补了我国这一研究领域的空白。通过多项研究的数据比较与分析,为新品种鉴定、人参属分类及资源保护和利用提供科学依据。 本文运用生物性状及经济性状的鉴定研究方法对原植物进行系统研究;通过茎高、花轴长、叶宽、叶长、茎粗、种子大小、根全长、根粗、物候期、结实性状、产量性状进行系统比较,得出了黄果人参、西洋参均未见自然的野生分布,不论人参、西洋参黄果均为红果参栽培群体中分离出的相对隐性性状的稳定突变体,不具备新的种或亚种条件,可作为变种中的高产品种。 本文运用光镜及电镜超微结构形态组织解剖的研究方法,对黄果、红果人参和西洋参4种种源的组织解剖特征进行比较鉴定研究。4种植物花粉的外壁纹饰及叶表面扫描及根、茎、叶的超薄切片的电镜超微结构找出相关的差异。 本文首次运用同工酶及蛋白电泳技术对黄果、红果人参和西洋参4种种源进行鉴定研究。进行了过氧化物酶、纯溶蛋白的电泳指纹图谱研究。红果、黄果参品种电泳谱带相近,表现了相对的一致性,人参与西洋参谱带间存在较大差异,反映了品种与种间的遗传差异。同时,又不同程度地存在黄果品种的特异带。 本文运用高效液相色谱(HPLC)技术进行有效成分测定分析,对人参皂苷化学进行指纹鉴别及多元分析判别,进而进行了品种鉴别和质量评价。 本研究采用RAPD技术,对人参属4个品种黄果、红果人参、西洋参进行了遗传多态性和亲缘关系的分析,并在此基础上,克隆分析了人参、西洋参、黄果和红果的特异片段。采用SPSS10.0统计分析软件对RAPD结果进行聚类分析,构建亲缘关系树状图,结果表明:人参和西洋参各自聚为一支,黄、红果人参之间的亲缘关系相对黄红果西洋参之间距离更近。 在上述实验的基础上,采用Bulked-DNA策略,用随机引物P18扩增得到人参、西洋参的特异片段,用P19扩增得到了黄果和红果的特异片段,并对这四个特异片段进行了克隆、测序。用WINDNASIS软件对人参和西洋参的特异片段序列进行了同源性比较,结果表明:二者之间没有同源性,其序列可用于人参和西洋参的鉴别,同时也为设计特异性引物,将其从RAPD分子标记转变为更方便、稳定、准确的PCR标记奠定了较好的基础。用WINDNASIS软件对黄果和红果的特异片段序列进行了开放阅读框的 吉林农业大学博士论文 中文摘要 分析,结果表明这两个特异片段虽没有大的开放阅读框,但黄果特异带头78hP处可 以通读,而红果特异带头99hP可以通读,说明其可能是基因的一部分,就其特异性 可作为标记探针用于黄果及红果基因的筛选。


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