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《吉林农业大学》 2005年
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BVDV荧光RT-PCR检测方法的建立和初步应用

李天松  
【摘要】:牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)是黄病毒科、瘟病毒属成员,病毒粒子呈球形,有囊膜,核酸为长约12~13kb的单股正链RNA,根据能否使培养细胞产生细胞病变将其分为两种生物型:产细胞病变型和非细胞病变型。BVDV主要侵害牛、鹿和猪等动物,引起以肠道疾病、繁殖障碍、呼吸系统疾病、胎儿畸形和持续性感染。 BVDV的基因组包含5’-非编码区(5’-NTR)、编码一个大的聚合蛋白的开放阅读框架和3’-非编码区(3’-NTR)。研究表明5’-NTR能形成稳定的二级结构,具有核糖体进入位点,是BVDV的翻译和复制的调控元件。由于BVDV 5’-NTR的序列高度保守,所以常根据这一区域设计引物,进行BVDV的检测。 目前BVDV的检测方法有病原分离、中和试验、直接荧光抗体试验、ELISA及核酸杂交技术、RT-PCR等多种方法,但血清学方法多存在费时、费力、准确率低等缺点,而分子生物学的常规方法虽然在某些方面可以弥补,但假阳性、环境污染、重复性不高等不足限制了推广应用, 随着分子生物学的发展,实时定量荧光RT-PCR技术日益成熟,尤其是外标实时定量荧光PCR被认为是迄今为止最准确、重复性最好的定量方法,广泛应用于基因表达、病原体检测等诸多领域。因此为适应进出口检疫的要求建立一种快速、灵敏、特异、重复性良好的检测方法势在必行。 试验中应用MDBK细胞培养牛病毒性腹泻病毒标准株Oregon C24V,72小时出现细胞病变(CPE):细胞变圆、细胞核固缩到边缘、胞浆内出现大量空泡、脱落。在长有单层细胞的96孔细胞培养板上依次加入10倍稀释的Oregon C24V 0.1mL,记录病变孔数及其出现的稀释倍数,根据Reed-Muench法计算培养的Oregon C24V TCID_(50)=10~(-4.3)。 以NADL、New York-1、Singer(Ia)、Oregon C24V(Ib)、Draper(Ib)等参考BVDV毒株5’端非编码区为参考序列,设计合成了实时定量荧光RT-PCR引物和TaqMan荧光探针,设计目的片段大小94bp,TaqMan荧光探针5’端报告荧光为TAM,3’端淬灭荧光为TAMAR。初步设计反应参数后体系参数优化结果为:25mM Mg~(2+) 5μL、5U/μL Taq酶0.5μL、20μM引物混合物1μL与20μM探针1.5μL,退火延伸温度为60℃。进一步进行灵敏性、重复性、特异性试验,结果本方法最低可检测到0.1TCID_(50);特异性试验中,BVDV阴、阳性对照成立,检测猪瘟病毒、牛轮状病毒、牛传染性鼻气管炎病毒
【学位授予单位】:吉林农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S854.4

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【引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 王秀敏;烟草蚀纹病毒CP、HC-Pro基因克隆及与甘蔗花叶病毒之间交互保护作用的研究[D];西北农林科技大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 秦焕美;牛血清外源病毒检查方法比较和应用[D];吉林大学;2011年
2 姚华伟;猪瘟兔化弱毒疫苗效检替代方法及疫苗中牛病毒性腹泻病毒检测方法的研究[D];西南大学;2011年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 朱文斯,赖平安,黄茜华,张鹤晓,杨伟;荧光RT-PCR快速检测禽流感病毒H5亚型的研究[J];中国医药导刊;2003年01期
2 王新平,周绪斌;猪感染牛病毒性腹泻病毒的研究进展[J];动物医学进展;1998年01期
3 John A.Ellis,顾海燕,许信刚,李健强;牛病毒性腹泻疫苗展望[J];国外畜牧科技;2001年01期
4 杜锐,王新平,宣华,王全凯,杨林,王树志;从幼鹿顽固性腹泻病料中检出牛病毒性腹泻——粘膜病病毒[J];经济动物学报;1998年01期
5 杨玉莹,任向远,常建华,唐娟,糜克永,王蔷,翁晓旺;牛病毒性腹泄病毒核酸探针的研制及其应用[J];内蒙古畜牧科学;1997年02期
6 孙耀华,孙大庆;犊牛病毒性腹泻症的综合疗法[J];饲料博览;1997年04期
7 张鹤晓,赖平安,孙颖杰,朱文斯,杨伟,李宁;中强毒力新城疫病毒(NDV)荧光RT-PCR检测方法建立及体系优化[J];检验检疫科学;2003年03期
8 张丽颖,涂长春;牛病毒性腹泻病诊断方法的研究进展[J];畜牧兽医科技信息;2004年05期
9 王新华,刘守仁,张荣兴,葛锡锐;牛病毒性腹泻病毒侵染宿主细胞的电镜观察[J];畜牧兽医学报;2002年05期
10 陈茂盛,寇改霞,蒋宏伟,吴双民;陕西省牛病毒性腹泻/粘膜病血清学调查[J];畜牧兽医杂志;1994年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 ;Prevention and Control Measures of Bovine Viral Diarrhea Virus in Developed Country and Its Inspiration to China[J];Animal Husbandry and Feed Science;2010年Z2期
2 邹励丹;彭远义;彭涛;;鸡葡萄球菌病诊治一例[J];安徽农学通报;2007年17期
3 张任娜;覃志初;帅领;刘晓燕;王豪举;;鸭瘟病毒的分离与鉴定[J];安徽农学通报;2007年20期
4 张家好,马伏泉;鸡减蛋综合症病毒在鸭胚中增殖规律的研究[J];安徽农业科学;2001年01期
5 赵瑞宏,潘孝成,张小飞,张丹俊,陈鑫;肥东县长临爆发幼鸭鸭瘟的调查与分离鉴定[J];安徽农业科学;2001年06期
6 李军民;靳二辉;时红攀;;犬瘟热的诊治[J];安徽农业科学;2006年15期
7 揭候申;;高致病性禽流感的诊断与免疫[J];安徽农业科学;2006年16期
8 沈咏舟;;新城疫病毒的进化与基因分型[J];安徽农业科学;2006年20期
9 袁章;郭万柱;余光勇;陈弟诗;;猪伪狂犬病毒载体的研究进展[J];安徽农业科学;2007年06期
10 王岩;杨明凡;崔保安;张素梅;陈红英;;鸡传染性喉气管炎病毒长葛株gE全基因的克隆与序列分析[J];安徽农业科学;2007年28期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 庄金秋;梅建国;沈志强;;水貂细小病毒性肠炎实验室诊断方法研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
2 毛立;李文良;严少华;钟声;郭俊尧;江杰元;;山羊流产病料中牛病毒性腹泻病毒的检测[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
3 李雯;李晴云;刘岚;姜小雨;余春林;宋小燕;胡陈明;黄超;;禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗对大恒优质肉鸡的免疫效果分析[A];安全优质的家禽生产——第十五次全国家禽学术讨论会论文集[C];2011年
4 王新平;涂长春;李红卫;宣华;费恩阁;殷震;;从疑似猪瘟病料中检出牛病毒性腹泻病毒[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
5 郭素玲;毛伟斌;;禽流感的流行特点与预防措施[A];濮阳市首届学术年会论文选编[C];2006年
6 刘欣晏;冯卫国;吴春涛;;牛传染性鼻气管炎病的研究进展[A];山东农业微生物技术学术研讨会论文集[C];2006年
7 彭军;李顺成;王树明;牛钟相;;孔雀低致病性禽流感病毒株的分离与鉴定[A];山东农业微生物技术学术研讨会论文集[C];2006年
8 沈美艳;崔宝玉;牛钟相;朱瑞良;张广斌;;ELISA双抗体夹心法检测鸡传染性腺胃炎[A];山东农业微生物技术学术研讨会论文集[C];2006年
9 戴爱玲;李晓华;杨小燕;沈绍新;;间接血凝试验与酶联免疫吸附试验检测猪瘟抗体的比较[A];福建省畜牧兽医学会2009年学术年会论文集[C];2009年
10 杨桂梅;高洪;徐自忠;花群义;周晓黎;;水泡性口炎病毒和牛病毒性腹泻病毒的检测方法研究[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 姚美玲;H9N2亚型禽流感病毒气溶胶发生与传染机制及其感染SPF鸡的特点[D];山东农业大学;2010年
2 张琪;KLT对中脑神经系统疾病的影响及KLT、NDV、SW联合抗肿瘤作用机制研究[D];西北农林科技大学;2010年
3 任艳;牛病毒性腹泻病毒囊膜蛋白E2与牛胚胎滋养层细胞相互作用的分子机制研究[D];石河子大学;2010年
4 胡杰;广西种猪场猪瘟监控方法的建立及其应用[D];南京农业大学;2009年
5 刘翠权;广西395个规模猪场猪呼吸道疾病综合征的病原学调查及防控措施[D];南京农业大学;2011年
6 仇华吉;猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-la株基因组解析及其囊膜蛋白结构与功能分析[D];东北农业大学;2001年
7 张以芳;中国蓝舌病毒S10、L2基因序列分析及S10基因克隆表达[D];中国人民解放军军需大学;2001年
8 吴丹;猪细小病毒NS1基因与VP2基因的克隆、表达及VP2基因免疫的研究[D];东北农业大学;2002年
9 杨玉莹;J亚群禽白血病病毒内蒙株的分离鉴定及其部分分子生物学特性的研究[D];内蒙古农业大学;2003年
10 何启盖;猪伪狂犬病基因缺失疫苗研究[D];华中农业大学;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孟庆娜;H5亚型禽流感病毒抗体快速检测试纸条的研制[D];华中农业大学;2010年
2 贾丽锋;A型流感病毒NP蛋白的原核表达及初步应用[D];郑州大学;2010年
3 王秀云;鸡传染性法氏囊病病毒山东株的分离鉴定及免疫预防研究[D];山东农业大学;2009年
4 孙洪磊;整合禽网状内皮组织增生病病毒基因的鸡痘病毒分子生物学鉴定及致病机理研究[D];山东农业大学;2010年
5 曲新泽;传染性支气管炎病毒的基因分型及S1基因和N基因遗传多样性分析[D];山东农业大学;2010年
6 张恒;中药“复方黄连散”防治仔猪大肠杆菌性腹泻机理的研究[D];中国农业科学院;2010年
7 刘腾飞;犬副流感病毒的检测和NP基因的克隆、表达及其重组蛋白的免疫学活性的研究[D];新疆农业大学;2010年
8 申卫红;犬瘟热病毒N蛋白基因的克隆、原核表达及其重组蛋白的抗原性研究[D];新疆农业大学;2010年
9 朱国坡;RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测CSISV在SPF雏鸡体内分布[D];河南科技学院;2010年
10 王若;口蹄疫病毒结构蛋白VP4基因的真核表达[D];河北农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王琴,宁宜宝;猪瘟免疫失败的主要原因分析[J];当代畜禽养殖业;2003年07期
2 蒋春燕;王泰健;王琴;范学政;;实时荧光定量PCR技术[J];动物医学进展;2005年12期
3 王新平,周绪斌;猪感染牛病毒性腹泻病毒的研究进展[J];动物医学进展;1998年01期
4 邓少丽,罗阳;荧光定量PCR技术及其在临床上的应用[J];国外医学(临床生物化学与检验学分册);2002年05期
5 王小红;荧光定量PCR技术研究进展[J];国外医学(分子生物学分册);2001年01期
6 王颖,余道坚,康林,章桂明,金显忠,杨伟东,黄佩卿,吴琼,陈枝楠,储成才,程颖慧;应用PCR技术检测饲料中的转基因成分[J];农业生物技术学报;2002年02期
7 温孚江;植物对病毒侵染的反应及识别机制[J];山东农业大学学报;1995年03期
8 陈忠斌,王升启,孙志贤;分子信标核酸检测技术研究进展[J];生物化学与生物物理进展;1998年06期
9 温孚江,朱常香;转录后基因沉默与植物的病毒抗性[J];生物工程学报;2001年03期
10 张立国,张琚;实时定量PCR技术的介绍[J];生物技术;2003年02期
中国博士学位论文全文数据库 前5条
1 朱俊华;马铃薯Y病毒衣壳蛋白基因片段长度和结构对RNA介导抗病性的影响[D];山东农业大学;2003年
2 廖晓兰;几种植物病原原核生物实时荧光PCR检测方法的研究[D];湖南农业大学;2003年
3 王道荣;转移相关基因CD44和胃癌关系的研究[D];南京医科大学;2003年
4 余瑛;人酸性成纤维细胞生长因子在大肠杆菌和酵母中的表达、纯化及其特性分析[D];重庆大学;2003年
5 熊盛;重组人源抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌和巴氏毕赤酵母中的表达、纯化与性质鉴定[D];华南理工大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 龚杰万;mae和misgurin两种基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达[D];暨南大学;2002年
2 郑育声;重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽的构建及其在毕赤酵母中的表达[D];暨南大学;2002年
3 于宗振;A型肉毒毒素Hc段基因在大肠杆菌及毕赤酵母中的表达[D];中国农业大学;2003年
4 李璟;区别伪狂犬病病毒株和疫苗株的荧光实时定量PCR方法的建立[D];四川农业大学;2004年
5 陈艳;淀粉液化芽孢杆菌中性植酸酶基因在大肠杆菌和毕赤酵母中的高效表达[D];浙江大学;2004年
6 尹双辉;猪瘟病毒主要抗原蛋白在毕赤酵母和大肠杆菌中的表达[D];甘肃农业大学;2004年
7 董流昕;转基因抗草甘膦大豆参比分子的构建[D];北京林业大学;2005年
8 张丽娜;小麦抗白粉病相关基因的克隆研究[D];西北师范大学;2005年
9 邓念华;Real-time PCR检测HSV-2的方法学建立及初步应用[D];重庆医科大学;2005年
10 刘金香;应用实时定量PCR的方法检测BCR-ABL mRNA水平的研究[D];吉林大学;2005年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 马琼;吴云锋;杨艳;王秀敏;郝兴安;;烟草蚀纹病毒对玉米矮花叶病防治效果的研究[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2007年11期
2 祁永峰;董建红;王净;;猪瘟免疫失败原因分析及对策[J];中国畜牧兽医文摘;2012年04期
3 王琴;范学政;赵启祖;徐璐;;猪瘟防控技术研究进展[J];中国兽药杂志;2012年09期
4 张强;李树清;李健;熊炜;王巧全;李春阳;黄忠荣;;进口胎牛血清中牛病毒性腹泻病毒污染的检测[J];中国动物检疫;2013年02期
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 马琼;用烟草蚀纹病毒防治玉米矮花叶病的研究[D];西北农林科技大学;2007年
2 纪玲玲;烟草脉带花叶病毒CP基因的原核表达及免疫金标试纸条的研制[D];西北农林科技大学;2008年
3 睢韡;湖北省烟草病毒病毒原种类的鉴定[D];华中农业大学;2012年
4 张方;烟草秸秆生物有机肥携带病毒的血清学检测[D];华中农业大学;2013年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 涂长春,李红卫,金扩世,章金钢,白安斌,刘士英,扈荣良,殷震;猪瘟病毒石门株特异cDNA片段的扩增与序列分析[J];病毒学报;1994年01期
2 郑怀竞;国内基因扩增技术的进展[J];中国医药导刊;2001年04期
3 李振勇,刘明霞;尿嘧啶DNA糖基化酶在PCR防污染中的应用[J];中国医药导刊;2001年04期
4 何蕴韶;荧光探针定量PCR技术[J];中国医药导刊;2001年04期
5 朱文斯,黄茜华,黄艳兰,李世花,王关清,于洁;含内标的荧光PCR——荧光定量PCR[J];中国医药导刊;2001年04期
6 沈正达;;与兽医学和公共卫生学有关的病毒新近分类地位[J];甘肃畜牧兽医;1993年06期
7 闫玉河,陈春花,邓瑞广,李学伍;用RT-PCR方法快速诊断禽流感[J];河南农业科学;2000年11期
8 纪金春;贺生录;谢占玲;金美旦巴;王海林;;牛病毒性腹泻/粘膜病的诊断与防制[J];青海畜牧兽医杂志;1990年03期
9 陈忠斌,王升启,孙志贤;分子信标核酸检测技术研究进展[J];生物化学与生物物理进展;1998年06期
10 杜元钊,刘佩兰,郑志刚;利用卵黄提取物检测禽的多种疾病[J];动物检疫;1991年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 邱昌庆;用PCR检测母牛胚胎的BVDV[J];畜牧兽医科技信息;1998年21期
2 邱昌庆;用BVDV重组蛋白诊断牛病毒性腹泻[J];畜牧兽医科技信息;1998年01期
3 John A.Ellis,顾海燕,许信刚,李健强;牛病毒性腹泻疫苗展望[J];国外畜牧科技;2001年01期
4 吴健敏,蒋冬福,韦志峰,吕宗吉,李月红,涂长春;一起猪瘟与牛病毒性腹泻混合感染猪的报道[J];中国兽医杂志;2003年01期
5 张丽颖,涂长春;牛病毒性腹泻病诊断方法的研究进展[J];畜牧兽医科技信息;2004年05期
6 邱昌庆;用PCR技术检测BVDV临床样品分离株[J];畜牧兽医科技信息;2000年09期
7 刘伯淳;用RT-PCR检测乳样中的BVDV[J];畜牧兽医科技信息;1999年24期
8 韩冬艳,邱杨,单松华,王巧全;新疆某地牛群中检出BVDV[J];中国动物检疫;2001年02期
9 沈敏,王新华,钟发刚;牛病毒性腹泻病毒致病机理研究进展[J];动物医学进展;2002年06期
10 王树成,林建辉,刘宏,董志珍;用MDBK传代细胞繁殖BVDV毒株的研究[J];中国动物检疫;1995年04期
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1 尹惠琼;王丽;张启模;孙宇;章金刚;;牛病毒性腹泻病毒检测技术研究[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
2 黄凯;张俊杰;刘英霞;齐长明;邵小磊;马宏磊;马翀;张振新;曹杰;;北京地区规模化牛场BVDV持续感染牛清除方案的初步实施[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(上册)[C];2010年
3 郜玉钢;李璠瑛;刘佳佳;杜锐;臧埔;;梅花鹿源CCSYD分离株BVDV基因E0的克隆与序列分析[A];2010中国鹿业进展[C];2010年
4 田晶华;王新华;钟发刚;温建新;沈敏;;绵羊人工感染BVDV病理组织学研究[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十一次兽医病理学、第十次动物病理生理学学术研讨会论文集[C];2001年
5 尹惠琼;史利军;孙宇;章金刚;;牛病毒性腹泻病毒检测技术研究[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集[C];2010年
6 段晓东;季新成;刘菲;牛国辉;王大孝;于学辉;张彦明;曾新强;;牛精液中BVDV荧光定量RT-PCR检测方法的建立[A];动物检疫学分会2010年学术年会论文集[C];2010年
7 钟发刚;王新华;沈敏;温建新;张银国;;牛病毒性腹泻病毒(BVDV)野毒株的分离鉴定[A];西部大开发 科教先行与可持续发展——中国科协2000年学术年会文集[C];2000年
8 王大孝;朱建民;季新成;王陆宝;于学辉;刘小兰;牛国辉;;牛病毒性腹泻病毒的分离、鉴定与同源性分析[A];动物检疫学分会2010年学术年会论文集[C];2010年
9 郜玉钢;王树志;张连学;;鱼腥草抗梅花鹿源BVDV病毒的实验研究[A];第六届全国药用植物和植物药学术研讨会论文集[C];2006年
10 毛立;李文良;严少华;钟声;郭俊尧;江杰元;;山羊流产病料中牛病毒性腹泻病毒的检测[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
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1 记者 周泓;国内首创传代细胞悬浮培养技术高效价猪瘟疫苗问世[N];中国畜牧兽医报;2009年
2 上海恒丰强动物药业有限公司技术部 王华听申俊苗 刘晚兰 陈慧萍;猪瘟疫苗的正确使用[N];中国畜牧兽医报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 邓宇;我国部分地区猪源牛病毒性腹泻病毒研究[D];四川农业大学;2012年
2 孙宏进;基因2型牛病毒性腹泻病毒的分离与鉴定[D];扬州大学;2010年
3 季新成;牛传染性鼻气管炎病毒和牛病毒性腹泻病毒分子生物学检测技术研究[D];西北农林科技大学;2010年
4 任艳;牛病毒性腹泻病毒囊膜蛋白E2与牛胚胎滋养层细胞相互作用的分子机制研究[D];石河子大学;2010年
5 倪伟;抗牛病毒性腹泻病毒siRNA与miRNAs功能基因筛选与评价[D];石河子大学;2013年
6 吴明福;牛病毒性腹泻病毒全基因克隆及核酸疫苗初步研究[D];东北农业大学;2007年
7 张光辉;河南省肉牛规模化养殖场牛病毒性腹泻的诊断与防制技术研究[D];南京农业大学;2004年
8 张润祥;重组牛IFN-λ3的制备及其与IFN-α/IFN-β/IFN-γ抗病毒活性比较研究[D];东北农业大学;2013年
9 黄璇;单细胞技术在正链RNA病毒研究中的应用[D];武汉大学;2010年
10 刘亚刚;猪瘟疫苗防制奶牛、牦牛病毒性腹泻/粘膜病的研究[D];四川大学;2004年
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1 赵玉龙;牛病毒性腹泻病毒(BVDV)卵黄抗体制备及其对病毒中和活性研究[D];石河子大学;2009年
2 贾莹;BVDV NS3表位串联及抗体间接ELISA方法的建立[D];东北农业大学;2011年
3 吴文辉;猪群BVDV感染状况调查及成因初步分析[D];上海交通大学;2011年
4 李树博;辽宁省牛、羊BVDV、IBRV血清流行病学调查与IBRV病毒分离鉴定[D];中国农业科学院;2012年
5 蒙明璐;猪源牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立及表达BVDV保护性抗原重组猪痘病毒的构建[D];南京农业大学;2012年
6 李慧昕;BVDV自体蛋白酶P20和核心蛋白P14基因的克隆及原核表达[D];东北农业大学;2004年
7 刘梦媛;牦牛BVDV血清流行病学调查及BVDV疫苗和猪瘟疫苗对牦牛的免疫效果[D];华中农业大学;2014年
8 王研;牛病毒性腹泻黏膜病实用诊断方法的建立[D];西南民族大学;2013年
9 张青婵;猪源牛病毒性腹泻病毒ZM-95株全基因组序列分析[D];中国人民解放军军需大学;2003年
10 孟雨;牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立及5’-UTR基因遗传变异分析[D];西北农林科技大学;2010年
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