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《吉林农业大学》 2007年
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奶牛DRB3.2基因与主要病原菌性乳房炎相关性研究

赵福斌  
【摘要】: 奶牛乳房炎是由多种原因引起的奶牛乳腺炎症,使奶牛生产性能下降,严重危害我国奶牛业的发展。导致奶牛乳房炎的病原种类众多,给该病的预防和治疗带来困难。随着分子生物学技术的迅速发展,分子抗病育种成为防治奶牛乳房炎的一条新途径。奶牛MHC基因即BoLA(Bovine Lymphocyte Antigen)基因,以其丰富的多态性和高度连锁不平衡等特点,受到遗传育种学家的高度重视。很多国内外学者从MHC基因与体细胞数相关性、与单一病原体易感程度的相关性,与乳房炎易感性和抗性等几个方面进行了研究。本试验对224头泌乳期中国荷斯坦奶牛进行了乳房炎检测,并对主要病原菌进行了分离鉴定,检测了BoLA-DRB3第二外显子的基因多态性,并分析了各基因型与3种主要病原菌引起乳房炎的相关性。本试验为开展分子抗病育种进行初步尝试。 1奶牛乳房炎的检测与主要病原的分离鉴定 使用兰州畜牧兽医研究所研制的乳房炎诊断试剂,对山东省济南、东营两地及其周边地区大型奶牛场的224头泌乳期的中国荷斯坦奶牛进行乳房炎检测,检出患病奶牛占所检牛群的72.32%。对乳房炎阳性乳样进行细菌分离,纯培养和生化鉴定,结果共分离到11种病原菌,其中金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌为主要致病菌,由这3种病原菌引起的乳房炎占总患病牛只的86.21%。根据细菌的16sRNA等特异性保守基因序列设计引物,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌进行了PCR鉴定,与生化鉴定结果一致。 2奶牛BoLA-DRB3.2基因PCR-RFLP分析 采用PCR-RFLP技术分析了224头中国荷斯坦牛BoLA-DRB3.2基因的多态性。结果表明,所检测牛群中BoLA-DRB3.2基因在HaeⅢ和RsaⅠ两个酶切位点,存在丰富的多态性。HaeⅢ酶切位点存在4种等位基因,有4种基因型;RsaⅠ酶切位点存在3种等位基因,有4种基因型。经x~2适合性检验,所检测牛群中BoLA-DRB3.2基因在HaeⅢ和RsaⅠ这两个酶切位点上均未达到Hardy-weinberg平衡状态。 3相关性分析 将分离鉴定乳房炎致病菌的种类和数量数据与基因型数据整合,通过SAS数据分析软件,分析BoLA-DRB3.2基因各基因型与奶牛对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌性乳房炎的易感程度的相关性。结果表明:HaeⅢBC基因型与金黄色葡萄球菌感染引起的奶牛乳房炎显著相关,RsaⅠEE,RsaⅠEF基因型与大肠杆菌感染引起的奶牛乳房炎显著相关。本试验为奶牛乳房炎抗病基因的筛选提供了有价值的参考数据。
【学位授予单位】:吉林农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S858.23

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【引证文献】
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