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《东北师范大学》 2006年
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中国松嫩平原三种重要耐盐碱牧草的组织培养和体细胞克隆变异研究

李晓玲  
【摘要】: 本研究分别以短芒野大麦幼穗、星星草成熟种子和朝鲜碱茅成熟种子为外植体,建立了稳定、高效的三种重要耐盐碱牧草组织培养体系。并应用AFLP、S-SAP和MSAP三种分子标记技术对短芒野大麦、星星草和朝鲜碱茅在组织培养过程中产生的遗传变异和基于DNA甲基化变异的表观遗传变异进行了比较分析。研究结果表明,短芒野大麦、星星草和朝鲜碱茅三种牧草的愈伤组织和再生植株在分子水平上均发生了遗传变异和表观遗传变异,且二者在有些情况下密切相关。 选用18对AFLP选择性扩增引物对短芒野大麦供体亲本植株、两瓶愈伤组织和随机选取的44株再生苗进行选择性扩增,共产生793条清晰扩增带,其中73条呈多态性,多态比例为9.3%。不同再生植株产生的多态性条带数目变化很大,从2到55条不等。其中大多数再生植株(68.2%)积累了2-3个变异,而少数再生植株则产生了大量的多态性位点。选用24对S-SAP选择性扩增引物对已进行AFLP检测的两瓶愈伤组织和有代表性的8株再生植株样本进行选择性扩增,共产生768条清晰带,其中151条呈多态性,多态性比例为19.7%,但没有发现BARE-1转座的直接证据。选用22对MSAP选择性扩增引物对以上同样愈伤组织和再生植株进行了选择性扩增,检测到170-196个甲基化的CCGG位点。结果表明,在短芒野大麦再生植株中,CCGG位点内侧C完全甲基化水平和外侧C半甲基化水平及总的甲基化水平均较亲本显著降低,甲基化变异的主要模式是内侧C去甲基化变异。序列分析结果显示,短芒野大麦发生遗传变异和甲基化变异的基因组位点均包括已知功能基因和转座元件。Mentel检测结果表明,MSAP检测结果和S-SAP检测结果之间在统计学上具有显著相关性,其相关系数为0.8118(1000排列, p0.01),而MSAP检测结果和AFLP检测结果之间没有明显相关性(r=0.1048)。 对来源于同一粒星星草种子的实生苗、3瓶愈伤组织及8株再生植株,分别进行了AFLP、S-SAP和MSAP分析。选用19对AFLP选择性扩增引物对其进行扩增,共产生925条清晰扩增带,其中16条呈多态性,多态性位点比例为1.7%。选用24对S-SAP引物对上述样本进行选择性扩增,共扩增出789个位点,其中36个位点具有多态性,多态性位点比例为4.6%。用16对MSAP选择性扩增引物对其进行扩增,分别检测到163-170个甲基化的CCGG位点。与亲本植株相比较,供试的3瓶愈伤组织在所检测到的CCGG位点上两种甲基化即外侧C半甲基化和内侧C完全甲基化水平均表现为轻微程度的降低,变化的主要模式是内侧C去甲基化变异高于超甲基化变异,而再生植株DNA甲基化水平与亲本植株对应的甲基化水平之间差异不显著。Mentel检测结果表明MSAP检测到的DNA甲基化变异及AFLP和S-SAP检测到的遗传变异之间均没有显著的相关性。 同样,对来源于同一粒朝鲜碱茅种子的实生苗、3瓶愈伤组织及8株再生苗,分别进行了AFLP、S-SAP和MSAP分析。选用19对AFLP引物对其进行选择性扩增,共产生952条清晰扩增带,其中59条呈多态性,多态比例为6.2%。用24对S-SAP选择性扩增引物对上述
【学位授予单位】:东北师范大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:S54

【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前6条
1 王涛;碱茅再生体系建立及其遗传转化的研究[D];东北林业大学;2011年
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3 于洪柱;紫花苜蓿(Medicago sativa)雄性不育系(MS-GN)的初步研究[D];东北师范大学;2011年
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5 石奔;中国嫩江平原芦苇(Phragmites austrilis(Cav.)Trirn.ex Steud)四个天然种群的表观遗传多样性研究[D];东北师范大学;2012年
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张立宾;郭新霞;徐化凌;常尚连;;耐盐蔬菜碱蓬的耐盐能力及其对滨海盐渍土的改良效果[A];山东园艺学会第七次会员代表大会暨学术研讨会论文集[C];2011年
2 蒋姝;孟金贵;崔光芬;贾文杰;王祥宁;吴丽芳;张艺萍;;植物离体诱变技术及其在百合育种中的应用研究进展[A];中国球根花卉研究进展2011[C];2011年
3 刘选明;杨远柱;陈彩艳;唐平徕;刘斌;符辰建;;利用体细胞无性系变异筛选水稻株1S矮秆突变体研究[A];21世纪作物科技与生产发展学术讨论会论文集[C];2002年
4 付凤玲;李晚忱;;N6培养基成分改进对玉米未成熟胚胚性愈伤组织诱导培养的作用[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
5 杨才;王秀英;连俊峰;;采用花药单倍体育种方法育成了花中21号莜麦新品种[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
6 李晚忱;杜娟;;外源超氧化物歧化酶基因(MnSOD)在玉米中的过量表达及其对提高抗逆性的作用[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
7 宋芸;夏艳莉;魏昕;张志明;赵茂俊;潘光堂;;玉米幼胚培养4个性状的基因效应分析[A];2004全国玉米种质扩增、改良、创新与分子育种学术会议论文集[C];2004年
8 程林梅;孙毅;任永玲;;转基因耐盐植物研究进展[A];作物逆境生理研究进展——中国作物生理第十次学术研讨会文集[C];2007年
9 徐庆国;殷绪明;李海林;;籼稻成熟胚的组织培养特性研究[A];中国作物学会2007年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2007年
10 FRéDéRIC Ngezahayo;;Stochastic retrotranspositional activation of a rice endogenous retrotransposon Tos 17 by inter-strain hybridization[A];中国作物学会2007年学术年会论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 耿小丽;苜蓿单倍体、纯合四倍体的诱导及愈伤组织DNA含量变异的研究[D];甘肃农业大学;2010年
2 王延秀;浓缩单宁合成的分子调控及紫花苜蓿遗传转化研究[D];甘肃农业大学;2010年
3 黄俊骏;DNA甲基转移酶基因的表达和花粉母细胞DNA的甲基化[D];兰州大学;2010年
4 侯钰荣;伊犁绢蒿生理生态适应性的研究[D];新疆农业大学;2010年
5 李望丰;SsNHX1基因在紫花苜蓿中的表达及其耐盐性研究[D];东北师范大学;2010年
6 范菊莉;人血小板冷冻干燥保存工艺的优化研究[D];浙江大学;2009年
7 杨飞;玉米有丝分裂过程中表观遗传修饰间的相互作用[D];武汉大学;2010年
8 黄明;分子标记与水稻遗传多样性及杂种优势的相关性研究[D];湖南农业大学;2010年
9 荣立苹;东北地区野生百合种质资源及遗传多样性研究[D];沈阳农业大学;2010年
10 关正君;樱桃番茄的HBsAg基因转化及其突变体特性研究[D];西北大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 罗杨;柑橘变异材料的遗传鉴定与品质分析[D];华中农业大学;2010年
2 孙明伟;基于SRAP标记的部分百合种及品种的遗传关系及亲和性分析[D];华中农业大学;2010年
3 邓华堂;缺须盆唇鱼的生物学及其资源量研究[D];华中农业大学;2010年
4 李炫丽;ms2Bnap同源序列在萝卜—芥蓝异源四倍体中的克隆及表观遗传变异分析[D];华中农业大学;2010年
5 杨勇;青藏高原一年生野生大麦的农艺性状及品质性状分析[D];华中农业大学;2010年
6 秦华伟;黄瓜再生体系的建立及耐热材料的筛选[D];华中农业大学;2010年
7 林少航;外源甲基紫精对盐胁迫下黄瓜叶片抗氧化酶与DNA甲基化的影响[D];山东农业大学;2010年
8 刘忠静;外源过氧化氢对干旱胁迫下两种生态型黄瓜叶片抗氧化酶与DNA甲基化的影响[D];山东农业大学;2010年
9 于海涛;粗山羊草遗传多样性及与普通小麦D组染色体多样性比较研究[D];山东农业大学;2010年
10 张晓磊;栎类树种幼苗对淹水胁迫的响应[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张立宾;刘玉新;张明兴;;星星草的耐盐能力及其对滨海盐渍土的改良效果研究[J];山东农业科学;2006年04期
2 孙阳;魏海蓉;程淑云;刘庆忠;李宪利;刘崇琪;;蓝莓组培苗玻璃化及恢复的研究[J];山东农业科学;2008年03期
3 孙庆春;郑成淑;丰震;;菊花玻璃化苗与正常苗的生理特性比较[J];山东农业科学;2009年05期
4 丁海荣;洪立州;王茂文;杨智青;;星星草耐盐生理机制及改良盐碱土壤研究进展[J];安徽农学通报;2007年16期
5 徐文华;陈桂琛;;藏药麻花艽的组织培养与快速繁殖[J];安徽农业科学;2006年19期
6 陈云风;黎世龄;李晓婷;;影响MS培养基凝固效果的几个因素的研究[J];安徽农业科学;2008年04期
7 闫忠业;伊凯;刘志;王冬梅;杨锋;吕天星;李作轩;张志宏;;富士系苹果叶片气孔观察[J];北方园艺;2007年09期
8 韦梅琴;郑江伟;;东方百合试管正常苗与玻璃苗叶片解剖结构的比较[J];北方园艺;2007年12期
9 王雷;吴丽丽;曲跃军;吕澈妍;郑威;姜廷波;;NaCl胁迫下星星草生理响应及分子机制的研究[J];北方园艺;2010年07期
10 王铖,李青,辛燕;高羊茅种子愈伤组织诱导及植株再生研究[J];北京林业大学学报;2004年01期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 李梅兰;曾广文;朱祝军;;白菜不同器官及不同生育期茎尖甲基化水平比较[A];中国园艺学会第五届青年学术讨论会论文集[C];2002年
2 于洪柱;王志锋;金春花;徐安凯;;苜蓿杂交育种研究进展[A];中国草学会牧草育种委员会第七届代表大会论文集[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前9条
1 张淑萍;芦苇分子生态学研究[D];东北林业大学;2001年
2 王磊;玉米Cat1基因顺式作用元件ABRE的反式作用因子的克隆和功能分析[D];中国农业科学院;2002年
3 汪炳良;萝卜春化作用及其与DNA甲基化水平的关系[D];浙江大学;2004年
4 赵丽梅;大豆细胞质雄性不育的遗传和分子基础研究[D];东北师范大学;2005年
5 赵团结;大豆雄性不育性的自然变异、种质发掘与选育研究[D];南京农业大学;2006年
6 高翠萍;苜蓿雄性不育系Ms-4杂交改良[D];内蒙古农业大学;2007年
7 原玉香;白菜类作物抽薹开花的分子遗传分析[D];中国农业科学院;2008年
8 丁明忠;苎麻雄性不育的遗传机理及应用研究[D];四川农业大学;2008年
9 董杰;白蜡属种间杂种抗旱优势及其抗旱性分子机理的研究[D];东北林业大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李媛媛;干旱胁迫下马铃薯苗基因组甲基化变化情况及生理生化变化研究[D];湖南农业大学;2011年
2 乔幸;大麦种子成熟和萌发过程DNA甲基化多样性分析[D];四川农业大学;2011年
3 韩丹萍;大白菜抽薹过程中发生叶色转变的分子机制[D];东北农业大学;2011年
4 赵芳;CPPU对小麦生长发育的生理生化及表观遗传的影响[D];河北农业大学;2012年
5 黄细松;白菜开花时间相关基因的分子标记及春化相关基因的克隆和表达分析[D];浙江大学;2006年
6 曹聪;水稻早期盐胁迫生长调控中的DNA甲基化研究[D];首都师范大学;2007年
7 孙静;苜蓿雄性不育系杂交后代育性鉴定[D];内蒙古农业大学;2007年
8 王连嵋;空间环境引起水稻DNA甲基化与蛋白质组变化及其关联分析[D];哈尔滨工业大学;2007年
9 李晋豫;白菜春化相关基因BcFLC的克隆与功能分析[D];浙江大学;2007年
10 庄婷婷;NO胁迫诱导水稻DNA甲基化变异及转座子和基因的转录激活[D];东北师范大学;2008年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前3条
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【相似文献】
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6 张肇富;具有高固体含量的番茄新品种[J];河北农业科技;1998年01期
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9 R.K Tiwari,潘有福,Mala Trivedi,Maneesh Mishra,R.Chandra;通过体外诱导突变及筛选来改良果树作物特性的研究进展(英文)[J];西北植物学报;2005年10期
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中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 李晓玲;中国松嫩平原三种重要耐盐碱牧草的组织培养和体细胞克隆变异研究[D];东北师范大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 于晓明;玉米自交系亲本及其杂交种的体细胞克隆变异研究[D];东北师范大学;2007年
2 薛兆亮;紫菜基因工程抗性压的筛选及体细胞克隆变异的初步研究[D];上海海洋大学;2012年
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