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《东北师范大学》 2007年
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人参叶和根cDNA文库构建及表达序列标签分析

王颖  
【摘要】: 人参作为一种传统的药用植物已有几千年的应用历史,现代药物化学和药理学研究证实了人参中的各种有效成分对中枢神经系统、心血管系统、消化系统、内分泌系统和免疫系统均具有明显的调节作用,但是目前关于人参有效成分的生物合成途径及其调控的基础研究相对缺乏。为了保存人参基因资源,并在基因水平上研究人参有效成分生物合成的调控机理,我们分别构建了人参叶和根组织的全长cDNA文库,并对文库中部分基因序列进行了分析。 本论文分别以六年生人参叶和四年生人参根为研究材料,用Trizol法提取总RNA后,应用Clontech公司的SMART技术构建了两个表达型λ噬菌体全长cDNA文库。经检测人参叶原始cDNA文库含6.55×105个克隆,重组率为81%,插入片段长度在0.3-2.5 kb之间。人参根原始cDNA文库含4.80×105个克隆,重组率为80%,插入片段长度在0.3-2.0kb之间。两者均符合cDNA文库构建的标准要求。 通过对文库中200个重组克隆的序列分析,获得了124条有效ESTs,经DNAStar软件中的Seqman程序聚类处理归纳出了79条非冗余单拷贝序列。通过NCBI提供的在线BLAST程序,在蛋白水平和核酸水平找到61条序列的同源物。之后在dbEST数据库中登录了38条人参EST序列。对测通全长的26条单拷贝序列进行阅读框查找和蛋白质结构域分析后,对12条单拷贝序列进行了功能注释,并提交GenBank登录。 人参叶和根组织cDNA文库的成功构建,不仅保存了人参基因资源,获得的大量表达序列标签,扩充了人参基因数据资料,而且为人参中有明确功能的特异基因的克隆、表达以及新基因的克隆与功能研究奠定了物质基础。
【学位授予单位】:东北师范大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S567.51

【参考文献】
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1 葛尔宁,严建伟,梁炳圻;人参的氨基酸含量[J];浙江中医学院学报;1997年03期
2 刘莉菲;张翼伸;;人参叶水溶性多糖的研究——酸性杂多糖P_A的纯化与结构的研究[J];东北师大学报(自然科学版);1988年03期
3 周静,王彩琴,袁媛,蒋学华;人参皂甙Re提取方法的研究[J];西北植物学报;2003年04期
4 张均田;人参皂甙Rg1和Rb1药理作用的比较[J];基础医学与临床;2000年05期
5 张崇禧,郑友兰,张春红,罗维莹,鲍建材,刘刚;不同方法提取人参总皂苷工艺的优化研究[J];人参研究;2003年04期
6 张晶,陈全成,弓晓杰,郑毅男,刘文秀;不同提取方法对人参皂苷提取率的影响[J];吉林农业大学学报;2003年01期
7 孙光芝,王继彦,刘志,王立娟,李向高;人参皂苷Rb_2的药理学研究概况[J];吉林农业大学学报;2005年03期
8 赵;20(R)-人参皂甙Rg3抗肿瘤作用的研究进展[J];临床肿瘤学杂志;2001年01期
9 陈薇,胡广林,王翊如,王小如;高效液相色谱法分离测定人参中的6种人参皂甙[J];色谱;2000年05期
10 刘春兰;人参果中杂多糖F的结构研究[J];首都师范大学学报(自然科学版);1996年02期
【共引文献】
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1 刘世强;刘丽萍;高利;;人参叶肉原生质体的游离与培养研究初报[J];辽宁农业科学;1993年02期
2 雷军,韩东,李想,赵露,王春东,张美萍;90年代我国人参组织和细胞培养研究概况[J];人参研究;1999年02期
3 方三华,沃兴德;内皮细胞在中药药理学中的应用[J];浙江中医学院学报;2003年04期
4 申力,张光霁;中医药治疗胃癌机理的现代研究进展[J];浙江中医学院学报;2005年02期
5 吴庆光,胡军影,王宗伟;人参皂苷Rg_3防治肿瘤作用及其机理的研究进展[J];中医药导报;2005年08期
6 史正芳;顾祖敏;;益气健脾类方药的近代研究[J];辽宁中医杂志;1983年11期
7 曹冬梅,韩振海,许雪峰;发根农杆菌Ri质粒研究进展[J];中国生物工程杂志;2003年02期
8 赵娇玲,胡文淑,江明性;杜仲的强壮作用及中枢镇静作用[J];华中科技大学学报(医学版);1989年03期
9 张南生;董光同;孙卫军;张秀华;刘存丽;;参一胶囊对肺癌患者血清血管内皮细胞生长因子的影响[J];温州医学院学报;2006年03期
10 刘贤旺;;人参组织培养研究的进展[J];江西中医学院学报;1993年02期
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1 王瑞平;薛维伟;;中药抗肿瘤血管生成研究近况[A];肿瘤药物及肿瘤传统医学治疗研究[C];2005年
2 刘墨祥;茆同江;夏叶玲;;人参皂苷-Rg_3微乳剂急性毒性试验及热原检查的研究[A];第一届全国中药商品学术大会论文集[C];2008年
3 房恒通;蒋与刚;;改善认知功能的植物化学成分研究进展[A];中国营养学会论文汇编之二[C];2007年
4 刘小花;封士兰;李芸;;高效液相色谱法测定肤痒颗粒中齐墩果酸的含量[A];首届中国中西部地区色谱学术交流会暨仪器展览会论文集[C];2006年
5 刘玉红;王凤山;;真菌多糖结构研究进展[A];山东省药学会第一届学术年会论文集(下)[C];2005年
6 赵渤年;刘青;寇桂风;;HPLC法测定九味羌活颗粒中欧前胡素、异欧前胡素的含量[A];山东省药学会第一届学术年会论文集(下)[C];2005年
7 刘玉红;王凤山;;真菌多糖结构研究进展[A];山东省药学会2006年生化与生物技术药物学术研讨会论文集[C];2006年
8 刘玉红;王凤山;;核磁共振波谱在多糖结构分析中的应用[A];山东省药学会2006年生化与生物技术药物学术研讨会论文集[C];2006年
9 陈娜;初正云;;正交试验优选延胡索乙素提取工艺研究[A];第一届全国中药商品学术大会论文集[C];2008年
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7 吕银娟;甘草三参汤抗心律失常及抗疲劳、耐缺氧作用的实验研究[D];湖北中医学院;2003年
8 方三华;参麦有效部位抗肿瘤作用的实验研究[D];浙江中医学院;2003年
9 纪舒昱;人参皂苷YR-1抗肿瘤活性研究[D];昆明医学院;2004年
10 徐洪伟;高山红景天毛状根培养系统的建立[D];东北师范大学;2004年
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1 许兰珍;何永睿;姜国金;刘小丰;陈善春;;cDNA文库构建及其在植物抗性研究中的应用[J];安徽农业科学;2007年03期
2 高健,许晓风,乌慧玲,陈学平,周家昊;特异种质烟草全长cDNA文库的构建及质量分析[J];安徽农业大学学报;2004年01期
3 杨芳,贺智敏,詹显全,陈主初,严斌,黄宏科,李廷宝;大鲵肝脏组织定向cDNA文库的构建及鉴定[J];动物学报;2004年03期
4 葛尔宁,严建伟,梁炳圻;人参的氨基酸含量[J];浙江中医学院学报;1997年03期
5 杨世杰,周鸣,谢湘林,曹延年,王丹;人参茎叶二醇组和三醇组皂甙对血压等作用影响[J];吉林大学学报(医学版);1991年01期
6 赫国志,张捷,薛晓梅,王晶;人参皂甙对慢性肺心病病人免疫功能增强与调节作用的研究[J];吉林大学学报(医学版);1993年01期
7 王晓明,江岩,王中峰,钟国赣,张文杰,马兴元,安占元;人参三醇组皂甙对大鼠心室肌细胞L型、T型、B型钙通道的阻滞作用[J];吉林大学学报(医学版);1993年02期
8 王银萍,吴家祥,王心蕊,张凤兰;大豆皂甙和人参茎叶皂甙的抗糖尿病动脉粥样硬化作用[J];白求恩医科大学学报;1994年06期
9 张宏桂,阎吉昌,张宏,吴广宣, 薛丽娟,王文胜, 彭婉茹;吉林生晒参脂肪酸及挥发性成分研究[J];白求恩医科大学学报;1995年05期
10 刘莉菲;张翼伸;;人参叶水溶性多糖的研究——酸性杂多糖P_A的纯化与结构的研究[J];东北师大学报(自然科学版);1988年03期
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1 朴希璥;中韩人参研究的系统比较[D];北京中医药大学;2002年
2 崔永兰;石蒜属植物cDNA文库构建与表达序列标签(EST)分析[D];南京林业大学;2004年
3 赵光耀;小麦全长cDNA文库构建、测序与分析[D];中国农业科学院;2006年
4 陈雅平;簇毛麦cDNA文库构建及小麦抗病相关基因克隆与功能分析[D];南京农业大学;2005年
5 张永红;小麦条锈菌cDNA文库构建和表达序列标签(ESTs)分析[D];西北农林科技大学;2006年
6 周祥明;美洲黑杨雄性花芽cDNA文库构建及花发育相关基因的克隆与鉴定[D];北京林业大学;2007年
7 晁代印;水稻高盐胁迫下的转录谱及耐盐相关基因分析[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2007年
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1 李昌禹;人参发根诱导及高产发根无性系的筛选研究[D];中国农业科学院;2003年
2 张巧利;中华蜜蜂(Apis cerana)毒腺cDNA文库构建和表达序列标签(EST)分析[D];山东农业大学;2006年
3 何秋伶;长筒石蒜花瓣cDNA文库构建与表达序列标签(ESTs)分析[D];南京林业大学;2006年
4 李华乔;人参发根培养装置的研制[D];吉林大学;2007年
5 周猛;林木EST数据分析系统的构建与应用[D];南京林业大学;2007年
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【二级参考文献】
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1 周桂华,孟艳,李扬,赵雪俭,陈燕萍,马兴元;人参单体皂甙Rh_2对体外培养的前列腺癌细胞株PC-3M抑制效应的研究[J];白求恩医科大学学报;2001年06期
2 刘飞,贺浪冲;人参质量控制的定性与定量方法研究[J];药物分析杂志;2002年03期
3 李文安;;第八讲 植物原生质体培养[J];植物生理学通讯;1979年03期
4 郑振,沈自尹,俞红,姚明,黄辉;灵芝复康宝对荷瘤鼠IL-2及TNF-α的诱生作用[J];癌症;1999年04期
5 林桦,王忠山,计国义,赵丹,赵雪俭;人参二醇组皂甙对失血性休克犬血管紧张素Ⅱ与去甲肾上腺素的影响[J];吉林大学学报(医学版);1990年03期
6 钟国赣,岳刚,邵春杰,马兴元,徐景达,江岩,王雪清;人参二醇组皂甙对培养心肌细胞动作电位的双向性效应[J];吉林大学学报(医学版);1990年05期
7 王晓明,江岩,王中峰,钟国赣,张文杰,马兴元,安占元;人参三醇组皂甙对大鼠心室肌细胞L型、T型、B型钙通道的阻滞作用[J];吉林大学学报(医学版);1993年02期
8 陈霞,杨世杰,李红,曹延年;下丘脑外侧区注射人参单体皂甙Rb_1对大鼠血压的影响及其机理探讨[J];吉林大学学报(医学版);1993年02期
9 陈龙,钟国赣,张文杰,齐晖,孙成文,江岩;Rb_1对培养心肌细胞抗氧化损伤作用[J];吉林大学学报(医学版);1993年04期
10 郭颂,陈满秋,赵节绪,林世和,睢大员,宋玉红;人参茎叶皂甙对阿霉素中毒小鼠过氧化脂质和超氧化物歧化酶的影响[J];白求恩医科大学学报;1996年03期
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7 刘建刚;刘光远;田占成;谢俊仁;龚真莉;张丽艳;;长角血蜱雄蜱抑制消减杂交cDNA文库的构建与分析[J];中国兽医科学;2009年08期
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1 通讯员 于柏林 郑原驰 记者 张兆军;我国人参业有了标准[N];科技日报;2007年
2 记者 赵伟 通讯员 郑原驰;我市科学家成功构建人参基因组文库[N];长春日报;2007年
3 谢晓林王忠先;人参制剂达到世界领先水平[N];吉林日报;2007年
4 赵伟 郑原驰;科学家成功构建人参基因组文库[N];中国中医药报;2007年
5 纪洁;集安益盛药业加快新产品研发[N];中国现代企业报;2007年
6 刘燕玲;评价中药不宜“惟成分论”[N];健康报;2008年
7 徐希俊;预防中暑便方[N];民族医药报;2004年
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1 王颖;人参叶和根cDNA文库构建及表达序列标签分析[D];东北师范大学;2007年
2 唐勇;猪伪狂犬病鉴别诊断研究与猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组序列的测定[D];华中农业大学;2004年
3 柳淑芳;小尾寒羊多胎性状相关基因的鉴定和遗传研究[D];山东农业大学;2004年
4 陈晓红;慢性肝病患者组织cDNA文库的构建及用SEREX方法筛选HCC抗原[D];浙江大学;2005年
5 王海鸿;B型烟粉虱热休克蛋白基因的克隆和表达及其与胁迫耐受性关系的研究[D];中国农业科学院;2005年
6 白文涛;汉坦病毒受体的筛选及鉴定[D];第四军医大学;2005年
7 陈娟;可卡因安非他明调节转录肽相互作用蛋白的筛选[D];第二军医大学;2005年
8 余建秋;大熊猫基因资源库构建及粪便高质量DNA提取方法的建立[D];浙江大学;2006年
9 于丽;金黄地鼠神经管cDNA文库的构建及高温致畸相关基因的筛选[D];山东大学;2005年
10 曾智勇;猪呼肠孤病毒SC-A株的分离鉴定及全基因组cDNA文库的构建和分子遗传特征分析[D];四川农业大学;2006年
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1 赵耀儒;墨胸胡蜂毒腺基因cDNA文库的构建[D];武汉大学;2004年
2 温钢;小鼠嗅球cDNA文库的构建[D];东北师范大学;2006年
3 王志成;棉花与膜结合的内切-1,4-β-葡聚糖酶基因的克隆及序列特征分析[D];湖南农业大学;2004年
4 范维江;大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)下丘脑cDNA 文库的构建[D];四川农业大学;2004年
5 屠小卿;自身免疫性肝病靶抗原的筛选、表达、临床应用[D];第二军医大学;2003年
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8 李晓进;云南个旧肺腺癌细胞株GLC-82 cDNA文库的构建和鉴定[D];昆明医学院;2005年
9 乌慧玲;稻褐飞虱不同生物型的荧光差异显示[D];南京师范大学;2004年
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