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《东北师范大学》 2008年
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黑曲霉木聚糖酶固体发酵及酶学特性研究

张云  
【摘要】: 本文利用三点法和插片法对黑曲霉SB-02(Aspergillus Niger SB-02)菌株进行了菌落形态及菌株的观察:利用双层平板法和三点法研究了黑曲霉SB-02菌株对培养基中木聚糖的降解情况:通过摇床培养,初步测定了黑曲霉SB-02菌株所产木聚糖酶的活性大小。 同时对黑曲霉固体发酵木聚糖酶的条件进行了优化,优化因子有:碳源,氮源,培养温度,培养时间,初始pH值,初始水分,接种量,浸提剂等。结果表明:以麸皮和玉米芯质量比7:3混合后作为碳源,以0.15%的硫酸铵为无机氮源,物料与水分的比为1:1;培养温度28-30℃;培养基起始pH值为4.8;接种量为4%(107个/ml),加入0.05%的吐温-20,发酵时间为72h,加入10倍培养基干重的自来水,于40℃摇床浸提1h,得到的木聚糖酶活为650.45IU/ml。 将固体发酵得到的粗酶经过滤、离心、超滤、冻干,制得粗酶粉,研究了粗酶粉的组分和反应特性,结果表明:在所得到的粗酶粉中,含有多种降解酶组分,分别是木聚糖酶、纤维素酶,滤纸酶、淀粉酶;分别占总酶活的66.3%、17.1%、3.8%、12.7%;粗酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为4.8,Fe3+对酶活具有较强的激活作用, Mg2+具有一定的抑制作用,其他金属离子无显著作用。 经过DEAE A-25葡聚糖凝胶层析发现,黑曲霉木聚糖酶中含有X-Ⅰ,X-Ⅱ,X-Ⅲ三种木聚糖酶同工酶组分,X-Ⅰ为不吸附组分;X-Ⅰ,X-Ⅱ含量较少,X-Ⅲ含量较高。经PAGE,三种组分均呈单一条带。经纯化,木聚糖酶的比活力提高了2倍左右,酶活回收率为26.3%。
【学位授予单位】:东北师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:TQ925

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