收藏本站
《东北师范大学》 2009年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

人bFGF的克隆及其对HeLa细胞生长和血管生成素表达的影响

杨剑丽  
【摘要】: 宫颈癌是世界女性第二大恶性肿瘤。已经有实验证实血管新生与宫颈癌患者预后不良有关。有多个血管生成因子参与肿瘤血管发生过程,其中主要的有VEGF、bFGF和血管生成素。 bFGF是可以与肝素结合的多功能多肽家族的成员之一。它具有促血管生成的作用,它也在多种肿瘤的增殖和分化中发挥重要作用。研究发现多种恶性肿瘤都高表达bFGF。有学者研究显示宫颈癌患者的血清中bFGF含量增高。血管生成素是唯一一个以促血管发生的功能而命名的血管生成因子。血管生成素在内皮细胞可以发生核转移,进而促进内皮细胞的增殖。血管生成素在HeLa细胞中也有核转移现象,并且能够在细胞核内促进rRNA的合成。 目前对于bFGF和血管生成素的研究主要集中在其如何诱发肿瘤的血管发生,进而促进肿瘤的进一步生长和恶化,以及它们在肿瘤预后评价中的相关作用。而对于二者的关系的研究比较少。有学者发现,应用血管生成素的反义核苷酸可以抑制体外培养的HeLa细胞和体内的肿瘤细胞的生长,但是细胞和肿瘤内的bFGF表达增加。本实验室前期的研究发现,在转染血管生成素反义核苷酸的黑色素瘤细胞中,bFGF的表达增加,而在转染血管生成素正义核苷酸的黑色素瘤细胞中,bFGF的表达降低。为了进一步的研究bFGF与血管生成素的关系,我们克隆了人bFGF基因,并且构建了含有人bFGF基因的正义和反义的真核表达载体,建立了稳定表达bFGF的细胞株。进而探讨在HeLa细胞中,利用bFGF基因的转染改变细胞内源的bFGF基因的表达水平对血管生成素表达的影响。实验结果显示,在转染反义bFGF基因的bFGF低表达细胞株中,细胞表达的bFGF的mRNA和蛋白都降低,细胞的增殖受到了抑制,但是血管生成素的蛋白表达水平却提高了。相反,在转染正义bFGF基因的bFGF高表达的细胞株中,细胞表达的bFGF的mRNA和蛋白均增加,同时细胞的增殖增加,然而血管生成素的的蛋白表达水平下降了。但是,高表达和低表达bFGF的细胞的血管生成素的mRNA水平无显著性差异。对HeLa细胞及高表达bFGF和低表达bFGF的细胞,施加外源的血管生成素后,HeLa细胞和转染反义bFGF基因的低表达bFGF的细胞株,细胞增殖加速,而转染正义bFGF基因的高表达bFGF的细胞株的细胞增殖无改变。实验结果表明,bFGF和血管生成素均可以直接刺激HeLa细胞的增殖。证明外源bFGF基因的转染导致细胞内源bFGF水平发生改变,这一改变负性地影响细胞内源血管生成素蛋白的表达。
【学位授予单位】:东北师范大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R737.33

【引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 于得海;癌症患者血清p53抗体检测和肿瘤微环境压力对血管生成因子表达调控[D];东北师范大学;2012年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘孟元,史轶蘩;细胞因子在神经内分泌免疫调节网络中的作用[J];国外医学(免疫学分册);1993年05期
2 李燕雄;陈忠东;;宫颈癌SiHa细胞脂质体与电穿孔转染效果比较[J];南华大学学报(医学版);2006年04期
3 方剑武,黄思罗,Michel Crepin,刘会生,徐涛,刘剑峰;FGF-2/FGFR信号转导途径与肿瘤的关系及在乳腺癌发生中的作用[J];科学通报;2003年13期
4 庄岳鹏,王崇国;肝病患者血清TGF-α和TGF-β_1的检测及临床意义[J];临床肝胆病杂志;2001年01期
5 杨金升;肿瘤坏死因子在脑卒中时的表达及作用[J];国外医学(脑血管疾病分册);1996年02期
6 杨辉,张英起,韩苇,颜真,药立波,苏成芝;人血管生成素-PE40融合蛋白基因的构建、表达及活性研究[J];中国生物化学与分子生物学报;2000年06期
7 周泉;血管内皮因子的生物学特性及临床研究进展[J];实用心脑肺血管病杂志;2001年01期
8 张静,王文亮,李青,乔庆;α-转化生长因子及其受体在人原发性肝细胞肝癌中的表达意义[J];世界华人消化杂志;1999年11期
9 陈治;杜钰;;血管内皮细胞特异性受体在肿瘤血管靶向治疗中的应用[J];世界华人消化杂志;2001年06期
10 方友文,许国铭,朱人敏,张洪富,李兆申;胰腺癌组织表皮生长因子mRNA表达的意义[J];华人消化杂志;1998年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王卉;封江彬;陆雪;张德钦;张庆召;高玲;陈德清;刘青杰;;~(60)Coγ射线诱导人淋巴细胞线粒体COXⅡ基因表达改变的研究[J];癌变·畸变·突变;2011年06期
2 王东林;王艳芬;施公胜;黄华;;胶质瘤中hTERT、maspin和bFGF表达的相关性及意义[J];癌症;2007年06期
3 朱正志;王圣应;吴礼高;承泽农;;肝细胞生长因子在甲状腺乳头状癌的表达及其与淋巴管生成的关系[J];蚌埠医学院学报;2009年05期
4 刘斌,梁永平,张强;脑梗塞患者血浆TNF水平的变化及其意义[J];标记免疫分析与临床;1998年03期
5 赖真,王沙燕,耿小茵;益气活血药对缺血性脑损伤后的神经细胞保护作用[J];中国医药学报;2002年02期
6 赵杨;申兴斌;;HGF-c-met在消化系统恶性肿瘤中的研究进展[J];承德医学院学报;2011年02期
7 刘猛;刘玉光;吴承远;;胶质瘤的血管生成和抗血管化治疗[J];中国神经肿瘤杂志;2005年01期
8 姜春华;邱田;于德海;杨琼;王丽;;人血管生成素基因的克隆及表达[J];东北师大学报(自然科学版);2008年02期
9 辛林,彭洪云;大肠癌PDGF和VEGF基因mRNA的表达研究[J];大肠肛门病外科杂志;2002年01期
10 唐华,张才全,向征;胃癌TGF-β1蛋白表达及与癌细胞增殖活性的关系研究[J];中国医师杂志;2004年05期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 郑亚宁;祁玥;魏登邦;;血管内皮生长因子的研究进展[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十六次学术研讨会论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 翁春华;血管生成素特异microRNAs的鉴定与功能分析[D];浙江大学;2010年
2 刘旭东;RNAi-Rac1对胆管癌治疗的实验研究[D];吉林大学;2011年
3 暨明;在异种移植中TF对IBMIR的启动作用及人Treg对移植物保护作用的研究[D];中南大学;2011年
4 刘薇;外源性IL-6对胆管癌细胞QBC939的生物学作用及其分子机制的研究[D];中南大学;2011年
5 周玉娟;合浦珠母贝TGFβ信号通路相关基因的克隆及功能研究[D];清华大学;2010年
6 苑媛;低频脉冲磁场对大鼠缺血心肌血管形成的影响及机制探讨[D];第四军医大学;2011年
7 张楠;PDGF-BB和HGF及其受体的表达在非小细胞肺癌淋巴管生成及淋巴道转移关系中研究[D];山东大学;2011年
8 赵佳;血管生成素负调节碱性成纤维生长因子的机制及对肿瘤细胞的影响[D];东北师范大学;2011年
9 黄劲柏;急救穴刺血对脑梗塞急性期的作用及对缺血大鼠相关基因表达的影响[D];广州中医药大学;2001年
10 于晓刚;头穴针刺对急性脑出血大鼠痛反应神经元电活动影响的实验研究[D];黑龙江中医药大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郭君红;卵巢上皮性癌组织中HGF、IGF-Ⅰ及MMP-2的表达[D];郑州大学;2010年
2 明怀坤;血清肝细胞生长因子与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征合并高血压的相关性[D];郑州大学;2010年
3 马健;刺参再生相关基因的序列分析与表达[D];辽宁师范大学;2010年
4 李晶蕊;子痫前期患者血清sFlt-1水平、子宫螺旋动脉血流变化研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
5 王代宪;负载BMP与VEGF的PDLLA组织工程材料修复兔桡骨缺损的实验研究[D];泰山医学院;2007年
6 陈强;血管内皮生长因子壳聚糖微囊的研究[D];浙江大学;2011年
7 袁媛;VEGF survivin在无排卵性功血患者子宫内膜中的表达及其意义[D];广西医科大学;2011年
8 王宇博;术中磁共振脑灌注成像在非增强胶质瘤手术的初步应用[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
9 林彩霞;ACTA、TNF-α及IL-6在慢性胎儿窘迫中的表达[D];福建医科大学;2010年
10 陈秀慧;血管生成素及VEGF在子宫颈癌的表达及与新生血管及淋巴密度的相关性研究[D];福建医科大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴楚;诸慧;;噬菌体展示技术[J];安徽农业科学;2009年03期
2 郭勇;;中医肿瘤治疗方法学探讨[J];浙江中医药大学学报;2009年05期
3 高文峰;郑加生;孙斌;;甲胎蛋白在原发性肝癌诊断中的临床价值[J];当代医学;2010年32期
4 丁波泥,陈道瑾,吴君辉,石光清,海健;乳腺癌中CA125、CA15-3的表达及其意义[J];中国医师杂志;2005年01期
5 郑航,罗荣城;TPS、CA-153和CEA联合检测对乳腺癌的诊断价值[J];第一军医大学学报;2005年10期
6 贾球锋;李丽芳;张映;;噬菌体展示技术[J];动物医学进展;2006年02期
7 刘相叶;邓洪宽;吴秀萍;王学林;于申业;于艳玲;刘明远;;噬菌体展示技术及其应用[J];动物医学进展;2008年01期
8 李卫鹏;前列腺特异抗原研究进展(文献综述)[J];放射免疫学杂志;2003年01期
9 耿雪霏;邢汝东;;CA125作为肿瘤标志物的研究进展[J];国际口腔医学杂志;2011年01期
10 曾显声;周燕斌;;肺癌血清肿瘤标志物的研究现状[J];国际内科学杂志;2007年02期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 宋金娜;血管生成素对黑色素瘤细胞生长及对碱性成纤维生长因子表达的影响[D];东北师范大学;2006年
2 王继;血管生成素与碱性成纤维生长因子之间相互作用关系及其分子机制的研究[D];东北师范大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 华攀玉;利用噬菌体展示的p53蛋白表位进行肿瘤检测方面的研究[D];东北师范大学;2005年
2 赵佳;碱性成纤维生长因子对血管生成素、血管内皮生长因子表达的影响[D];东北师范大学;2008年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 毛华,袁爱力,赵敏芳,彭齐荣,张亚历;血管内皮细胞生长因子诱导肝癌细胞转移的扫描电镜观察[J];第一军医大学学报;2000年03期
2 孙自勤,王要军;转化生长因子α及β与肝细胞再生[J];临床肝胆病杂志;1995年01期
3 蔡建春,江绍基,陈治平;细胞粘附分子与肿瘤的浸润和转移[J];上海第二医科大学学报;1993年02期
4 张曼,周爱儒;血管内皮生长因子的功能与应用[J];生理科学进展;1996年03期
5 毛华,陈宏;影响血管内皮生长因子表达的调控因素[J];国外医学(生理、病理科学与临床分册);1999年04期
6 司履生,王一理;粘连分子及其在病理学中的作用[J];中华病理学杂志;1994年04期
7 付小兵;生长因子促(抑)创伤修复的临床应用与展望[J];中华创伤杂志;1998年06期
8 顾小曼,付小兵;癌基因与修复[J];中华创伤杂志;1999年04期
9 倪斌,侯春林,贾连顺,戈俊国,丰建民;几丁质膜引导兔桡骨缺损骨再生的实验研究[J];中华骨科杂志;1995年09期
10 辛绍杰,王林杰,王松山,毛远丽,张世兰,陈黎明;转化生长因子β_1与病毒性肝炎肝纤维化的关系[J];中华肝脏病杂志;1997年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 湛凤凰;疾病基因与表型克隆及其在肿瘤中的应用[J];国外医学.生理.病理科学与临床分册;1999年02期
2 李小毛;李田;杨越波;黄曙方;殷恒讳;谭蜀艳;;子宫肌瘤致病相关基因的筛选与克隆[J];中山大学学报(医学科学版);2005年06期
3 杨立宏,苏成芝;用PCR突变技术克隆HIV env125肽基因[J];第四军医大学学报;1991年02期
4 吕新跃,暴晓梅;载脂蛋白基因克隆技术的研究进展[J];中国动脉硬化杂志;1999年03期
5 胡川闽,刘彦仿,高磊,陈苏民,陈南春,胡川闽;HAb25肝癌单克隆抗体可变区基因的克隆和序列测定[J];中华肝脏病杂志;1999年02期
6 方琳;;人α1胸腺素基因克隆及表达载体的构建[J];中国社区医师(综合版);2007年11期
7 葛乐,韩骅,苏成芝,药立波,王字玲,陈萍,陈梅红;抗鼠IgD特异性单克隆抗体414/DF可变区基因的克隆和cDNA序列测定[J];第四军医大学学报;1999年02期
8 孙茂民,徐江英,夏春林,许琳;人脑硫氧还蛋白还原酶基因的克隆及测序[J];解剖学杂志;2003年02期
9 李欣;阙海萍;马振莲;柴玉波;刘涛;刘少君;;应用锚定消减杂交技术克隆分析大鼠脊髓原代神经元损伤、修复相关基因[J];解放军医学杂志;2005年12期
10 李鑫,金岩,岳文,刘源,王新文;小鼠腭裂相关基因的克隆及基因表达的意义[J];中国临床康复;2003年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 石向群;杨金升;;水通道蛋白4 M23型基因克隆及载体构建[A];第三届全国少数民族地区神经病学会论文汇编[C];2005年
2 李良俊;陆叶;陈学好;;莲藕GBSS基因的克隆与表达的初步研究[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年
3 曹汐汐;徐璟达;刘秀萍;许祖德;;PIK3CA野生型及突变型H1047R酵母双杂交诱饵表达载体的构建[A];中华医学会病理学分会2007年学术年会暨第九届全国病理大会论文汇编[C];2007年
4 周军;彭日荷;熊爱生;蔡斌;陶建敏;章镇;姚泉洪;;巨峰葡萄VvHSP101基因的克隆与表达分析[A];中国园艺学会2010年学术年会论文摘要集[C];2010年
5 赵沁慧;王光义;;电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织Nestin及bFGF表达的影响[A];2011中国针灸学会年会论文集(摘要)[C];2011年
6 杨卓欣;卓缘圆;;电针对脾虚型幼鼠脑内碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其mRNA表达的影响[A];2011中国针灸学会年会论文集(摘要)[C];2011年
7 于虎;张国新;李艳;车永哲;母义明;;重组Tβ4调节bFGF和TNF-α表达促进糖尿病大鼠皮肤损伤愈合[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
8 呼正祥;于浩;张金玉;赵志辉;;猪的Ⅰ类IGF-1基因的克隆及序列分析[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
9 陈彪;陈廖斌;秦俊;汪晖;Jaques Magdalou;;bFGF及相关细胞因子转染对人骨关节炎软骨细胞的作用[A];全国第十二届生化与分子药理学学术会议论文集[C];2011年
10 乔军;孟庆玲;陈创夫;才学鹏;;中国荷斯坦奶牛CD54基因的克隆及其分子进化分析[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 蔡恩泽;呼之欲出的基因经济[N];山西经济日报;2000年
2 本报记者 石小宏;你还有隐私吗?[N];四川日报;2000年
3 本报记者 董毅然;基因一变能成记忆超人?[N];北京科技报;2004年
4 王宪忠;性格与基因[N];中国知识产权报;2001年
5 郝渊侃;达安基因管理层辩解关联交易[N];第一财经日报;2005年
6 ;认识我们的基因[N];科技日报;2003年
7 东方希望集团董事长 刘永行;改写“保守的基因”[N];中华工商时报;2008年
8 本报记者 邵斌;饮水健康与基因重整[N];大众科技报;2001年
9 鲁岩 车爱琳 中央电视台《走进科学》供稿;基因能否决定我们的命运[N];科技日报;2003年
10 佚名;基因决定你与谁一见钟情[N];北京科技报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨剑丽;人bFGF的克隆及其对HeLa细胞生长和血管生成素表达的影响[D];东北师范大学;2009年
2 张焱如;马生长激素(GH)基因序列、分子进化及其多态性的研究[D];内蒙古农业大学;2005年
3 李敏;牛免疫球蛋白重链基因中JH,Eμ片段敲除的研究和JH,Cμ基因的分析[D];中国农业大学;2005年
4 张运雄;欧文氏杆菌CXJZ95-198非纤维素降解特性及manA基因的克隆研究[D];中国农业科学院;2006年
5 黄晋玲;晋A棉花线粒体基因组BAC文库的构建及重要功能基因的筛选[D];中国农业科学院;2006年
6 黄俊琼;IL-31在皮肤炎症中的作用及作用机制研究[D];苏州大学;2007年
7 任鄄胜;水稻抗病基因同源序列分析及抗稻瘟病候选基因克隆[D];四川农业大学;2008年
8 黄志立;纳豆激酶基因的克隆及其在大肠杆菌与毕赤酵母中的表达[D];华南理工大学;2001年
9 王严;曲霉植酸酶基因的克隆及其表达研究[D];大连理工大学;2007年
10 喻麟;猪生长激素基因cDNA克隆与表达效应研究[D];四川大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈黎;普通小麦低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)基因克隆及序列分析[D];四川农业大学;2009年
2 刘雨;丝素材料装载碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)后的促细胞生长作用[D];苏州大学;2010年
3 杨帆;bFGF和μPA蛋白在鼻咽癌组织中的表达及临床意义[D];广西医科大学;2011年
4 许尔长;重组水蛭素诱导bFGF表达,促进静脉淤血皮瓣存活的实验研究[D];泸州医学院;2011年
5 汤琪乐;Syndecan-1,bFGF在大肠癌中的表达及临床意义[D];浙江大学;2003年
6 闻公灵;bFGF对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究[D];郑州大学;2004年
7 张静;bFGF、SCF诱导人脐血CD34~+、CD133~+细胞基因表达变化的研究[D];郑州大学;2010年
8 庞文筠;bFGF影响体外培养的不同分化阶段成骨细胞活性及凋亡的实验研究[D];昆明医学院;2003年
9 张勇;人ALEX2基因的克隆、表达与纯化及生物信息学分析[D];第四军医大学;2005年
10 王新武;人bFGF重组慢病毒载体转染BMSCs的实验研究[D];福建医科大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026