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《东北师范大学》 2010年
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水稻中DNA甲基转移酶的原核表达及功能初步鉴定

赵艳丽  
【摘要】: DNA胞嘧啶甲基化是一种重要的表观遗传修饰方式,广泛存在于多种生物中,在高等植物中,核基因组的胞嘧啶残基是被广泛甲基化的。大量实验证据表明,胞嘧啶甲基化在调控基因表达、维持基因组的稳定性等方面发挥重要的生物学作用。在植物中,胞嘧啶甲基化模式在代与代之间可以稳定的遗传。 许多研究发现,如果DNA甲基化模式发生变异,可能会导致生物功能和表型的异常,这也为生物的进化提供了机遇。另一方面,在动物和植物中,具体的甲基化模式的遗传,以及由生物因素和非生物因素引起的甲基化模式变异都对我们深入研究DNA甲基化的生物学功能具有重要意义。 对从头甲基化作用机制的了解将会让我们更深入的认识基因组甲基化的生物学功能,因此,非常有必要去认识和分析所有表达的DNA甲基转移酶。 本文中,我们将预测编码水稻中甲基转移酶基因的片段,克隆到pET-28a质粒中,用IPTG诱导其在大肠杆菌菌株BL21(DE3)中大量表达,纯化目标蛋白,并在体外不同的条件下对其功能进行鉴定。初步结果表明DMT710-3的表达产物在NEBuffer 1中具有从头DNA甲基转移酶活性。
【学位授予单位】:东北师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:Q78

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