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《黑龙江大学》 2013年
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利用光谱技术研究溶菌酶与壳聚糖的相互作用

杨卫卫  
【摘要】:壳聚糖分子具有特殊的结构与功能,在蛋白质的分离、纯化等方面具有重要的应用。溶菌酶来源广泛,是一种无毒、无害、具有一定的保健功能的蛋白酶。本论文将壳聚糖用于溶菌酶的固定化载体,利用光谱技术研究了溶菌酶与壳聚糖的相互作用,为壳聚糖分子作为酶蛋白分离载体的进一步应用提供了实验基础。 本文用荧光猝灭理论研究了溶菌酶与壳聚糖在溶液体系中的相互作用,通过研究发现溶菌酶内源荧光猝灭机制为动态猝灭和静态猝灭同时发生的复合猝灭,并计算了体系的结合常数和热力学函数(焓变、熵变、吉布斯自由能),由此推演出壳聚糖和溶菌酶之间存在很强的结合作用,壳聚糖与溶菌酶结合反应过程中的作用力主要是疏水作用力和静电引力。计算了两者之间的结合距离为1.47nm。同时,进一步研究了溶菌酶与壳聚糖微球作用前后的结构变化,通过化学交联法制备了壳聚糖微球,然后在pH5.6磷酸盐(PBS)缓冲体系中吸附溶菌酶分子,再用pH7.4磷酸盐(PBS)缓冲液将溶菌酶解析下来,用荧光光谱法、紫外-可见光谱法、红外光谱法考察了解析后溶菌酶分子结构的变化,结果表明,溶菌酶分子其色氨酸基团及其周围环境发生了明显的改变。
【学位授予单位】:黑龙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:O657.3

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【参考文献】
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