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《黑龙江大学》 2009年
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产紫杉醇的HD86-9菌种鉴定及其相关酶基因的克隆

郝胜楠  
【摘要】:目前,紫杉醇的主要来源是从红豆杉树中直接提取。但由于难以摆脱对稀缺、生长缓慢及紫杉醇含量极低的红豆杉原料的依赖,导致紫杉醇的市场供应受到了极大限制。为此,国内外学者开发了多种途径,发现通过微生物发酵法生产紫杉醇,是解决其药源短缺的有效途径之一。 本研究从东北红豆杉(Taxus cuspidate)中分离到了213株内生真菌,经薄层层析、高效液相色谱和质谱分析,证明菌株HD86-9为产紫杉醇内生真菌。又通过形态学观察和18S rDNA及含5.8S的ITS序列分析,对该菌株进行了分类地位鉴定。根据形态学及分子生物学分析结果,确定菌株HD86-9为黑曲霉新变种(Aspergillus niger var.taxi nov.),命名为(Aspergillus niger var. taxi Zhou, Zhao et Ping, var. nov.)。同时,以菌株HD86-9 cDNA为模板,通过RT-PCR技术扩增牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(GGPPS)基因。试验结果表明,克隆到了GGPPS基因片段,大小为371bp,其与GenBank中所收录的GGPPS基因的同源性达到99%,本试验研究为构建高产紫杉醇基因工程菌株奠定了坚实的基础。
【学位授予单位】:黑龙江大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:Q78

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【参考文献】
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