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《哈尔滨工业大学》 2009年
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南极细菌产低温纤维素酶的研究

钱文佳  
【摘要】: 目前,国内外对降解纤维素的真菌研究较多,主要是由于真菌可以产生全组分的纤维素酶,可完全分解纤维素为菌体自身所利用。但由于细菌可以分解纤维素产乙醇、乙酸等对纤维素再利用,因而对细菌的研究日渐增多。多数细菌产生的内切葡聚糖酶对结晶纤维素没有活性,而且这些酶主要是胞内酶或吸附于细胞壁上,很少能分泌到细胞外,增加了提纯的难度,在工业上很少采用。本试验所用细菌产生的纤维素酶多数分泌到胞外,降低了提纯难度,利于工业生产利用,大大增加了研究价值。 本试验选用于2001-2002年第十八次中国南极科学考察采集的海冰和海水中分离获得南极海洋菌作为实验材料,采用刚果红鉴别培养基和DNS法测定进行初筛和复筛,最终筛选出高产纤维素酶的菌株545,通过16S rDNA鉴定,菌株545属于交替假单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)。 通过对菌株545产酶条件的研究,发现该菌在生长温度为5℃,初始生长pH为8.0,以麦芽糖为碳源,蛋白胨为氮源,培养96 h时产酶最高。 经过硫酸铵沉淀—透析浓缩—离子交换层析—凝胶过滤层析,对菌株545产生的纤维素酶进行纯化得到了电泳纯的纤维素酶,电泳后测得纤维素酶分子量约为49 kDa。 对纯化后的纤维素酶进行酶学性质及稳定性的研究,结果表明纤维素酶在30℃,pH 6.0时酶活最高,在0℃,pH 5.5时稳定性较好。酶活受pH影响较小,受温度影响较大。Ca2+,Mg2+对酶有激活作用,Ba2+和Na+对酶的激活作用不明显,Cu2+则对酶活有抑制作用。
【学位授予单位】:哈尔滨工业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:TQ925

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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 刘羽;南极低温纤维素酶在同步糖化发酵中的应用的研究[D];中国海洋大学;2011年
【参考文献】
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【共引文献】
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【同被引文献】
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【二级参考文献】
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