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《黑龙江八一农垦大学》 2013年
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ENO1过表达对籽鹅卵泡颗粒细胞生殖激素受体表达量及分泌功能的影响

张伟宏  
【摘要】:烯醇化酶(α-Enolase,ENO1)是一种在细胞质和细胞核中均表达的糖酵解酶,主要是能催化2-磷酸甘油脱水,生成含有高能磷酸键的磷酸烯醇式丙酮酸。在前期工作中,本项目组发现籽鹅快速生长的卵泡中ENO1相对表达量显著高于原始卵泡,通过生物信息学分析及文献查阅,推测ENO1可能对籽鹅卵泡发育具有重要调控作用。因此本试验通过研究ENO1过表达对原代培养的籽鹅卵泡颗粒细胞四种生殖激素受体,卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)、雌激素受体1(estrogen receptor,ESR1)、雌激素受体2(estrogen receptor,ESR2)及黄体生成素受体(luteinizing hormone receptor,LHR)m RNA表达量,及原代培养颗粒细胞培养液中孕酮、雌二醇与卵泡抑素水平的影响,探讨ENO1过表达对禽类卵泡颗粒细胞受体表达与分泌功能的影响,为提高禽类产蛋性能提供科学的理论依据。本试验选取8月龄健康产蛋雌性籽鹅,分离F1级卵泡颗粒细胞层细胞进行原代培养,按实验要求将细胞3组,分别为培养液组、腺病毒空载体组和ENO1过表达组。利用荧光定量PCR方法检测3组细胞FSHR、ESR1、ESR2及LHR m RNA的表达水平,双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)检测颗粒细胞分泌孕酮、雌二醇以及卵泡抑素情况。结果如下:1.ENO1过表达对FSHR、ESR1、ESR2以及LHR m RNA表达的影响与培养液组和腺病毒空载体组相比,ENO1过表达组LHR和ESR1 m RNA表达水平极显著升高(P0.01),FSHR m RNA表达水平极显著降低(P0.01),ESR2 m RNA表达水平差异不显著(P0.05)。2.ENO1过表达对颗粒细胞分泌孕酮、雌二醇和卵泡抑素的影响与培养液组和腺病毒空载体组相比,ENO1过表达组孕酮分泌量极显著升高(P0.01),雌二醇分泌量差异不显著(P0.05),卵泡抑素分泌量极显著降低(P0.01)。结果表明:ENO1过表达使原代培养的籽鹅颗粒细胞中LHR和ESR1 m RNA的表达量极显著升高(P0.01),FSHR m RNA表达极显著降低(P0.01);同时使孕酮分泌量极显著增加(P0.01),卵泡抑素分泌量极显著降低(P0.01),提示ENO1过表达可能会通过影响这些基因受体表达或者类固醇激素分泌,促进卵泡颗粒细胞增殖,从而促进卵泡发育和排卵。
【学位授予单位】:黑龙江八一农垦大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:S835

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