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《东北农业大学》 2011年
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去甲肾上腺素与铝免疫毒性的关系

胡崇伟  
【摘要】:在体实验以Wistar大鼠为实验动物,将60只体重为110g~120g的大鼠随机均分为4组,饮水染铝,三氯化铝(AlCl_3)水溶液的浓度分别为0(对照组,C组)、64.18mg/kg(低剂量组,L组)、128.36mg/kg(中剂量组,M组)、256.72mg/kg(高剂量组,H组),连续染铝120d,复制亚慢性铝中毒大鼠模型,通过对染铝大鼠脾脏淋巴细胞增殖、免疫细胞因子、T淋巴细胞亚群、血清及下丘脑中去甲肾上腺素(NE)水平,血清中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(Cort)含量,脾脏淋巴细胞内cAMP含量,脾脏淋巴细胞膜上β_2-AR密度及β_2-AR mRNA表达水平的观测,探讨染铝对大鼠免疫状态和NE水平的影响,找出NE水平与染铝大鼠免疫状态的关系; 体外实验以培养1月龄的大鼠脾脏淋巴细胞为研究对象,在培养液中分别添加0(对照组,W-C组)、1/20 IC_(50)(低剂量组,W-L组)、1/10 IC_(50)(中剂量组,W-M组)、1/5 IC_(50)(高剂量组,W-H组)的AlCl_3,通过对脾脏淋巴细胞增殖、免疫细胞因子、T淋巴细胞亚群的检测,确定1/10 IC_(50)铝浓度可致淋巴细胞免疫抑制。以添加此染铝浓度的淋巴细胞为研究对象,分别添加0(对照组,N-C组)、10~(-10)(低剂量组,N-L组)、10~(-9)(中剂量组,N-M组)、10-8(高剂量组,N-H组)mol/L的NE,通过对大鼠脾脏淋巴细胞增殖、免疫细胞因子、T淋巴细胞亚群,脾脏淋巴细胞内cAMP含量,脾脏淋巴细胞膜上β_2-AR密度及β_2-AR mRNA表达水平的检测,探讨NE对铝免疫毒性的调节作用。实验结果如下: 体内实验结果表明: 1.亚慢性铝中毒大鼠血清和脾脏中铝含量均显著或极显著高于C组;T、B淋巴细胞增殖率,CD3~+、CD4~+、CD8~+ T淋巴细胞表达率和CD4~+/CD8~+的比值以及脾脏组织中IL-2和TNF-α含量均显著或极显著低于C组,说明铝可致大鼠免疫功能抑制。 2.亚慢性铝中毒大鼠血清中NE含量、脾脏淋巴细胞膜上的β_2-AR密度及β_2-AR mRNA表达水平和淋巴细胞内cAMP含量均显著或极显著高于C组,说明铝能增加外周NE水平,并激活β_2-AR-cAMP途径,直接抑制大鼠免疫功能。 3.亚慢性铝中毒大鼠下丘脑中NE含量显著低于C组,血清中CRH、ACTH和Cort含量显著或极显著高于C组,说明铝能抑制突触前膜对NE的再摄入,提高细胞外NE水平,进而通过激活下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴,间接抑制免疫功能。 4.亚慢性铝中毒大鼠血清中NE水平与T、B淋巴细胞增值率,脾脏组织中IL-2和TNF-α含量,CD3~+、CD4~+T淋巴细胞表达率以及CD4~+/CD8~+的比值均呈显著负相关,说明NE与铝的免疫毒性密切相关,外周高水平NE可加重铝引发的免疫抑制。 体外实验结果表明: 1.应用MTT比色法测得染铝24h后大鼠脾脏淋巴细胞的半数抑制浓度(IC_(50))为5.52mmol/L,95%可信区间为4.76mmol/L~6.38mmol/L。 2.随染铝剂量的增加,大鼠T、B淋巴细胞增殖率,CD3~+、CD4~+、CD8~+ T淋巴细胞表达率和CD4~+/CD8~+的比值以及淋巴细胞分泌IL-2和TNF-α含量均逐渐降低,W-M组、W-H组显著或极显著低于W-C组,W-L组与W-C组比较差异不显著,说明铝能抑制淋巴细胞功能,且因为W-M组能引起显著的免疫抑制,故选择W-M组作为后续实验的研究对象。 3.随染铝剂量的增加,大鼠脾脏淋巴细胞膜上的β_2-AR密度及β_2-AR mRNA表达水平和淋巴细胞内cAMP含量高于W-C组,且W-M组、W-H组均极显著高于W-C组,同时伴随淋巴细胞免疫功能抑制,说明β_2-AR-cAMP途径是铝免疫毒性的机制之一。 4.随NE浓度的增加,淋巴细胞细胞内cAMP含量显著高于N-C组,大鼠T淋巴细胞增殖率,CD3~+、CD4~+、CD8~+ T淋巴细胞表达率和CD4~+/CD8~+的比值以及淋巴细胞分泌IL-2和TNF-α含量均显著或显著低于N-C组,B淋巴细胞增值率与N-C组比较无显著变化,说明NE可通过β_2-AR-cAMP途径加重铝对T淋巴细胞的抑制作用,但对B淋巴细胞没有显著影响。
【学位授予单位】:东北农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S852.3

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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
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【参考文献】
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【同被引文献】
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