收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

黑加仑提取物的抗氧化活性与应用及其对胃癌细胞增殖的抑制作用

贾娜  
【摘要】:目前,人工合成抗氧化剂被广泛应用于食品中抑制脂肪氧化,并取得了很好的效果,但是,出于对食品安全性的考虑,其应用已受到限制,因此,研究开发植物来源的天然抗氧化剂以取代合成抗氧化剂具有十分重要的意义。黑加仑富含多种生物活性成分,如维生素、多酚、酚酸等,是天然抗氧化剂的良好来源,不仅能够做为抗氧化剂应用在食品中,还具有有益人体健康的潜在功效,如抗癌、清除体内自由基等。本课题以黑加仑冻果为原料,制备了具有强抗氧化活性和高花色苷含量的黑加仑提取物,研究了提取物的抗氧化活性和稳定性,以及在肉糜和色拉酱中的抗氧化效果,同时,还研究了黑加仑提取物诱导肿瘤细胞凋亡,以及对人胚肺成纤维细胞免于受到H202损伤的保护作用。研究内容和研究结果如下: 1、通过单因素试验确定黑加仑提取物的最佳制备条件。选择乙醇溶液为提取溶剂,最终确定乙醇体积分数为40%,提取时间2h,该条件下所得的提取物具有最佳的花色苷含量和抗氧化能力。将提取物于40℃旋转蒸发,所得浓缩液中多酚含量为12.2mg/mL,花色苷含量为4.1mg/mL,该浓缩液用于后续试验。 2、对黑加仑提取物的抗氧化活性进行评价,将25mg/mL提取物与0.01%BHA和0.01%抗坏血酸的抗氧化能力分别进行对比,黑加仑提取物的还原能力、2,2-二苯基-1-间三硝基苯基联肼(DPPH)自由基、2,2’-氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉磺酸-6)铵盐(ABTS)自由基和超氧自由基清除率均显著高于抗坏血酸和BHA(P0.05),但是,提取物的羟基自由基清除率显著低于抗坏血酸和BHA(P0.05)。 2、应用液相色谱-质谱联用仪分析黑加仑提物中的多酚成分。提取物中主要有6种花色苷,分别为矢车菊素-3-O-芸香糖苷、飞燕草素-3-O-芸香糖苷、矢菊素-3-O-葡萄糖苷、飞燕草素-3-O-葡萄糖苷、芍药花青素-3-O-芸香糖苷、天竺葵色素-3-O-芸香糖苷,占总峰面积的52.1%,其中前四种花色苷占总花色苷的88.8%;其他多酚物质分别为杨梅酮芸香糖苷、杨梅酮葡萄糖苷、槲皮素-3-O-芸香糖苷、槲皮素葡萄糖营、山奈黄素芸香糖苷、异鼠李素芸香糖苷和三柰酚葡萄糖苷,占总峰面积的47.9%。 3、对黑加仑提取物的抗氧化稳定性以及提取物中花色苷的稳定性进行研究: (1)将花色苷含量为100mg/mL的黑加仑提取物在60℃、80℃和100℃加热1~5h,测定提取物的花色苷含量和抗氧化活性,结果表明,加热导致提取物中的花色苷含量降低,其降解符合一级动力学反应,随着温度的增加,反应速率常数k增加,半衰期t1/2降低,反应活化能为71.97KJ/mol。随着加热温度的升高和加热时间的延长,花色苷的DPPH自由基、ABTS自由基、超氧自由基和羟基自由基清除率以及还原能力均有不同程度的下降,温度越高、加热时间越长,降低的越多。 (2)将花色苷含量为100mg/mL的黑加仑提取物在室外自然光、室内自然光和避光条件下放置至25d,测定提取物中的花色苷含量和抗氧化活性,结果表明,光照导致提取物中的花色苷含量逐渐降低,降低顺序为:室外自然光室内自然光避光。花色苷的降解符合一级动力学反应,室外自然光放置时,一级反应速率常数k最高,半衰期t1/2最短,室内自然光放置和避光放置的反应速率常数均较自然光放置的低,半衰期也增加。光照方式对提取物清除DPPH自由基、ABTS自由基、超氧自由基、羟基自由基的能力和还原能力的降低顺序为:室外自然光室内自然光避光,且放置时间越长,抗氧化能力降低的越多。 (3)将pH3-7的黑加仑提取物于室内自然光条件下放置至15d,测定花色苷含量、DPPH自由基、ABTS自由基清除率和还原能力。结果表明,不同pH提取物呈现不同的颜色,pH增大,最大吸收波长发生红移,pH低时,抗氧化能力比较稳定,在放置过程中降低的幅度较小,pH高时,抗氧化能力降低的较快。 4、将添加量为5g/kg、10g/kg和20g/kg的黑加仑提取物添加到肉糜中,4℃冷藏9d,测定肉糜的TBARS值、羰基含量、巯基含量和色差值。结果表明,黑加仑提取物能够降低肉糜的TBARS值,抑制脂肪氧化,且添加量越大,抑制效果越强;提取物能够降低羰基的含量和减少巯基的损失,抑制了蛋白的氧化,但抑制效果不如抑制脂肪氧化的效果明显;此外,黑加仑提取物能增加肉糜的红度值,保持肉糜鲜红的色泽。 5、将添加量为2.5、5和10g/kg的黑加仑提取物添加到色拉酱中,25℃贮藏6周,测定色拉酱的POV值、TBARS值、粘度和红度值。结果表明,黑加仑提取物能降低色拉酱的POV值和TBARS值,抑制脂肪氧化,同时,也能降低色拉酱的粘度,’提高红度值。对多酚和花色苷在液相中分布的测定结果表明,大部分多酚和花色营分布在液相中,在液相发挥其抗氧化作用。 6、将2.5、5、10、15和20mg/mL的黑加仑提取物作用于胃癌SGC-7901细胞12、24和48h,提取物能够以剂量依赖和时间依赖的方式抑制细胞增殖,12、24和48h时的IC50分别为12.7,10.2和9.0mg/mL;通过倒置显微镜和荧光显微镜观察到,经黑加仑提取物作用以后,细胞出现典型的凋亡特征,细胞收缩,胞质浓缩,形成胞浆丝,细胞核固缩浓染,荧光强度增加,部分细胞颜色发白,呈碎块状致密浓染;流式细胞检测结果进一步说明了黑加仑提取物能够诱导SGC-7901细胞发生凋亡。7、黑加仑提取物对人胚肺成纤维细胞MRC-5具有保护作用,使其较少受到H2O2的损伤作用。黑加仑提取物能够提高细胞的存活率,荧光显微镜观察和流式细胞检测结果说明发生凋亡的细胞数量减少,并且,提取物可提高细胞内SOD,CAT和GSH-Px三种酶的活力,对细胞内的MDA有清除作用。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 帕热哈提·艾合买提;赛德艾合买提;许珊珊;吉尔格丽;吴强;;川芎多糖分离提取的工艺探究[J];科学之友;2011年12期
2 戴红伟;张鹏飞;;植物提取现状及解决思路[J];黑龙江科技信息;2011年26期
3 郭鹏;申野;段大航;;桃红四物汤提取物对大鼠肾毒血清性肾炎PAF水平的影响[J];中国城乡企业卫生;2011年03期
4 李强;张荣强;;仙鹤草原药材及提取物的红外光谱的分析与鉴定[J];北方药学;2011年06期
5 程雅芳;李全文;续颖;杨洋;李鹏婧;韦小英;;花生茎中白藜芦醇的提取及体外抗氧化性的研究[J];食品工业科技;2011年07期
6 杨亭;;红曲纯化提取物可预防二次心脏病发作[J];心血管病防治知识;2008年08期
7 侯甲福;梁忆红;雷涛;张春军;吴宜艳;;核桃楸皮提取物的体外抗肿瘤作用实验研究[J];牡丹江医学院学报;2011年04期
8 尹秀莲;游庆红;蒋中海;郑尚永;;松茸不同溶剂提取物及其抗氧化活性[J];食品与发酵工业;2011年05期
9 邓海英;于志君;张垚;江珍玉;;樟树叶提取物对几种消化道感染细菌的抑制作用研究[J];时珍国医国药;2011年07期
10 余琪;姜艳;周丹英;钱冬伟;朱琦;;杭白菊提取物中活性成分及总黄酮的含量测定[J];中国现代应用药学;2011年06期
11 徐世芳;李晓誉;叶益萍;陈峰阳;;白芷提取物对酪氨酸酶的抑制作用[J];中华中医药学刊;2011年07期
12 徐力;;牛蒡提取物的镇痛镇静作用研究[J];中国医药指南;2011年20期
13 刘骞;孔保华;李菁;杨赫鸿;;丁香不同溶剂提取物抗氧化活性的研究[J];包装与食品机械;2011年04期
14 尤力都孜·买买提;努尔买买提·艾买提;热比姑丽·伊斯拉木;;菊苣籽提取物的保肝降酶作用机制研究[J];中国民族医药杂志;2010年03期
15 孙学刚;吕志平;;方剂组学:一种基于方剂提取物质控的中医药转化医学研究策略[J];中药药理与临床;2011年03期
16 安明显;孙雪;王学顺;薛勇;颜玉;;长白山草苁蓉提取物甲醇提取制备方法研究[J];科技信息;2011年17期
17 向敏;王建梅;顾瑶华;张雅琴;高振宇;吴萍萍;;加味五味消毒饮提取物对小鼠角叉菜胶炎症模型的作用[J];中国现代医学杂志;2011年12期
18 郭晶;方莲花;陈若芸;秦海林;吕扬;杜冠华;;常用清热解毒类中药提取物的蛋白酪氨酸激酶抑制活性筛选[J];中国新药杂志;2011年12期
19 程妮;高慧;王毕妮;邓建军;刘媛媛;曹炜;;松花粉提取物抗氧化活性及其酚类化合物的研究[J];食品与发酵工业;2011年05期
20 刘春阳;陈虹;王磊;魏丽丽;刘斐;钟明;;紫花毕岱提取物对营养性肥胖大鼠的减肥作用[J];农垦医学;2011年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 孙永科;杨林富;杨亮宇;毕保良;初晓辉;杨玉艾;;板栗花提取物体外抑菌效果研究[A];中国畜牧兽医学会食品卫生学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2010年
2 姚明辉;;锯叶棕提取物(SPE)的药理作用及临床应用[A];中国药理学会第七届全国生殖药理学术交流会论文摘要汇编[C];2011年
3 陈超杰;展丽娟;秦海林;王爱平;;栽培菊苣提取物KJ-I对肝细胞的保护作用及其抗氧化机制的初步研究[A];中国活性氧生物学效应学术会议论文集(第一册)[C];2011年
4 豆长明;李继承;;栝楼根提取物对Hela细胞作用的初步研究[A];中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会论文摘要集[C];2003年
5 李春艳;曾艳波;彭芳;戴好富;郑永唐;;蒲葵籽提取物体外抗HIV-1活性及机制的初步研究(论文摘要)[A];中华中医药学会防治艾滋病分会第六届学术年会论文汇编[C];2008年
6 卢汝梅;李兵;苏醒;钟振国;张雯艳;;紫玉盘提取物体外抗肿瘤活性的实验研究[A];第二届临床中药学学术研讨会论文集[C];2009年
7 林青;;天麻提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用[A];中华中医药学会血栓病分会第四次学术研讨会暨广东省中医药学会血栓病专业委员会首届学术研讨会论文集[C];2010年
8 韩伟娟;尹大力;;冬虫夏草提取物ISP-Ⅰ的类似物的合成[A];中国化学会第八届天然有机化学学术研讨会论文集[C];2010年
9 刘淑静;陈芝芳;李岩;;RealtimePCR检测桦树皮提取物对HMVEC细胞VEGFmRNA表达的影响[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
10 窦瑞木;曹克强;;19种中草药提取物对番茄灰霉病菌的抑制作用[A];河南省植物病害研究进展——河南省植物病理学与现代农业学术讨论会论文集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 贾娜;黑加仑提取物的抗氧化活性与应用及其对胃癌细胞增殖的抑制作用[D];东北农业大学;2012年
2 陈承杰;马齿苋提取物抗缺氧作用及其机制的研究[D];第二军医大学;2010年
3 邢雁伟;辨证与辨病结合的清热、活血、益气药抑制心脏早搏的电生理实验研究[D];北京中医药大学;2005年
4 储全根;加味桃核承气汤及其不同提取物对糖尿病大鼠心肌和主动脉病变的影响[D];广州中医药大学;2005年
5 殷丹;江南卷柏提取物抗柯萨奇病毒和单纯疱疹病毒的研究[D];湖北中医学院;2009年
6 于飞;薏苡仁提取物抗肿瘤新靶点及降血脂抗氧化活性研究[D];天津大学;2010年
7 金长江;基于近红外光谱与机器视觉技术的浆果品质检测研究[D];东北农业大学;2011年
8 吴丽莎;虾过敏原提取物量效关系的表征[D];中国海洋大学;2012年
9 靳利娥;酶类与非酶类天然提取物抗氧化性研究[D];太原理工大学;2010年
10 郝建军;辛温通阳中药葱白提取物对动脉粥样硬化大鼠IL-6/STAT3信号通路的调节作用及机制研究[D];湖北中医药大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 黄翠丽;扇贝裙边提取物抗动脉粥样硬化作用及其对血管平滑肌细胞增殖的影响[D];青岛大学;2001年
2 李强;附子提取物诱导T淋巴细胞白血病细胞株CEM凋亡的实验研究[D];成都中医药大学;2004年
3 刘杰;复方GGV兔体内药动学初步研究[D];重庆大学;2004年
4 丁小静;蓝莓提取物对急性化学性肝损伤的干预作用[D];吉林大学;2010年
5 魏艳丽;乳化型香肠中脂肪氧化及控制的研究[D];天津商业大学;2010年
6 姜伟伟;黑米皮提取物对PC-3细胞增殖的影响及机制研究[D];中南大学;2010年
7 徐睿;海带和菲律宾蛤仔提取物对酪氨酸酶活性和黑素生成影响的研究[D];中国海洋大学;2010年
8 武震;银杏叶提取物对周围神经再生影响的实验研究[D];黑龙江中医药大学;2003年
9 梁均乐;知母提取物药时曲线测定及大鼠肠道菌代谢研究[D];华南理工大学;2010年
10 刘晓萌;金思维提取物对APPV717I转基因小鼠脑内总tau蛋白及cdk5表达水平的影响[D];北京中医药大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 张悦;提取物出口须走品牌之路[N];国际商报;2005年
2 特约记者 奚向东 通讯员 李洪涛;巩留“黑加仑”带来丰厚回报[N];新疆日报(汉);2005年
3 记者 明文团 通讯员 张泽民 王荣武;吉木萨尔县黑加仑产业兴企富民[N];昌吉日报;2006年
4 通讯员张海明;吉木萨尔县黑加仑引来乌市客商[N];昌吉日报;2009年
5 记者 李雨茵;植提物或可代表中药率先闯入欧盟[N];医药经济报;2011年
6 特约记者 李靖;贫困户吐尔森学会种植黑加仑[N];阿勒泰日报(汉);2011年
7 孙春艳;促进黑加仑项目发展[N];吉林日报;2007年
8 本报记者 汪少颖 刘书亮;GAP与中药材提取物一个也不能少[N];中国中医药报;2002年
9 曲颖;芬兰用驯鹿骨提取物治骨折[N];中国食品报;2009年
10 委员 张利万;关于在我市北部区局发展黑加仑等小浆果种植项目的建议[N];伊春日报;2011年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978