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《东北农业大学》 2013年
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美洲南瓜(Cucurbit pepo)WMV-2抗性遗传及分子标记研究

王冬杰  
【摘要】:近年来随着南瓜的经济价值越来越被人们所重视,南瓜栽培面积不断扩大,南瓜病毒病危害日益加重,特别在高温干旱年份发病尤为严重,给南瓜的生产造成严重的经济损失。病毒病可以通过蚜虫以及机械方式传播,药剂防治成本高、效果差,并且污染果实和环境。因此培育抗病品种被认为是最有效、可持续发展且对环境无污染的途径。深入了解抗病毒病基因的遗传机制,找出遗传模式的信息,并能将抗病基因导入优良品种或通过对抗病品种的筛选采用杂交方式培育出优良品种是很有必要的。而分子标记技术是抗性基因筛选和鉴定的最有用工具之一。 本研究以美洲南瓜(Cucurbita pepo)抗病自交系‘0504’与感病自交系‘0223’杂交后自交所得的F_2代分离群体为材料,采用分离群体分析法(Bulkedsegregant Analysis, BSA),筛选与南瓜病毒病抗性基因连锁的SSR分子标记,进行分子标记辅助育种。主要结果如下: (1)采用RT-PCR方法鉴定南瓜病毒病的病原。根据已经报道的南瓜病毒外壳蛋白基因序列设计合成引物,以感病叶片和健康叶片总RNA为模板,进行cDNA合成和PCR扩增。从感病叶片中扩增出约800bp左右的特异性片段而健康叶片无此扩增产物,对目标特异性片段进行测序,在Genbank上进行核酸和氨基酸序列的比对分析,与西瓜花叶病毒-2号(WMV-2)的外壳蛋白基因序列的核苷酸序列同源性达95%,确定该南瓜病毒为WMV-2。 (2)采用常规接种方法对父母本、F_1和F_2群体进行人工接种鉴定,结果显示,F_1代全部发病,在157株F_2代植株中,有36株表现为抗病,121株表现为感病,经过卡方检测F_2对该病毒的抗性分离情况基本上符合1:3的分离比例。推测美洲南瓜对WMV-2抗性为隐性单基因控制。 (3)利用适合南瓜的SSR分子标记反应体系,从352对来自于南瓜基因组的SSR引物对筛选出114对在双亲间表现出多态性的引物,多态性为32.4%;从60对与南瓜近缘的黄瓜SSR引物筛选出5对在双亲间表现出多态性的引物,多态性为8%。 (4)从F_2代分离群体中选用高抗和高感的单株各10株分别构成抗感基因池。利用SSR标记和BSA法,从在亲本间具有多态性的119对SSR引物中找到两个与南瓜WMV-2抗性相关基因相连锁的标记(CMTm158和CMTm157),这两个标记通过对F_2单株进行验证,检测F_2抗病单株的基因型。基因型鉴定结果:引物CMTm157与抗病基因间存在17株重组体,其中14株扩增出杂合体带型,3株为感病带型;引物CMTm158共鉴定出10株重组体,其中6株为杂合带型,3株为感病带型,1株缺失。上述两个标记与南瓜WMV-2抗性相关基因的遗传连锁距离分别为6.2cM和10.9cM。
【学位授予单位】:东北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:S642.1

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 胡向武,陈士超,张林普;黄瓜花叶病毒的侵染扩散及病变细胞的电镜观察[J];安徽师大学报(自然科学版);1998年04期
2 钱芝龙,袁彩尧,孙洁波,丁犁平,赵华仑;辣椒苗期抗CMV和TMV鉴定与田间成株抗病性相关分析[J];北方园艺;2000年04期
3 徐立彬;大白菜对芜青花叶病毒(TUMV)抗病性鉴定[J];北方园艺;1996年06期
4 李凤梅,崔崇士,杨国慧;南瓜病毒病的研究进展[J];东北农业大学学报;2002年01期
5 杨国慧;张仲凯;崔崇士;;云南、黑龙江两省南瓜主要病毒病原种类鉴定[J];东北农业大学学报;2007年01期
6 张育垚;李景富;谢立波;张贺;康立功;姜景彬;许向阳;;番茄Cf-5基因的SNP分子标记开发[J];东北农业大学学报;2012年04期
7 丁国华;秦智伟;周秀艳;范金霞;;黄瓜霜霉病抗病基因的RAPD及SCAR标记[J];西北植物学报;2007年09期
8 于拴仓;邹艳敏;;番茄枯萎病抗性基因I-2的显性分子标记及其应用[J];分子植物育种;2007年06期
9 马骁;张兴无;杨飞;;贵州省籽用南瓜种质资源鉴选初报[J];贵州农业科学;2009年12期
10 王晓娟;张建农;曲亚玲;王强;;甜瓜抗白粉病基因的SSR标记[J];甘肃农业大学学报;2012年04期
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李凤梅;黑龙江省南瓜病毒病毒原鉴定和品种资源抗性筛选的研究[D];东北农业大学;2002年
2 陈洁云;葫芦科植物病毒研究[D];浙江大学;2003年
3 赵建华;利用RAPD标记对不同品种(系)甜瓜遗传多样性研究[D];甘肃农业大学;2005年
4 雷进生;观赏辣椒种质资源遗传多样性研究[D];华中农业大学;2005年
5 王掌军;甜瓜种质资源遗传多样性的分子基础与品种诊断技术研究[D];宁夏大学;2005年
6 李海英;南瓜种质资源亲缘关系的RAPD分析[D];新疆农业大学;2006年
7 于明惠;甜瓜种质资源多样性的RAPD研究[D];安徽农业大学;2007年
8 褚盼盼;中国南瓜种质资源遗传多样性研究[D];华中农业大学;2007年
9 刘文睿;甜瓜抗蔓枯病基因分子标记及等位性测验研究[D];南京农业大学;2009年
10 李发玲;番茄枯萎病抗病基因I-1的分子标记及种质资源筛选[D];东北农业大学;2010年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘栓桃,赵智中,何启伟;大白菜转基因育种及分子标记研究进展[J];山东农业科学;2004年03期
2 董艳敏;卢金东;刘栓桃;;分子标记技术在葫芦科瓜类作物中的应用进展[J];山东农业科学;2008年02期
3 侯丽琴;李长松;徐作珽;李林;齐军山;张博;杨革;;黄瓜霜霉病诱导抗性的研究进展[J];山东农业科学;2012年02期
4 高艳梅;翟金玲;徐远峰;黄惜;;抗PRSV转基因番木瓜研究进展[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年03期
5 刘伟良;钟海挽;;我国辣椒属种质资源研究进展[J];安徽农学通报(上半月刊);2010年15期
6 刘志亮;齐兴柱;骆剑;朱晓平;彭艳辉;尹绍武;;波纹裸胸鳝线粒体DNA D-loop多态性分析[J];安徽农学通报(上半月刊);2011年07期
7 罗明明,王永清;用RAPD技术分析葡萄品种亲缘关系[J];安徽农业科学;2005年06期
8 关爱民;杨生玉;石延霞;李宝聚;;瓜枝孢弱致病菌的筛选与遗传稳定性研究[J];安徽农业科学;2006年05期
9 胡重怡;蔡刘体;郑少清;;分子标记在烟草育种中的应用与前瞻[J];安徽农业科学;2007年25期
10 黄江华;黄嘉薇;张建军;彭仁;;番木瓜环斑病毒研究进展[J];安徽农业科学;2008年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘炜;李自超;史延丽;王坚;马洪文;张洪亮;;利用SSR标记进行粳稻品种的遗传多样性研究[A];2005年全国作物遗传育种学术研讨会暨中国作物学会分子育种分会成立大会论文集(二)[C];2005年
2 周辉;赵福宽;林成;高遐虹;程继鸿;;南瓜RAPD分析体系的优化[A];南瓜营养、保健功能与产业发展研讨会论文集[C];2004年
3 赵爽;陈国菊;曹必好;雷建军;;商陆抗病毒蛋白基因的研究进展[A];中国园艺学会第十届会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
4 丁国华;秦智伟;周秀艳;范金霞;;黄瓜霜霉病抗病基因(dm)的RAPD及SCAR分子标记[A];中国园艺学会第十届会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
5 阎志红;;西瓜病毒病防治研究进展[A];中国园艺学会第十届会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
6 梁宁;刘孟军;赵智慧;;果树种质资源的保存、评价与利用研究进展[A];第五届全国干果生产、科研进展学术研讨会论文集[C];2007年
7 赵军胜;陈莹;高明伟;王秀丽;王家宝;王留明;;陆地棉HB红花性状特异SCAR分子标记的开发[A];中国棉花学会2011年年会论文汇编[C];2011年
8 杨正安;韩曙;丁玉梅;朱海山;张宏;王丰榆;;大蒜RAPD反应体系的建立及优化[A];云南省作物学会2004—2006年优秀论文选集[C];2006年
9 侯成香;李木旺;苗雪霞;徐安英;孙平江;张月华;黄勇平;;ISSR方法在蓖麻蚕品种间的遗传多样性研究[A];中国蚕学会第四届青年学术研讨会会议论文集[C];2004年
10 彭波;张鸿;胡兴明;;SSR标记及其在桑树遗传育种中的研究进展[A];中国蚕学会第六届青年学术研讨会论文集(3)[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘卫东;湖南假俭草遗传多样性、生理学特性及护坡性能研究[D];中南林业科技大学;2010年
2 荣立苹;东北地区野生百合种质资源及遗传多样性研究[D];沈阳农业大学;2010年
3 王玉山;侧柏种源遗传多样性与地理变异规律研究[D];山东农业大学;2011年
4 杜萍;中国野生毛木耳遗传多样性研究[D];北京林业大学;2011年
5 马鸿艳;甜瓜白粉病抗性遗传分析及相关基因SSR标记[D];东北林业大学;2011年
6 杨慧;云南糯稻遗传多样性研究[D];云南农业大学;2011年
7 张圣平;黄瓜果实苦味基因遗传分析及精细定位[D];中国农业科学院;2011年
8 李志勇;扁蓿豆种质资源遗传多样性机理的研究[D];中国农业科学院;2011年
9 吴则焰;孑遗植物水松保护生物学及其恢复技术研究[D];福建农林大学;2011年
10 陈美霞;红麻遗传连锁图谱构建及重要性状基因定位与SCAR标记的开发[D];福建农林大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张帆;dsRNA介导的番木瓜环斑病毒(PRSV)的抗病性研究[D];华中农业大学;2010年
2 高伟;四倍体棉种的遗传多样性分析[D];华中农业大学;2010年
3 张晓黎;番茄耐贮藏基因标记开发及辅助自交系选育[D];华中农业大学;2010年
4 魏仕伟;番茄抗青枯病自交系选育及其杂交配组试验[D];华中农业大学;2010年
5 鲁绪才;45份辣椒品种(系)的遗传多样性分析[D];华中农业大学;2010年
6 刁百灵;湖北省粗梗水蕨种群、群落结构研究与保护建议[D];华中农业大学;2010年
7 郑瑛;几种植物病毒侵染寄主的组织病理学和诊断研究[D];浙江理工大学;2010年
8 张峰;农艺技术措施对黄瓜制种产量和质量的影响[D];山东农业大学;2010年
9 付希阳;小麦遗传图谱的加密和籽粒可溶性糖含量的QTL分析[D];山东农业大学;2010年
10 任勇攀;外源RNA导入普通小麦中国春后的变异分析[D];山东农业大学;2009年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨崇良;植物病毒研究及进展[J];山东农业科学;2000年06期
2 秦国正;王飞;;玉米粗缩病的研究进展[J];山东农业科学;2006年03期
3 尚佑芬;国内外植物病毒研究发展概况[J];山东农业科学;1998年01期
4 李娟;;番茄黄化曲叶病毒病的发生及综合防治[J];安徽农学通报(上半月刊);2010年03期
5 朱美霞;李英芝;王建书;侯英梅;孟艳玲;;利用SSR方法鉴定棉花品种纯度[J];安徽农业科学;2005年11期
6 胡向武,陈士超,张林普;黄瓜花叶病毒的侵染扩散及病变细胞的电镜观察[J];安徽师大学报(自然科学版);1998年04期
7 汪超纲;瓜类蔓枯病的发生与防治[J];安徽农业;2003年06期
8 单保强;;温室蔬菜枯萎病的发生及防治[J];现代农业科技;2006年08期
9 孙学海;轩广武;李瑞;;番茄黄化曲叶病毒病的发生与防治[J];现代农业科技;2010年08期
10 陈炜,林雷,田波,刘福昌,王国平,王焕玉;接种外表健康的梨树芽片诱发苹果锈果病类病毒[J];病毒学报;1988年04期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 董家红;尹跃艳;徐兴阳;端永明;丁铭;张仲凯;;番茄斑萎病毒在云南的发生为害[A];公共植保与绿色防控[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 许莉萍;甘蔗抗感黑穗病池的构建和抗病基因分子标记[D];福建农林大学;2000年
2 张海英;黄瓜重要抗病基因的分子标记研究及遗传图谱的构建[D];中国农业科学院;2006年
3 苗立祥;番茄抗青枯病的AFLP分子标记及其相关基因的克隆[D];浙江大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 苏爱莲;一个新的抗小麦白粉病基因的RAPD标记及在育种中进行标记辅助选择的研究[D];甘肃农业大学;2000年
2 徐炎;中国野生葡萄抗白腐病、炭疽病基因RAPD标记及其克隆[D];西北农林科技大学;2000年
3 陈道明;小麦耐盐基因的RAPD标记及其克隆[D];中国农业科学院;2000年
4 孙志民;冰草属植物的收集与遗传多样性研究[D];中国农业科学院;2000年
5 关翠萍;马铃薯病毒一步法RT-PCR诊断研究[D];内蒙古农业大学;2001年
6 曲娟娟;大豆疫霉根腐病抗病基因的RAPD标记研究[D];东北农业大学;2001年
7 金基石;薄皮甜瓜主要种质资源遗传多样性的研究[D];东北农业大学;2001年
8 张翠茹;小麦抗叶锈基因Lr38的RAPD分子标记[D];河北农业大学;2001年
9 刘万勃;RAPD和ISSR标记对甜瓜种质遗传多样性及杂种鉴定的研究[D];西南农业大学;2002年
10 倪念春;国产葱属粗根组植物分子系统学研究[D];四川大学;2002年
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1 李品汉;;蜜本南瓜高产栽培技术[J];农业知识;2005年11期
2 高登义;;饲料作物——美国大南瓜[J];中国草食动物;1991年02期
3 杨远生;肖小蓉;余学川;;玉米间作南瓜栽培模式的发展前景[J];四川农业科技;2007年11期
4 由申;翟凤喜;马艳;牛艳;;高产优质蔓生饲料——饲料南瓜[J];中国农业文摘(畜牧);2004年04期
5 白桂芬;李晓青;;低糖南瓜果酱[J];农村实用科技信息;2004年10期
6 黄林;;日本南瓜春季优质栽培技术[J];福建农业;2007年03期
7 闫世江;张继宁;刘洁;;南瓜育种研究进展[J];种子;2010年07期
8 云天海;陈贻诵;邓长智;肖日新;符坚;伍壮生;;海南蜜本南瓜冬季覆膜滴灌栽培技术[J];长江蔬菜;2009年11期
9 余学川;郭建;覃建东;刘远芝;郭玲;;旱地玉米间作南瓜栽培技术研究[J];农业科技通讯;2009年09期
10 缪卫根;李水凤;茅国夫;陈水校;郑彩凤;;日本锦栗南瓜高产栽培技术[J];上海蔬菜;2009年06期
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1 王萍;张岩;;籽用美洲南瓜单瓜种子产量与产量性状之间的关系[A];中国园艺学会2011年学术年会论文摘要集[C];2011年
2 云天海;陈贻诵;邓长智;翁艳梅;伍壮生;符坚;;南瓜属品种资源引种试验初报[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年
3 刘宜生;;试论我国南瓜属作物产业化的发展概况及前景[A];中国园艺学会十届二次理事会暨学术研讨会论文摘要集[C];2007年
4 李海真;许勇;武峻新;郭军;寿森炎;;南瓜属三个种的亲缘关系与品种的分子鉴定研究[A];中国园艺学会南瓜分会学术研讨会论文摘要集——纪念中国园艺学会南瓜分会成立十周年、祝贺第四届国际瓜类作物学术大会在中国召开[C];2009年
5 Harry S.Paris;Rebeca Nelson Brown;林德佩;;南瓜属、种的基因目录,2004[A];中国园艺学会南瓜分会西南地区南瓜产业化发展研讨会暨第三届会员代表大会论文集[C];2009年
6 杨红娟;顾卫红;唐庆久;马坤;佘德琴;;富肌醇南瓜品种资源的筛选与评价[A];中国园艺学会南瓜分会西南地区南瓜产业化发展研讨会暨第三届会员代表大会论文集[C];2009年
7 张天明;屈冬玉;王长林;王迎杰;刘宜生;;南瓜属蔬菜亲缘关系的AFLP分析[A];中国园艺学会南瓜分会学术研讨会论文摘要集——纪念中国园艺学会南瓜分会成立十周年、祝贺第四届国际瓜类作物学术大会在中国召开[C];2009年
8 付洪冰;张俊华;崔崇士;;农杆菌介导南瓜遗传转化体系的建立[A];中国园艺学会南瓜分会西南地区南瓜产业化发展研讨会暨第三届会员代表大会论文集[C];2009年
9 李凤梅;崔崇士;张耀伟;;西瓜花叶病毒的研究进展[A];中国园艺学会南瓜分会学术研讨会论文摘要集——纪念中国园艺学会南瓜分会成立十周年、祝贺第四届国际瓜类作物学术大会在中国召开[C];2009年
10 景芳毅;屈淑平;崔崇士;;病毒诱导的南瓜抑制差减文库构建及初步分析[A];中国园艺学会南瓜分会学术研讨会论文摘要集——纪念中国园艺学会南瓜分会成立十周年、祝贺第四届国际瓜类作物学术大会在中国召开[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 湖南省瓜类研究所 刘泽发 罗伏青;做好充足准备播种蜜本南瓜[N];湖南科技报;2006年
2 见习记者 徐光胜;地瓜挂枝头 南瓜生“牵手”[N];哈尔滨日报;2008年
3 睢宁县科协 任英;睢宁特菜金丝瓜[N];江苏科技报;2006年
4 邢台市森林公园长信农发养殖园(054000) 王英杰 马树景;药食兼用金丝瓜 种植新路把家发[N];河北农民报;2006年
5 孙书静;盆栽蔬菜 观赏食用两相宜[N];陕西科技报;2007年
6 王淑芬;两个南瓜新品种[N];农民日报;2001年
7 赵金堂;饲料南瓜栽培技术[N];山西科技报;2003年
8 唐大寒;南瓜:糖尿病人的理想食品[N];大众卫生报;2002年
9 张国安;南瓜高产栽培技术[N];广东科技报;2003年
10 来春荣;我对“糖尿病”的认识[N];陕西日报;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 孙守如;观赏南瓜未受精子房、胚珠离体培养及其机理研究[D];河南农业大学;2011年
2 李俊丽;南瓜种质资源遗传多样性与多糖多样性的研究[D];华中农业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王冬杰;美洲南瓜(Cucurbit pepo)WMV-2抗性遗传及分子标记研究[D];东北农业大学;2013年
2 孙玉良;黄瓜、南瓜和瓠瓜种子发育过程中生理生化指标的研究[D];山东农业大学;2012年
3 葛杉;苦味西葫芦果实化学成分的研究[D];吉林大学;2005年
4 刘小俊;中国南瓜属(Cucurbita spp)部分栽培种遗传多样性研究[D];四川大学;2005年
5 张天明;南瓜种质资源多样性及亲缘关系的AFLP分析[D];中国农业科学院;2005年
6 陈解放;南瓜未受精胚珠离体培养体系的优化[D];河南农业大学;2010年
7 何乐;苦味西葫芦果实部分化学成分的研究[D];吉林大学;2007年
8 黄秀丽;南瓜属4个栽培种间亲缘关系的探讨及南瓜白粉病抗性评估的初步研究[D];汕头大学;2005年
9 白婧;农杆菌介导β-1,3-葡聚糖酶(BG2)基因转化南瓜的研究[D];东北农业大学;2008年
10 韩旭;疫霉菌诱导的南瓜SSH文库构建及表达序列标签分析[D];东北农业大学;2008年
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