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《东北农业大学》 2000年
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鸡蛋中主要生物活性物质的制备及应用性质的研究

汪家琦  
【摘要】: 我国禽蛋总产量已连续15年位居世界首位,但是蛋品加工业始终比较落后,近 年来,禽蛋生产已出现供过于求的现象。而鸡蛋中含有丰富的生物活性物质,如卵 黄抗体(IgY)、溶菌酶和卵黄磷脂等。鸡蛋黄中含有约3%的蛋黄抗体(IgY)和10%以 上的磷脂。IgY对口腔及消化道细菌、病毒性感染有防治作用;以卵磷脂为主的蛋黄 磷脂则在食品、化妆品、医疗保健品工业中具有乳化、抗氧化、抗衰老及防治心血 管疾病等作用。鸡蛋清中含有占蛋清蛋白总量3.5%左右的溶菌酶,溶菌酶是一种具 有潜力的天然防腐剂。 本研究将3株大肠埃希氏杆菌(E.coli.44555、44336和44815)、2株变异链球 菌(S.mutans6715和MT6R)、1株金黄色葡萄球菌和1株轮状病毒HRV分别制疫苗, 对蛋鸡进行免疫,制备出相应的高效价的卵黄抗体。并对这些抗体的动态变化规律 进行观测,发现鸡血清抗体IgG与卵黄抗体(IgY)动态变化规律基本一致,且蛋黄 抗体IgY效价在基础免疫15天后总是略高于同期鸡血清抗体IgG;另外发现多株菌 在同时免疫时具有协同免疫作用。 通过二次旋转正交组合设计,得出水稀释法脱除蛋黄中脂和脂蛋白以获得IgY 溶液最优工艺参数:pH值5.3、稀释倍数9倍、浸提时间2小时,脱脂率达98.92%, IgY回收率为92.73%。并在此基础上通过对IgY溶液进行超滤浓缩、盐析、二次超 滤和Sephadex G-200柱层析处理,使IgY纯度达90%以上,总回收率为63.4%。并对 纯化的IgY的耐热、储藏性质进行了研究,发现:①IgY的耐热性较差,其耐热性受 溶液的pH值影响,最适pH值为pH6.5~7.5。②IgY冻干粉在常温以下均有较好的 储藏性,而IgY溶液则需在低温下储藏。③通过甲醛熏蒸法可制备IgY肠溶胶囊, 熏蒸时间为18~22.5小时。另外,IgY可有效地抑制其对应的抗原菌的生长,但 不能杀死该菌。动物试验表明,抗E.coli.-IgY可有效预防由E.coli.引起的腹泻, 但对腹泻的治疗效果一般。体外模拟试验发现抗S.mutans-IgY可有效防止由 S.mutans引起的牙齿的龋变。 将水稀释法分离得到的蛋黄沉淀物干燥后制成粉末,然后用95%(V/V)的溶剂 A浸提,分离萃取液并挥发溶剂得到磷脂纯度达60%以上的卵黄油制品,该工艺中磷 脂回收率大于95%。 通过对4种大孔径弱酸性树脂进行比较,发现树脂DC对蛋清溶菌酶具有较好的 吸附能力,并在此基础上确立了树脂吸附法提纯溶菌酶的工艺,溶菌酶回收率为 66.64%~81.24%,提纯的溶菌酶比活力为20,946U/mg。 本试验还通过加热法使溶菌酶部分变性,发现制得的部分变性溶菌酶(HLZ)对 G~-菌大肠埃希氏杆菌E.coliK12有很好的抗菌作用,实验发现HLZ对E.coliK12的抗 菌作用是杀菌作用,其杀菌能力受HLz和E.coli.K12浓度以及所处环境等因素影响。 汪家拓 摘 要2000年6月 小鼠喂养试验表明未改性的溶菌酶和改性溶菌酶均可促进肠道双歧杆菌增殖。
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