小尾寒羊妊娠中后期胎盘和子宫颈成熟的监测

【摘要】： 本研究选择13只成年健康妊娠小尾寒羊和11个妊娠中后期的小尾寒羊妊娠子宫，分别在妊娠第80～85d、100～105d、120～125d、135～140d和分娩当天采集颈静脉血液和羊水并经剖腹或屠宰取子宫颈、母体子宫阜和子宫阜间组织、胎儿子叶和叶间组织，每期采集4～5份。通过目测、光镜和电镜对妊娠子宫的形态学、样本组织的显微结构和超微结构进行观测；通过放免法、比色法和TUNEL法对血清中的细胞因子(肿瘤坏死因子、白细胞介素-1β和白细胞介素-6)、雌二醇(E_2)和雌三醇(E_3)、血清和羊水中的纤维粘连蛋白和一氧化氮(NO)，各期组织中的细胞凋亡数量进行测定；通过蛋白质酶谱及印迹法对金属蛋白酶2(MMP2)和9(MMP9)进行分析，以监测妊娠中后期胎盘和子宫颈成熟。结果如下： 1．形态学观测：小尾寒羊妊娠80d和100d的最大胎盘突直径明显大于以后三个时期的直径(P＜0.05，或P＜0.01)，在妊娠80d时最大的胎盘突平均直径达10.76±0.72cm，妊娠120d以后的各时期最大胎盘突直径已无显著差异，胎盘已趋于成熟。 羊水和尿水容量随着妊娠的延长明显增加，但最具有实际意义的还是两者比例的改变，在妊娠80d时，羊水容量显著高于尿水容量，两者之比为3.85；到妊娠100d时，两者容量都明显增加，但两者之间差距减少，两者之比为1.22；到妊娠120d时，尿水容量超过羊水容量，两者之比为0.82；到妊娠140d和足月时，羊水和尿水容量已趋于稳定，两者之比分别为0.97和1.01。上述羊水和尿水容量的比值变化说明，随着妊娠进展胎儿新陈代谢逐渐增强，胎盘的营养运输功能和代谢产物排出功能也在逐渐完善。胎盘到妊娠140d左右已趋于成熟。 子宫颈长短、直径和质地的变化可以反映子宫颈成熟状况。在妊娠80d、100d和120d，子宫颈较长，直径较小，质地较硬。到妊娠140d时，子宫颈开始变短，直径开始增大，质地中等硬度，开始向成熟发展。 2．胎盘细胞凋亡：胎盘中常见的凋亡细胞是合体滋养层细胞(ST)，而妊娠中后期细胞滋养层细胞(CT)和血管内皮细胞凋亡现象少见。随着妊娠时间的延长，凋亡细胞数量在不断增加，到分娩时达到最高值，但与妊娠140d凋亡的数量相比，增加幅度不显著，这说明在妊娠140d左右，胎盘趋于成熟。 子宫颈与胎盘之间细胞凋亡的数量变化相似，即在分娩时数量最多，所不同的是子宫颈以成纤维细胞凋亡为主。妊娠140d时，成纤维细胞胞浆内就出现大量的脂褐素小体，这意味着这种细胞开始衰退，凋亡即将发生。从宫颈的凋亡数量上看，妊娠140d时，子宫颈即将成熟。 3．小尾寒羊血清中IL-1β和IL-6含量仅在妊娠120d时显著高于各自的对照组(P＜0.01)，而妊娠各个时期以及分娩时的血清TNF-α含量都高于或显著高于对照组的含量(P＜0.01或P＜0.001)。随着妊娠进展，血清IL-1β、IL-6和TNF-α的含量都逐渐增加，妊娠120d时都达到最高值，分别为0.390±0.196ng/ml，579.8±152.8pg/ml和2.348±0.397ng/ml。而后，三种细胞因子含量都逐渐下降，到分娩前略有回升，但仍低于妊娠120d的最高值。由于从妊娠140d至分娩时三种细胞因子含量基本稳定，由此表明， 东北农业大学农学博士学位论文 一 胎盘于妊娠 IAN左右基本成熟。W Q还参与小尾寒羊分娩的启动。 4．与空怀对照组浓度（2．721．cd um肌 相比，小尾寒羊在妊娠前四个时期NO浓 度均较高（大干 DAs7．21 IDOI／L）（P＜0．05），雕吩妓时急剧下降，潍 4WIH VIDOVL（P＞0D5）。羊水中NO＄＆＆fl；于血清中NOng的波动曲线，但各阶段NO 的浓度要比血清中的砌凶B一些，由此证明NO对维持妊娠起着重要作用。 5．从妊娠中期到妊娠末期，小尾寒羊羊水中纤维粘连蛋白浓度，随着妊娠期的延长 而逐渐下降，并且在妊娠lthe时下降幅度最大，明 氏于前三个妊娠时期的浓度（Ped．01 或P＜（．001），到分娩时降到最低值175士0．83 v w。这预示着母体胎盘和胎）U抬盘连 接开始疏松。 6．与空怀对照组浓度（4．981if．003gb）相比，小尾寒羊妊娠n、IAn、IAN和 140d以及分娩时的血清E3浓度（5．05（h．qM，4568ed．492，5．43（）ti．p，4．78521．038 和4．957ed．679ntw）的劫氏无显著变化（PDeo．05），这说明小尾寒羊血清中的E3不能 象高级灵长类动物的马那样能代表胎盘和胎儿的发育程度，所以不gffi示胎盘成熟。 与空怀对照组浓度（13．697rt．odgPtw）相比，小尾寒羊妊娠 n、IAn和IAN的 马浓度高低无显著变化O＞005）；sde娠IAn时升高，为14．ffiot7．881ng，但和 对照组相比差异不显著（P＞0．05）；而到分娩当大骤然升高，达到最高浓度 （1册．293 Zn．掐“旮d）（P＜0刀1），这说明雌二醇参与分娩的启动。 7．在小尾寒羊妊娠中末期，胎盘和子宫颈超微结构有以下特点：（1）在妊娠elAn 期间，母体子宫阜和胎儿子叶血管中存在许多早幼红细胞、中幼红细胞、幼巨核细胞、 嗜酸中幼粒细胞和嗜碱中幼粒细胞，￥蜘娠IAn和分娩时，胎盘突中上述细胞数量减少， 这说明胎盘在妊娠中期具有较强的造血功能，以后随着胎盘和胎儿的成熟，胎盘造血功 g骗溺，胎JLHWh：nr

【学位授予单位】：东北农业大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：S858.26