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《东北农业大学》 2003年
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大豆乳清中大豆异黄酮的提取纯化及其生物活性的研究

井乐刚  
【摘要】: 本试验以工业上生产大豆分离蛋白的废水——大豆乳清为原料,探索从其中回收大豆异黄酮的工艺,从而为大豆乳清的综合利用提供参考,同时也为大豆异黄酮的生产开辟新的途径。通过超滤、乙酸乙酯萃取、柱层析等提取纯化方法,制得了纯度为72.45%的大豆异黄酮产品,并对其抗氧化性和抗菌性进行了研究。 通过颜色反应、紫外光谱法和高效液相色谱法,对大豆乳清提取物进行了定性和定量研究。结果表明,大豆乳清中含有大豆异黄酮,其含量为7.12μg/mL,组成以genistin和daidzin为主,二者比例接近1:1,苷元型大豆异黄酮未检出。 大豆乳清在超滤之前,要进行除蛋白的预处理。本研究采用加金属盐和加热的方法沉淀大豆乳清蛋白,通过2因素3水平正交试验,确定较合适预处理条件为:把pH为4.5的原料乳清,按其中固形物含量加入5%的CaCl_2,并在85℃下加热15min。在此条件下,蛋白质的清除率为49.8%,异黄酮的保留率为90.4%。通过单因素试验,确定了比较合适超滤条件:选择截留分子量为10000的聚醚砜膜,超滤压力选择34~51kPa,超滤温度选择30~40℃。在此条件下,蛋白质的截留率为83.9%,而大豆异黄酮的截留率为8.6%。 用柱层析法纯化大豆异黄酮时,通过单因素试验,确定了比较合适的吸附条件:选择D4006大孔树脂为吸附剂;在温度为25℃、流速为1mL/min、大豆异黄酮浓度为1mg/mL的条件下上柱吸附,进样量为2.67BV(柱体积)。先用蒸馏水在室温下洗涤,除去水溶性杂质;再用乙醇水溶液梯度洗脱,洗下大豆异黄酮。通过2因素3水平正交试验,确定了较合适的洗脱条件:洗脱温度选择75℃,洗脱流速选择1mL/min。 分别采用α-脱氧核糖氧化法和连苯三酚自氧化法,进行了大豆异黄酮清除羟自由基·OH和超氧自由基O_2~-·的抗氧化试验。结果表明,在适宜的浓度范围内,大豆异黄酮对羟自由基·OH和超氧自由基O_2~-·都有一定的清除能力,说明大豆异黄酮具有抗氧化性。通过滤纸片法进行了大豆异黄酮的抗菌试验。结果表明,大豆异黄酮对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和啤酒酵母都有一定的抗菌效果,其抗菌作用依赖于大豆异黄酮溶液的浓度,但对黑曲霉没有抗菌效果。
【学位授予单位】:东北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:TS214.2

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前4条
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中国硕士学位论文全文数据库 前4条
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3 金婷;沙棘多糖的提取纯化、结构鉴定及其抗氧化性的研究[D];东北农业大学;2006年
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【参考文献】
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【共引文献】
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8 隋燕;钱英;彭跃莲;叶晓;刘淑秀;刘燕;潘力军;;PVC/PVB共混膜相容性研究[A];中国膜科学与技术报告会论文集[C];2003年
9 雷启福;钟世安;杜邵龙;彭密军;周春山;;分子印迹复合膜的合成及其拆分性能研究[A];第二届中国膜科学与技术报告会论文集[C];2005年
10 谭士宾;宋新生;张耀武;;低渗透膜的研制开发[A];第二届中国膜科学与技术报告会论文集[C];2005年
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7 韩俊南;杂萘联苯聚芳醚砜中空纤维纳滤膜的研究[D];大连理工大学;2011年
8 韩润林;杂萘联苯聚芳醚砜分离膜的制备及应用研究[D];大连理工大学;2011年
9 杨红;异黄酮苷元防治AD及抑制Aβ神经毒作用的分子机制研究[D];暨南大学;2010年
10 曹长姝;中药臭灵丹中HTMF体外抗肿瘤机制研究[D];暨南大学;2011年
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1 周荧;腐乳发酵过程中大豆异黄酮组分的变化及理化性质的研究[D];华中农业大学;2010年
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【同被引文献】
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中国博士学位论文全文数据库 前4条
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【二级引证文献】
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【二级参考文献】
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中国博士学位论文全文数据库 前2条
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7 代毅;;健身运动处方与大豆异黄酮联合作用对绝经后妇女体成分和骨代谢的影响[A];第七届全国体育科学大会论文摘要汇编(二)[C];2004年
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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