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《东北农业大学》 2004年 博士论文
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中草药对犬生殖系统影响及促进犬发情机理研究

葛铭  
【摘要】:本实验综合医学治疗妇女不孕症的经验和兽医临床上诱导猪、牛、羊等发情的实验报道,筛选出12种中草药。按照祖国医药学传统理论,考查药物间的合理配伍及药物与动物生殖内分泌之间的关系,用现代科学手段考查中草药各成分在处方中的作用,合理组方,使药物间产生协同作用。组成八个方剂应用于小白鼠,观测了小白鼠子宫和卵巢总重量、子宫角中段外径厚度、子宫角长度及卵巢、子宫的组织学变化,根据不同方剂对小白鼠上述检测指标的影响,筛选出对小白鼠生殖系统有较大促进作用的中草药组方。将中药组方应用于处于间情期的健康京巴母犬。每只母犬每天经口灌服复方中草药煎剂4ml,连用20d。每天观察试验犬的行为变化、外观变化、阴道黏液变化。用药期间定期静脉采血,分离血清,测定雌二醇、孕酮和白细胞介素-1、白细胞介素-6的变化,在用药后的第14d、16d、18d、20d、25d剖杀试验犬,取出其卵巢、子宫和阴道,制成切片,于光学显微镜下观察卵巢、子宫内膜和阴道等的组织学变化规律。将中药组方制成注射液,用于子宫灌注。同时对注射液进行了稳定性、安全性、质量标准和药代动力学实验,最后进行了药物诱导犬发情效果的试验研究。试验结果如下: 1.不同中药处理后小白鼠的子宫和卵口巢总重量、子宫角中段外径厚度及大、中型卵泡比例和最大卵泡直径较对照组均发生了显著变化,其中,中药组方Ⅱ、中药组方Ⅳ和中药组方Ⅴ的子宫卵巢重与体重的比值、子宫角中段外径厚度较对照组显著增大(P0.01),说明中药组方Ⅱ、中药组方Ⅳ、特别是中药组方Ⅴ对小白鼠的生殖系统发育有显著的促进作用。 2.根据筛选结果,确定中药组方Ⅴ为最佳组方。并用其诱导母犬发情。应用该组方诱导母犬发情开始时,受试犬血浆中E_2的平均含量为10pg/ml左右,用药5d后开始增加,第9d时迅速增加,至第15d(即发情前期结束前1~2d)时达到峰值58.33pg/ml,随后,E_2浓度迅速下降。于25d降到18.17pg/ml。P_4浓度在用药时及整个发情前期均很低,用药5d时浓度为0.12ng/ml,到17d浓度达到0.32ng/ml并持续升高,到21d(排卵前后)时其浓度可升高到2.21ng/ml左右,以后逐渐升高,到25d达到6.42ng/ml。 3.应用中药组方Ⅴ药物5d后,犬血浆中IL-1β浓度达到0.578ng/ml,并持续升高,在17d达到峰值0.830ng/ml,到21d排卵前后降到0.703ng/ml,25d降到0.608ng/ml。而IL-6浓度在第5d为0.163ng/ml,以后持续升高,到17d达到0.312ng/ml,到21d排卵前后达到峰值0.348ng/ml,以后开始下降,到25d降为0.285ng/ml。 4.应用中药组方Ⅴ药物7d后,50%试验犬从阴道排出暗红色血样分泌物,阴道涂片中出现红细胞;用药后14d时,阴道涂片中出现角化细胞。中药应用后犬的阴道壁厚度,卵巢重量都较对照组有极显著(P0.01)的变化;子宫角圆周长,子宫体圆周长变化显著(P0.05);子宫切片显示,子宫内膜水肿,表层的子宫腺体大小不等,形状不规则,有的腺体内有红细胞。卵巢切片中可见卵泡开始发育,出现卵泡腔。用药后17d,阴道涂片中角化细胞数量增多,细胞核模糊不清;子宫切片显示,子宫内膜进一步增厚,腺体增生;卵巢切片中出现有腔卵泡,卵泡数量增多,形成颗粒层和卵丘。用药后20d


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