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《东北农业大学》 2007年
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维生素E缺乏雏鸡脾脏淋巴细胞凋亡的机理

张金龙  
【摘要】: 用低维生素E(V_E)和添加不饱和脂肪酸的日粮饲喂雏鸡,建立V_E缺乏雏鸡模型,通过半定量RT-PCR技术、流式细胞术、碱性SCGE、DNA片段化定量分析以及DNA Ladder分析并结合形态学观察等方法对雏鸡脾脏淋巴细胞的形态、DNA损伤、Caspase-3活性、Bcl-2、p53和Caspase-3 mRNA表达水平进行观测,旨在探讨V_E缺乏雏鸡脾脏淋巴细胞的凋亡机制。研究结果表明: 1.光学显微镜下观察到试验组雏鸡脾脏淋巴细胞核染色致密浓集,部分核仁消失,胞膜完整,呈现凋亡变化。透射电镜下观察到核染色质浓缩边集于核膜下,胞质浓缩,细胞器聚集,电子密度增高,细胞核固缩,细胞间连接消失,有凋亡小体出现。AO/EB双荧光染色后荧光显微镜下观察发现试验雏鸡淋巴组细胞呈现橙红色。表明V_E缺乏能够诱导雏鸡脾脏淋巴细胞凋亡。 2.流式细胞仪检测,试验组G_0/G_1峰前出现凋亡峰,细胞增殖指数降低,细胞凋亡率升高,与对照组比较差异极显著(p<0.01)。表明V_E缺乏可促进淋巴细胞凋亡,抑制淋巴细胞增殖。 3.碱性SCGE检测发现试验组雏鸡淋巴细胞出现彗星拖尾现象;DNA片段化定量分析发现试验组淋巴细胞DNA片段化程度增加,与对照组比较差异极显著(p<0.01);经DNA Ladder分析,试验组淋巴细胞出现典型的DNA梯形带。表明V_E缺乏能够引发雏鸡脾脏淋巴细胞DNA损伤。 4.V_E缺乏雏鸡脾脏淋巴细胞Caspase-3蛋白酶活性高于对照组,组间差异极显著(p<0.01)。表明V_E缺乏可通过激活凋亡关键酶Caspase-3而导致雏鸡脾脏淋巴细胞发生凋亡。 5.抑凋亡基因Bcl-2 mRNA表达水平低于对照组,而促凋亡基因p53和Caspase-3 mRNA表达水平高于对照组,组间差异极显著(p<0.01)。表明V_E缺乏通过影响凋亡相关基因的表达而诱导淋巴细胞凋亡。 本研究从淋巴细胞的形态、DNA损伤、酶活性及凋亡基因表达水平等角度入手,从分子水平揭示了V_E缺乏雏鸡脾脏淋巴细胞凋亡的机制,该研究成果可为揭示V_E缺乏雏鸡免疫细胞损伤和免疫抑制机理提供理论依据。
【学位授予单位】:东北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S858.31

【引证文献】
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1 顾庆云;张立超;李心慰;李艳飞;;亚慢性铝中毒对雏鸡大脑神经细胞凋亡的影响[J];中国家禽;2010年02期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 王艳凤;氟致体外培养牛脾脏淋巴细胞凋亡机理的研究[D];东北农业大学;2008年
2 夏士亮;铝致大鼠淋巴细胞凋亡的线粒体/Caspase依赖性途径机制[D];东北农业大学;2013年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 王振勇;雏鸡脑软化症的分子机理[D];东北农业大学;2002年
2 李艳飞;雏鸡脑软化症的分子免疫机理[D];东北农业大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 李金龙;镉致鸡脾脏淋巴细胞凋亡机理的研究[D];东北农业大学;2004年
【共引文献】
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4 王艺陪;李晓暖;来瑞平;余日安;鲁文清;;活化蛋白-1在硒拮抗砷致细胞周期改变中的作用[J];癌变.畸变.突变;2009年03期
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9 张海军,张小爱,程双怀,耿红,聂刘旺,阚显照;扬子鳄Sox基因的PCR-SSCP分析[J];安徽师范大学学报(自然科学版);2001年03期
10 陈冬生,聂刘旺,王朝林,谢万树;扬子鳄DMRT1基因DM保守区的克隆及序列分析[J];安徽师范大学学报(自然科学版);2004年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李新民;党琦;;天佛参口服液(TFS)诱导人喉癌细胞Hep-2凋亡及机理探讨[A];2011年中华名中医论坛暨发挥中西医优势防治肿瘤高峰论坛论文集[C];2011年
2 胡大林;刘移民;唐冬生;袁建辉;彭晓春;何云;沙焱;涂晓志;杨建平;庄志雄;;多因素联合作用下石英粉尘接尘者红细胞膜T-SOD活性影响因素回归分析[A];第五届广东省环境诱变剂学会暨第三届广东省预防医学会卫生毒理专业委员会学术交流会论文集[C];2006年
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5 王平;杨维仁;杨在宾;姜淑贞;张桂国;;维生素E的生物学特性及其在畜禽生产上的应用[A];2010山东饲料科学技术交流大会论文集[C];2010年
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7 杨彬;兰喜;殷相平;李学瑞;李宝玉;方玉萍;柳纪省;;口蹄疫病毒双效疫苗载体的构建及其体外表达研究[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
8 杨彬;兰喜;殷相平;李学瑞;李宝玉;方玉萍;柳纪省;;口蹄疫病毒双效疫苗载体的构建及其体外表达研究[A];首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集(2008)[C];2008年
9 孟宪荣;周蕾蕾;栗绍文;周祖涛;毕丁仁;陈辉;齐冰玉;;猪骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ基因的表达及其单克隆抗体的制备[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集(上册)[C];2009年
10 李西玉;许信刚;周继章;邱昌庆;曹小安;宫晓炜;王光华;;猪流产嗜性衣原体MOMP基因的克隆及原核表达[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
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1 张春敏;Survivin, Caspase-3在皮肤鳞状细胞癌中的表达及雄黄的体外干预研究[D];山东中医药大学;2010年
2 巩丽;人参皂甙Rg1对绝经后妇女阿尔茨海默病细胞模型的神经保护作用及机理研究[D];山东大学;2010年
3 卢晓凤;亚油酸在分化状态不同的两株结肠癌细胞中的生物活性差异研究[D];浙江大学;2011年
4 乔小放;RNA干扰SUMO1基因对结肠癌Hct116细胞生物学行为的影响[D];吉林大学;2011年
5 于丽;ClC-3氯离子通道在视网膜神经节细胞RGC-5凋亡中的作用研究[D];吉林大学;2011年
6 张宝石;~(18)F标记小分子肽(~(18)F-CP-18)早期评价肺癌化疗后细胞凋亡的基础研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
7 戴若莲;Sonic hedgehog信号通路在皮层神经元氧化应激中的保护作用及机制研究[D];华中科技大学;2011年
8 曹长姝;中药臭灵丹中HTMF体外抗肿瘤机制研究[D];暨南大学;2011年
9 陈雪;膜联蛋白A7与人子宫颈鳞癌的关系及机理研究[D];河北医科大学;2011年
10 朱伟;摄食抑制因子NUCB2/Nesfatin-1对机体胰岛素敏感性的影响[D];重庆医科大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 辛宁;PDX-1真核表达载体构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达[D];郑州大学;2010年
2 王翠;杜氏盐藻寡糖基转移酶亚基STT3a的基因克隆与功能分析[D];郑州大学;2010年
3 薛豪杰;神经节苷脂对缺氧缺血性新生大鼠认知功能改善的研究[D];郑州大学;2010年
4 陆玉成;AMF基因在食管鳞癌细胞株中的表达及功能初步分析[D];郑州大学;2010年
5 孟佳;神经生长因子对青光眼视神经保护的临床观察[D];郑州大学;2010年
6 张磊;杜氏盐藻(Dunaliella salina)GPI多克隆抗体的制备及其在MDCK细胞中的定位[D];郑州大学;2010年
7 冯玖玲;杜氏盐藻RbcS基因家族新成员的克隆及功能研究[D];郑州大学;2010年
8 李静;Beclin1、Caspase3在宫颈鳞癌患者新辅助化疗前后癌组织中的表达及其意义[D];郑州大学;2010年
9 刘娟妮;ERCC1、P27~(kip1)、CyclinE在胃癌中的表达及其与胃癌预后相关性研究[D];郑州大学;2010年
10 孙翠;核桃(Juglans regia L.)坚果仁维生素E含量分析及jrMPBQ基因克隆[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
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1 高希宝,刘春生,孙建霞,张宁,许之,李杰;氟化物对不同类型DNA紫外吸收光谱的影响[J];癌变.畸变.突变;1998年01期
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1 朱言柱;亚慢性染铝对大鼠免疫毒性的研究[D];东北农业大学;2011年
2 赵汉嵩;亚慢性染铝致大鼠肝损伤的研究[D];东北农业大学;2011年
3 孙浩;亚慢性染铝对雄性大鼠生殖毒性的研究[D];东北农业大学;2011年
4 刘二龙;氟诱导原代大鼠肝细胞凋亡及bax基因表达研究[D];湖南农业大学;2004年
5 李金龙;镉致鸡脾脏淋巴细胞凋亡机理的研究[D];东北农业大学;2004年
6 钟代彬;氟对体外培养山羊成骨细胞增殖分化及凋亡的调控[D];中国农业大学;2005年
7 王军明;断乳大鼠亚慢性染铝对脑脂质过氧化和海马细胞凋亡影响的实验研究[D];中国医科大学;2005年
8 张春红;镉致体外培养鸡支持—生精细胞凋亡机理的研究[D];东北农业大学;2006年
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【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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中国硕士学位论文全文数据库 前3条
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【二级参考文献】
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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4 贺晓华;泰山梧桐花多糖对雏鸡的免疫增强作用研究[D];山东农业大学;2013年
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8 张金龙;维生素E缺乏雏鸡脾脏淋巴细胞凋亡的机理[D];东北农业大学;2007年
9 汪玉娇;伯氏疏螺旋体重组膜蛋白rBmpA对小鼠巨噬细胞和淋巴细胞体外作用研究[D];昆明医科大学;2013年
10 王众;三氯化铝对鸡脾淋巴细胞毒性的体外研究[D];东北农业大学;2008年
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