收藏本站
《东北农业大学》 2008年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

弹性蛋白酶发酵生产条件优化及性质研究

徐晶  
【摘要】: 弹性蛋白酶(Elastase)是一种以分解不溶性弹性蛋白为特征的蛋白水解酶,能降解弹性硬蛋白,并且对酪蛋白、明胶、血纤维蛋白、血红蛋白、白蛋白等多种蛋白质都具有分解能力,因此可用来作为肉类嫩化剂。另外,弹性蛋白酶还可以降解肉类中难以处理、食用的韧带、大动脉管以及筋腱等蛋白质废料,利于提高肉的利用率。 响应曲面法( response surface methodology, RSM)是统计设计实验技术的合成,它采用多元二次方程来拟合因素和响应值之间的函数关系,通过对回归方程的分析来寻求最优工艺,解决多变量问题。 本课题研究的主要内容是以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)作为产弹性蛋白酶菌株,根据在不同摇瓶发酵培养条件下,该菌所产弹性蛋白酶水解能力的大小,应用响应面法来确定最利于枯草芽胞杆菌发酵产弹性蛋白酶的条件。同时对得到的弹性蛋白酶的性质进行初步研究。 研究中,首先,通过预实验确定最利于枯草芽孢杆菌发酵产弹性蛋白酶的培养条件:最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为酵母膏,最佳金属离子组合为K_2HPO_4、KH_2PO_4、MgSO4·7H2O。然后,通过单因素实验以及双因素重复实验,确定葡萄糖、酵母膏、葡萄糖和酵母膏的交互作用、金属离子、温度、pH值以及接种量的取值范围,并对以上各个因素进行方差分析,确定葡萄糖、酵母膏、温度及pH值四个因素为影响显著的因素。最后,对影响显著的因素应用二次回归正交旋转组合设计安排试验,得到回归方程。 对得到的回归方程应用SAS软件进行分析,得到最利于枯草芽孢杆菌摇瓶发酵产弹性蛋白酶的培养条件为:1.5%葡萄糖、1.5%酵母膏、0.1%K_2HPO_4、0.05%KH_2PO_4、0.01%MgSO_4·7H_2O,起始pH为6.5,最适发酵温度为36.5℃,接种量4%。通过验证实验证明得到的回归方程是可靠的,得到的各个参数值在实际应用中是可行的。 同时,对所得到的弹性蛋白酶的热稳定性、酸碱稳定性、最适作用温度、最适作用pH值、金属离子以及盐析的影响进行了初步的研究,得到的结论如下:由枯草芽孢杆菌发酵得到的弹性蛋白酶在低温下稳定性较好;在pH接近于中性的条件下稳定性较好;在碱性条件下水解能力较好:在Tris-HCl缓冲液中最适pH为8.2,在硼砂-硼酸缓冲液中最适pH为7.8;弹性蛋白酶的最适作用温度为50℃;金属离子对枯草芽孢杆菌生产的弹性蛋白酶的水解能力影响不明显;弹性蛋白酶的分级沉淀确定在20%~65%。 将实验得到的弹性蛋白酶粗酶应用于对猪肉及主动脉的嫩化,发现在50℃条件下,4%左右添加量的酶与猪肉及主动脉作用1h,嫩化的效果较好,这与弹性蛋白酶性质研究部分实验所得的结论相一致
【学位授予单位】:

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 刘书亮;吴琦;詹莉;赖文;;枯草芽孢杆菌弹性蛋白酶的纯化及酶学性质研究[J];食品与发酵工业;2010年06期
2 马长中;辜雪冬;罗章;杨林;田广搂;唐记霞;;西藏产弹性蛋白酶的枯草芽孢杆菌分离及鉴定[J];安徽农业科学;2011年24期
3 吴琦;刘书亮;张娟;;产弹性蛋白酶枯草芽孢杆菌发酵条件研究[J];食品与发酵工业;2008年11期
4 方尚玲;李世杰;张宁宁;;物理诱变法选育高产弹性蛋白酶的枯草芽胞杆菌[J];食品与药品;2006年10期
5 方尚玲;李世杰;李晓辉;;弹性蛋白酶产生菌的化学诱变选育[J];食品研究与开发;2006年11期
6 韩建春;邢明伟;;枯草芽孢杆菌产弹性蛋白酶对肉嫩化的工艺研究[J];食品工业科技;2011年02期
7 王树岐;;弹性蛋白酶的研究(二) 右旋糖酐对弹性蛋白酶的化学修饰及其某些性质的研究[J];中国生化药物杂志;1984年02期
8 姚勇芳;李洪军;;弹性蛋白酶特性及其获取来源的研究概况[J];广东轻工职业技术学院学报;2005年04期
9 关国雄,颜子颖,林哲甫;弹性蛋白酶和木瓜蛋白酶对不同蛋白质水解能力的比较[J];食品科学;1992年03期
10 周亚璋;;用胰脏同时提取胰岛素和弹性蛋白酶的方法[J];中国生化药物杂志;1988年02期
11 兰辛;;弹性蛋白酶在调节血脂及预防改善酒精肝方面的作用研究[J];现代食品科技;2008年11期
12 吴大庆;刘希乐;李明伦;;弹性酶活性测定方法的探讨[J];中国生化药物杂志;1993年03期
13 朱祚铭;许棉;陈长诒;王毅然;刘骊生;;猪胰脏联产弹性蛋白酶和激肽释放酶的新方法[J];中国生化药物杂志;1988年01期
14 方尚玲;胡家俊;;微生物产弹性蛋白酶[J];食品与药品;2007年01期
15 陈启和,何国庆,邬应龙;弹性蛋白酶产生菌的筛选及其发酵条件的初步研究[J];浙江大学学报(农业与生命科学版);2003年01期
16 李洪军,贺稚非,陈宗道,宫春波,刘鹭;假单胞菌SWU-M生产弹性蛋白酶发酵条件的研究[J];中国食品学报;2004年04期
17 徐晶;韩建春;;弹性蛋白酶高产菌株摇瓶发酵条件优化及弹性蛋白酶性质的初步研究[J];食品工业科技;2008年06期
18 吴梧桐;王耀方;薛奕干;盛甜;;药用弹性蛋白酶的活力测定[J];中国药科大学学报;1983年02期
19 魏宜琴;魏天松;;药用弹性蛋白酶的活力测定法[J];中国生化药物杂志;1985年03期
20 王树歧,程玉华;化学修饰弹性蛋白酶稳定性的研究[J];吉林大学学报(理学版);1985年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘桂君;孟佑婷;杨素玲;尚宏忠;;生防菌枯草芽孢杆菌的辐射诱变研究[A];公共植保与绿色防控[C];2010年
2 蒋思婧;马立新;;枯草芽孢杆菌的寡聚-1,6-葡萄糖苷酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
3 李华;沈立荣;冯凤琴;李铎;;细菌型豆豉发酵菌株的鉴定[A];2009食品科技(北京)论坛会议指南[C];2009年
4 杨明明;;枯草芽孢杆菌高效表达系统的构建[A];第六次全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2010年
5 钟娟;周金燕;李志东;雷宝良;谭红;;一种新型抗菌肽——捷安肽素的研究[A];中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2005年
6 游银伟;尤升波;岳寿松;;枯草芽孢杆菌YYW-1蛋白酶缺陷株诱变与筛选[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年
7 亓雪晨;齐俊生;王琦;梅汝鸿;;枯草芽孢杆菌启动子片段的克隆及其在绿色荧光蛋白标记中的应用[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年
8 刘辉;魏祥法;井庆川;刘雪兰;刘瑞亭;石天虹;;一株枯草芽孢杆菌发酵培养基的优化[A];第三届第八次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集[C];2006年
9 孙璐;文欣;谭英;李贺阳;赵月芳;牛聪伟;席真;;原卟啉原氧化酶及其突变体的酶学性质研究[A];中国化学会第26届学术年会化学生物分会场论文集[C];2008年
10 冀志霞;钱风光;陈守文;;西瓜枯萎病生防菌的筛选与鉴定[A];粮食安全与植保科技创新[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;吸烟对牙周基础治疗前后龈沟液量和弹性蛋白酶水平的影响[N];中国医药报;2003年
2 ;浅谈枯草芽孢杆菌在水产养殖上的应用[N];中国海洋报;2003年
3 江苏省淡水水产研究所研究员 徐在宽 江苏省海洋与渔业局工程师 仇丽;复合型枯草芽孢杆菌活菌生物净水剂在特种水产养殖中的应用探讨[N];科技日报;2001年
4 本报记者 仇方迎;还水体以清新[N];科技日报;2001年
5 河北远征药业 赵茂华王东军;早期仔猪断奶后常见问题及对策⑤[N];河北农民报;2007年
6 水清;活菌剂在农业生产上的应用[N];江苏农业科技报;2008年
7 ;蛋白酶[N];中国畜牧兽医报;2008年
8 香红星;走进微生物世界让这个“小精灵”为你增效[N];中国畜牧兽医报;2007年
9 王化民 本报记者  张会斌;法库创出服务农民新模式[N];辽宁日报;2006年
10 中国科学院亚热带农业生态研究所研究员 邢廷铣;水产动物微生态制剂及其应用(上)[N];湖南科技报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 伍辉军;枯草芽孢杆菌脂肽化合物合成调控基因功能研究及多功能生防工程菌株的构建[D];南京农业大学;2008年
2 李洪军;弹性蛋白酶优良菌种选育及酶功能特性研究[D];西南农业大学;2003年
3 陈启和;弹性蛋白酶发酵工艺及其发酵动力学研究[D];浙江大学;2003年
4 赵正源;中性粒细胞弹性蛋白酶在肺癌发生发展中的作用[D];第四军医大学;2004年
5 齐东梅;药食源芽孢杆菌的分类鉴定及枯草芽孢杆菌H110抑菌特性研究[D];中国农业大学;2005年
6 赵致广;多型核粒细胞弹性蛋白酶与肾癌相关性研究[D];第四军医大学;2004年
7 章宏;1.人巨噬细胞金属弹性蛋白酶在胃癌细胞及胃癌组织中的表达及临床意义 2.胃癌和结肠癌患者二氢嘧啶脱氢酶基因多态性与5-FU代谢及临床意义探索[D];浙江大学;2006年
8 王帅;芽孢杆菌及其脂肽类化合物防治植物病害和促进植物生长的研究[D];南京农业大学;2009年
9 张清霞;甘露寡糖诱导抗病反应初步研究及枯草芽孢杆菌甘露聚糖酶基因的克隆与表达[D];中国农业大学;2005年
10 彭华;纳豆枯草芽孢杆菌对奶牛生产性能、瘤胃发酵和血液指标的影响[D];中国农业科学院;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 徐晶;弹性蛋白酶发酵生产条件优化及性质研究[D];东北农业大学;2008年
2 詹莉;枯草芽孢杆菌弹性蛋白酶的纯化及酶学性质的研究[D];四川农业大学;2008年
3 王超;枯草芽孢杆菌EL32分泌的弹性蛋白酶的纯化及性质研究[D];集美大学;2012年
4 石岩;欧文氏杆菌突变体的构建及枯草芽孢杆菌甘露聚糖酶基因的克隆和表达[D];中国农业科学院;2010年
5 吴宝昌;枯草芽孢杆菌混合发酵制备豆粕饲料的研究[D];山东轻工业学院;2010年
6 徐广军;枯草芽孢杆菌BS_(3-1)对小麦赤霉病(Fusarium graminearum)的生物防治研究[D];四川农业大学;2003年
7 莫宏春;枯草芽孢杆菌6-磷酸葡萄糖脱氢酶的分离纯化和部分性质[D];四川大学;2003年
8 邹立扣;枯草芽孢杆菌WHNB02植酸酶phyC基因在大肠杆菌中的表达及玉米表达载体的构建[D];四川农业大学;2004年
9 周红梅;生防枯草芽孢杆菌mRNA差异显示分析[D];黑龙江大学;2008年
10 王君;大蒜汁对枯草芽孢杆菌抑制作用的研究[D];陕西师范大学;2008年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978