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《东北农业大学》 2009年
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口蹄疫病毒VP2蛋白B细胞线性表位的鉴定

徐宗香  
【摘要】: 口蹄疫是由口蹄疫病毒引起偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。易感动物如黄牛、绵羊、山羊和猪等。口蹄疫被世界动物卫生组织列为必须通报的动物传染病。对口蹄疫的预防和诊断,需要建立在对病毒蛋白抗原结构与功能的研究之上。本研究首先利用大肠杆菌表达系统表达了Asia1型口蹄疫病毒VP2蛋白,抗原性检测结果表明表达产物能被Asia1型口蹄疫感染血清所识别。 为了分析Asia1型口蹄疫病毒VP2蛋白的优势抗原表位区,设计了7个覆盖整个Asia1型口蹄疫病毒VP2蛋白的多肽片段,分别进行融合表达,经Western blot分析表明只有融合蛋白TrxA-F1(1~44aa)能够被Asia1型口蹄疫感染血清所识别,鉴定表明1~44aa为Asia1型口蹄疫病毒VP2蛋白的B细胞线性抗原表位区。本实验同时证实,O型、A型、C型口蹄疫标准血清和感染SAT2型口蹄疫康复期的牛血清也能识别表达的融合蛋白TrxA-F1。为了进一步鉴定Asia1型口蹄疫病毒VP2蛋白的B细胞线性线性抗原表位区,设计了6个覆盖F1(1~44aa)的多肽片段,每一个多肽片段合成一对寡核酸片段,经磷酸化、退火后插入表达载体pET-32a进行融合表达,表达的6个融合蛋白经切胶的方法进行纯化。经Western-Blot进一步鉴定出了Asia1型口蹄疫病毒VP2蛋白的B细胞线性抗原表位区位于N末端的6~15aa区域。 在鉴定Asia1型口蹄疫病毒VP2蛋白的基础上,对Asia1型和O型口蹄疫病毒VP2进行氨基酸序列的比对,结果表明在两者N末端的1~31氨基酸序列完全一致。所以,可以只针对O型口蹄疫病毒VP2蛋白32~218 aa进行B细胞抗原表位的鉴定,设计了3个相互重叠的多肽片段覆盖O型口蹄疫病毒VP2蛋白32~218 aa区域。经克隆表达,Western blot鉴定在此区域未鉴定出B细胞线性抗原表位。 综合上述实验结果,Asia1型和O型口蹄疫病毒VP2蛋白的B细胞线性抗原表位区N末端的6~15aa区域,而此区域也是其它血清型口蹄疫病毒的一个B细胞线性抗原表位区。对口蹄疫病毒VP2蛋白进行抗原表位鉴定,可以进一步了解口蹄疫病毒的抗原结构,为进一步研究其功能及口蹄疫的诊断和疫苗的研制奠定基础。
【学位授予单位】:东北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:S852.65

【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 杨华;减蛋综合症病毒结构蛋白六邻体优势抗原表位分析[D];东北农业大学;2010年
2 郭鹭;抗鹅细小病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备及对应抗原表位的定位[D];东北农业大学;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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3 蒋再学;陈征兵;林文;余邵华;竺薇;张晓明;罗满林;;仔猪伪狂犬PCR鉴定及病毒分离[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
4 陈宗艳;朱英奇;李传峰;李露;付玉志;王超;刘光清;;新发鸭源呼肠孤病毒(TH11株)的分离与鉴定[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
5 王珊;刘冰;李德朋;孙远;马勇;田秀丽;宋宇;王承宇;张乃生;;马蹄香治疗犬细小病毒性肠炎的疗效观察[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集(下册)[C];2011年
6 程晶;荫硕焱;盖新娜;郭鑫;杨汉春;;2006—2008年我国部分地区规模化猪场PRV血清流行病学调查[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
7 赵东升;盖新娜;孙栋;郭鑫;杨汉春;;猪脑心肌炎灭活疫苗的制备及小鼠免疫研究[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
8 方忠意;崔保安;;动物基因工程疫苗研究进展[A];新型疫苗研发及基因工程疫苗应用研讨会论文集[C];2010年
9 曾政;任远志;叶昭辉;凌洪权;杨泽林;熊仲良;;重庆市2009年犬狂犬病检测及流行病学调查[A];重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2009年
10 薛传华;何林;赵志模;;朱砂叶螨β-actin基因cDNA片段的克隆及实时荧光定量PCR方法的建立[A];庆祝重庆市植物保护学会成立10周年暨植保科技论坛论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 赵冬敏;B亚群禽白血病病毒分离株的生物学特性[D];山东农业大学;2010年
2 赵鹏;猪繁殖与呼吸综合征病毒在抗体选择压下的变异[D];山东农业大学;2010年
3 刘栋;畜禽补体C3d基因克隆及序列分析和重组鸡C3d免疫佐剂效果研究[D];山东农业大学;2010年
4 张青婵;A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较[D];山东农业大学;2010年
5 宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
6 黄馨;端粒缩短影响原发性高血压及其并发症的发生[D];北京协和医学院;2010年
7 张琪;KLT对中脑神经系统疾病的影响及KLT、NDV、SW联合抗肿瘤作用机制研究[D];西北农林科技大学;2010年
8 熊义;IRES调控α-干扰素的抗FMDV研究[D];武汉大学;2009年
9 孙亚妮;免疫组织化学技术在鸡三种病毒性肿瘤病鉴别诊断中的应用[D];山东农业大学;2011年
10 邱玉玉;A亚群禽白血病病毒单克隆抗体的制备和不同亚群禽白血病病毒共感染相互影响的研究[D];山东农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 许媛媛;鸭瘟的动态病理学研究和鸭CD4的克隆[D];华中农业大学;2010年
2 李爽;鸭源禽呼肠孤病毒感染雏鸭的免疫病理学研究[D];华中农业大学;2010年
3 徐珊珊;重组杆状病毒介导的高致病性猪繁殖与呼吸综合征基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2010年
4 胡智斌;湖北省高致病性猪蓝耳病活疫苗(JXA1-R株)试用报告[D];华中农业大学;2010年
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6 邬成业;禽流感病毒H5N1亚型河南分离株NP基因的原核表达及T细胞表位筛选[D];郑州大学;2010年
7 史平玲;猪FcγRⅢ介导PRRSV抗体依赖增强作用研究[D];郑州大学;2010年
8 巩艳艳;抗体免疫选择压作用下新城疫病毒HN基因和F基因的变异[D];山东农业大学;2010年
9 裴兰英;HSP_(70)与MDV肿瘤的发生发展相关性研究[D];山东农业大学;2010年
10 薛梅;潍坊地区猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李茂祥,李俊宝,郑玉美;小鹅瘟病毒纯化及其理化特性的研究[J];病毒学报;1990年02期
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6 邓小芸;高玉龙;高宏雷;祁小乐;王晓艳;王笑梅;;传染性法氏囊病病毒VP3抗原表位的鉴定[J];病毒学报;2007年04期
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中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 布日额;GPV VP及NS基因克隆及其原核表达产物的研究和应用[D];东北农业大学;2005年
2 周艳君;猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定[D];东北农业大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前8条
1 郑义华;小鹅瘟单克隆抗体的研制及应用研究[D];安徽农业大学;2007年
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4 裴颖;感染鹅细小病毒雏鹅病理学研究[D];东北农业大学;2008年
5 李俚;抗鹅细小病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备及其识别抗原表位的初步鉴定[D];东北农业大学;2008年
6 肖妙;减蛋综合征病毒五邻体、纤维蛋白和六邻体的原核表达及抗原性分析[D];东北农业大学;2008年
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【二级引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 杜秋明;鹅细小病毒单克隆抗体的制备及单抗双夹心ELISA检测方法的建立[D];延边大学;2011年
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3 张丹;淀粉糖化酶抗体的研制及其双抗夹心ELISA法的初步建立与应用[D];扬州大学;2012年
4 盛巧玲;鹅IgA重链恒定区的原核表达和特异性抗体的制备与鉴定[D];东北农业大学;2013年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 布日额;GPV VP及NS基因克隆及其原核表达产物的研究和应用[D];东北农业大学;2005年
【相似文献】
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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10 孙晓智;口蹄疫病毒环介导等温扩增检测方法的建立与评价[D];内蒙古农业大学;2007年
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