胆碱磷酸转移酶基因转化大豆的研究

【摘要】： 大豆是重要的经济作物，黑龙江省是我国大豆的主产区，但由于低温 冷害常造成大幅度减产。本论文把欧洲油菜的胆碱磷酸转移酶基因（cpt） 导入大豆，通过直接导入外源基因的技术解决大豆抗寒问题。 低温诱导的植物抗寒性与脂代谢相关，胆碱磷酸转移酶（CPT）是一 个整合的膜蛋白，是磷脂合成代谢途径上一个重要的酶，该酶的产物是磷 脂酰胆碱（PC），是生物膜的主要组成成份，与膜的流动性和抗寒性有密 切关系。 本实验把含有35s-35s-AMV-cpt-NOST片段的质粒pRDH401，通过花 粉管通道法导入黑龙江省常见的五个栽培大豆品种中，所获种子第二年种 植并加以检测。经抗生素、低温筛选后，对可能转化的植株进行PCR检测， 转化植株扩增出目的基因片段。对PCR阳性株的总DNA进行Southern杂交 检测，结果显示外源基因已经整合到2个大豆品种的基因组中。