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《东北林业大学》 2001年
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高山红景天颗粒状愈伤组织悬浮培养和红景天甙的诱导

吴双秀  
【摘要】: 珍贵中药植物高山红景天(Rhodiola sachalinensis A.Bor)的根和根茎中含有以红景 天甙(salidroside)为主的次生代谢物质,具有抗疲劳、抗衰老、抗缺氧、抗微波辐射等 作用,是非常有开发前途的环境适应药物。本实验利用植物组织和细胞培养技术,以诱导 和建立较高红景天甙产量的高山红景天愈伤组织悬浮培养体系为目的,系统地对高山红景 天愈伤组织的诱导和状态调控、分化了的愈伤组织颗粒(CCA)悬浮培养体系的特点和 生长规律、红景天甙的积累规律、培养基优化和生产条件优化、利用诱导因子和添加前体 方法提高红景天甙产量、以及红景天甙生物合成途径几个方面做了调查。 利用高山红景天无菌苗的子叶、幼叶、幼茎和根成功诱导出了7种愈伤组织。以其 子叶最容易诱导产生愈伤组织,其次是幼叶、幼茎和根。对上述愈伤组织的状态进行调控, 得到红景天甙含量高、生长速度快、初步分化了的CCA型愈伤组织颗粒。 CCA悬浮培养的生长周期为25~30天。在继代后的0~15天左右为指数生长期, 15~20天以后生长速度减慢。最大红景天甙积累是在继代后的3~5天内。 外源8.27mg/L的BA与4.14mg/L的IBA的组合时,CCA悬浮培养的生长最好; 外源2,4-D抑制CCA悬浮培养的生长,但是对红景天甙积累的刺激作用最大。以MS基 本培养基的成分和含量为标准,总氮量不变、总糖量增至45g/L、pH值为5.7利于CCA 悬浮培养的生长,但抑制其红景天甙的积累;总氮量减少1/2、总糖量减少1/2、pH值为 4.2利于CCA悬浮培养细胞内红景天甙的积累,但抑制其生长。利于CCA悬浮培养生长 的培养条件为较低的温度(15℃)和较低的摇床转速(100rpm/min);但利于红景天甙 积累的培养条件则为24℃和较高的摇床转速(150rpm/min)。 在继代培养后的第15天进行200W/m~2的254nm的紫外线照射20min对提高红景 天甙产量效果最好;牛皮杜鹃根的水提液的诱导效率大于高山凤毛菊根的水提液。前体 甙元酪醇(tyrosol)、苯丙氨酸(Phe)、水杨酸(SA)、色氨酸(Trp)和酪氨酸(Tyr) 对提高CCA细胞内红景天甙含量的效果依次减小。 建议生产上可以采用“两步法”培养来提高红景天甙产量。首先在利于CCA悬浮 培养生长的培养基上培养15~20天左右,使生物量积累达到最大,此时进行紫外线诱导 处理,或添加约4mg/L的高浓度2,4-D,或更换到生产培养基中培养3~5天再收获红景 天甙。CCA悬浮培养的生长培养基为总氮含量与基本MS培养基的含量相同、总糖含量 为45g/L、pH值为5.7并附加5mg/L的BA和2.5mg/L的IBA的外源激素;相应培养 条件为15~20℃、正常光照、摇床转速100rpm/min。红景天甙的生产培养基为总氮含 量减少1/2、总糖含量为15g/L、pH值为4.2并附加4mg/L的2,4-D;相应培养条件为 24℃、正常光照、摇床转速150rpm/min。
【学位授予单位】:东北林业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:S567.239

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【引证文献】
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5 孙震晓;刘传召;郭善利;马清温;;植物愈伤组织超低温保存的实验研究[A];第七届全国系统与进化植物学青年学术研讨会论文摘要集[C];2002年
6 周安莲;余茂德;;桑子叶愈伤组织的诱导培养[A];中国蚕学会第三届青年学术研讨会暨浙江省第二届青年学术论坛——蚕桑分论坛论文集(上册)[C];2001年
7 许鸿源;蒙爱东;李春霞;邓锡青;杨美纯;周歧伟;黄春燕;许鸿章;;灵发素(LFS)对三七愈伤组织发生和增殖的影响[A];2003年广西植物生理学年会论文汇编[C];2003年
8 佘建明;张保龙;陈志一;倪万潮;;草坪型高羊茅成熟种子离体培养植株再生技术研究[A];全国作物细胞工程与分子技术育种学术研讨会论文集[C];2003年
9 许明淑;黄璐琦;;贯叶金丝桃愈伤组织的诱导研究[A];全国中药研究与开发学术研讨会论文摘要集[C];2001年
10 乔亚科;李桂兰;高书国;毕艳娟;;野生大豆愈伤组织与苗期耐盐力的相关性[A];中国青年农业科学学术年报[C];2002年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;俄罗斯培育出更耐涝小麦[N];新华每日电讯;2010年
2 唐山市丰南区林业局 汪林华 魏文娟 贾久正;这是杨树破腹病[N];河北科技报;2006年
3 濮阳市世锦现代农业发展有限公司 张晖 王绪月;花卉无性系的快速繁殖[N];中国花卉报;2006年
4 容城县农牧局 赵会芳 容城县八于乡农技服务站 沈山林;大棚西瓜嫁接育苗十注意[N];河北科技报;2007年
5 曹涤环 刘建武;影响苗木嫁接成活的因素[N];中国绿色时报;2008年
6 山东 吴建民 田俊华;硫磺在花木栽培上的妙用[N];中国花卉报;2005年
7 河南省三门峡市园林科学研究所 许冬丽 高秀云 李艳杰;春植树木夏亡原因及防范[N];中国花卉报;2010年
8 青县职教中心 刘恩祥;枣树蘸蜡插皮接效果好[N];河北科技报;2006年
9 山东 吴建民 田俊华;草木灰的应用[N];中国花卉报;2005年
10 正定县林业局 安建会;枣树开甲后不愈合的补救措施[N];河北科技报;2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 吴顺;籼稻成熟胚再生体系的建立及反义waxy基因转化籼稻的研究[D];湖南农业大学;2005年
2 伍碧华;小麦离体培养的营养器官与花器官发育研究[D];四川农业大学;2003年
3 钟原;紫斑牡丹分生结节的诱导与培养[D];北京林业大学;2011年
4 宋建英;邓恩桉微体快繁技术和耐寒性的研究[D];南京林业大学;2008年
5 何铁剑;菠萝组织与细胞培养及其诱导产酶研究[D];华南理工大学;1994年
6 朱向涛;凤丹体胚发生及愈伤组织诱导芽分化研究[D];中国林业科学研究院;2010年
7 陈超;红掌愈伤组织和再生团块的发育及四倍体诱导[D];南京农业大学;2011年
8 姚娜;竹子组织培养与毛竹愈伤组织分化中基因表达分析[D];中国林业科学研究院;2010年
9 秦磊;牡丹分生结节诱导、发生与发育及细胞组织学观察[D];北京林业大学;2012年
10 耿小丽;苜蓿单倍体、纯合四倍体的诱导及愈伤组织DNA含量变异的研究[D];甘肃农业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王惠珍;穗冠花愈伤组织的诱导和花色素苷积累的研究[D];华南师范大学;2002年
2 张清梅;中小型苹果再生体系的研究[D];内蒙古农业大学;2005年
3 高兵;不同培养条件对嘎拉苹果愈伤组织遗传变异的影响研究[D];南京农业大学;2005年
4 赵莉;不同营养条件对大苞景天愈伤组织诱导及植株再生的影响研究[D];四川农业大学;2005年
5 刘晓光;枣愈伤组织诱导和原生质体分离研究[D];河北农业大学;2006年
6 王辉;香榧的组织培养及快繁技术的研究[D];浙江大学;2006年
7 赵世萍;蝴蝶兰组织培养过程中特异蛋白表达差异的研究[D];东北师范大学;2006年
8 胡楠;魔芋浅层液体组织培养及多倍体诱导研究[D];西南大学;2011年
9 袁秀平;红王子锦带组培再生植株体系的研究[D];西北农林科技大学;2004年
10 宁强;枣愈伤组织的诱导及多倍体诱变研究[D];河北农业大学;2006年
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