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《东北林业大学》 2005年
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鹿卵母细胞体外培养与体外受精的超微结构研究

齐艳萍  
【摘要】:胚胎的体外生产是一个庞杂的技术体系,而卵母细胞体外培养是成功实施体外胚胎生产必不可少的关键性技术环节。目前国内外关于鹿胚胎生物工程的研究尚处在起步阶段,鹿卵母细胞超微结构的研究属该领域诸多研究空白之一。本研究以马鹿为试验材料,开展了鹿卵母细胞超微结构的研究。对母马鹿用FSH进行超排处理后,通过抽吸法和切割法采集卵巢卵母细胞,用M199为基础的培养液在38.5℃、5%CO_2和饱和湿度条件下对鹿卵母细胞进行体外培养与体外受精培养,利用光镜和透射电镜对体外成熟培养前、后及受精后的鹿卵母细胞及卵母细胞内细胞器的形态及超微结构进行研究。结果表明: 1.光镜下,马鹿卵母细胞成熟培养前直径大于培养后直径,分别为172.997±17.271μm与161.311±5.721μm。 2.电镜下,马鹿成熟培养前卵母细胞内线粒体长径为0.60±0.11μm,短径为0.49±0.12μm;培养后长径为0.77±0.13μm,短径为0.66±0.11μm;受精后长径为0.59±0.05μm,短径为0.46±0.05μm。脂滴在成熟培养前、后和受精后直径为1.55±0.08μm、1.02±0.46μm、1.27±+0.43μm。空泡成熟培养前长径为0.87±0.35μm,短径为0.65±0.30μm;培养后长径为1.30±0.45μm,短径为1.04±0.41μm;受精后长径为0.69±0.08μm,短径为0.60±0.09μm。 3.电镜下,成熟培养前卵丘紧紧包围鹿卵母细胞,卵母细胞表面的微绒毛细长,伸入透明带内,皮质区及细胞中心分布大量的细胞器。 4.成熟培养后的卵丘细胞与鹿卵母细胞结合松散,卵母细胞表面的微绒毛短粗,倒伏于卵表面,皮质颗粒在皮质区成层排列,细胞质中细胞器分布均匀。 5.受精后鹿卵母细胞表面的微绒毛由倒伏而竖起,第一极体无核,第二极体有核,卵母细胞质中细胞器丰富,主要分布于细胞中心。 6.细胞器的分布规律是随着鹿卵母细胞的成熟,高尔基复合体、线粒体、皮质颗粒等细胞器数量不断增加,并由细胞中心逐渐迁移到皮质区,最后散在分布于整个胞质中。 7.鹿卵母细胞内各种细胞器的体积随着卵母细胞的成熟发育而增大,在卵母细胞受精后体积又随之减小。 本研究获得的鹿卵母细胞体外成熟培养前、后及受精后的形态及超微结构的研究结
【学位授予单位】:东北林业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S825

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