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《东北林业大学》 2008年
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露地菊耐低温特性研究及遗传转化体系的构建

佟友丽  
【摘要】: 露地菊(Dendranthema×gandiflorum)是重要的园林绿化花卉之一,具有植株低矮,开花繁密,耐粗放管理等特性,有一定的社会经济价值。但是其盛花期通常处于深秋季节,往往因温度骤降导致观赏价值降低。通过遗传转化途径引入重要的抗逆基因,有望提高菊花抵御低温的能力。本研究以11个北方主要栽培露地菊品种(‘金不换'、‘矮红'、‘蜂窝粉'、‘雪涛'、‘秋艳'、‘粉玫瑰'、‘紫秋裳'、‘富丽'、‘金凤凰'、‘东林瑞雪'、‘袖珍红')和以这些品系为母本,在杂交子代中选育的16个综合性状优良的露地菊品系(‘东林1号'、‘东林2号'、‘东林3号'、‘东林4号'、‘东林5号'、‘东林6号'、‘东林7号'、‘东林9号'‘东林9号'、‘东林9号'、‘东林11号'‘东林12号'‘东林13号'、‘东林14号'、‘东林15号'、‘东林16号')为试材,在对这27个露地菊品种和品系耐低温能力筛选的基础上,选择其中耐寒能力较强的4个露地菊品系和品种,进行了以叶片为外植体直接诱导不定芽的研究。同时从拟南芥中克隆了AtproDH和P5CS基因,并应用Gateway克隆技术构建了植物表达载体,进行P5CS基因转化露地菊的研究。 主要研究结果如下: 1、露地菊抗冻品种和品系的筛选 利用受伤率和伤害指数两项指标对27个露地菊品系进行耐低温筛选,筛选出‘金不换'、‘雪涛'、‘富丽'、‘东林4号'、‘东林6号'、‘东林9号'、‘东林13号'等7个耐低温品系,同时发现‘粉玫瑰'、‘东林1号'、‘东林2号'三个品系的耐低温能力最差; 通过对不同自然低温处理时期,7个品系的电导率、丙二醛含量、脯氨酸含量、过氧化氢酶、果糖、葡萄糖和可溶性糖等指标的测定发现,‘雪涛'和‘东林4号'的耐低温能力要强于其它品系,尤其是‘东林4号'对低温的调节能力较强,在低温胁迫下,能够调节渗透途径减轻低温的伤害。 2、低温胁迫下,露地菊蛋白质表达谱分析 利用二维液相色谱技术,分离了‘东林4号'露地菊品系的低温处理和对照样品的总蛋白,通过ProteoVue软件分析发现:处理样品与对照相比共有蛋白差异点36个,其中显著增强表达的蛋白差异点有26个。选取10个差异色谱峰,经过蛋白质质谱鉴定了3个植物耐低温相关蛋白质,分别是:假定的钙离子运输ATP酶,铁氧还-硫氧还蛋白还原酶,假定的细胞色素C氧化酶。 3、抗冻基因的克隆及植物表达载体的构建 通过RT-PCR方法从拟南芥中克隆了P5CS和AtproDH的cDNA全长基因。利用Gateway克隆技术分别构建了AtproDH和P5CS两个基因的植物表达载体。 4、露地菊遗传转化体系的建立 建立‘东林4号'、‘东林6号'、‘东林9号'叶片外植体再生体系,发现不同基因型叶片外植体的分化率差异明显。‘东林9号'的叶片外植体分化率最高。‘东林13号'未获得以叶片为外植体的不定芽。‘东林4号'最适分化培养基为:MS+3 mg/L BA+0.1mg/L2,4-D,叶片分化率为10%;‘东林6号'最适分化培养基为:MS+2 mg/L BA+1 mg/LNAA,叶片分化率为82%;‘东林9号'最适分化培养基为:MS+0.5 mg/L BA+1.5 mg/LNAA,该品系植株上层幼嫩叶片分化率为95%,中下层叶片分化率均小于50%; 潮霉素对以叶片为外植体的分化起到很强的抑制作用,在潮霉素含量为5 mg/L的培养基中叶片即可失去分化能力。‘东林9号'品系组培再生芽在含有30 mg/L潮霉素的培养基中全部死亡。 通过农杆菌LBA4404介导,初步建立了P5CS基因转入露地菊的遗传转化体系,经过PCR鉴定得到了一个阳性株系。
【学位授予单位】:东北林业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:S682.11

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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 王江;以PMI基因为选择标记露地菊转PtDHAR基因体系的建立[D];东北林业大学;2010年
2 刘振华;津田芜菁花青素调控基因的克隆及转化菊花的研究[D];东北林业大学;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 傅玉兰,郑路;冬菊新品种选育[J];安徽农业大学学报;1994年01期
2 高亦珂,赵勃,丁国勋,张启翔;菊花茎叶外植体再生体系的研究[J];北京林业大学学报;2001年01期
3 吕晋慧,吴月亮,孙磊,高亦珂,张启翔;菊花叶片不定芽再生体系的研究[J];北京林业大学学报;2005年04期
4 梁慧敏,夏阳,王太明;植物抗寒冻、抗旱、耐盐基因工程研究进展[J];草业学报;2003年03期
5 王凭青,吴明生,王远亮,朱久进;植物抗寒基因工程研究最新进展[J];重庆大学学报(自然科学版);2003年07期
6 姚胜蕊,曾骧,简令成;桃花芽越冬过程中多糖积累和质壁分离动态与品种抗寒性的关系[J];果树科学;1991年01期
7 刘飞虎 ,熊丽;简述我国花卉育种现状[J];中国花卉园艺;2002年03期
8 蒋细旺,刘国锋,包满珠;菊花9个品种叶片和茎段快速高效再生体系的建立[J];华中农业大学学报;2003年02期
9 任永霞,季静,王萍,王罡;农杆菌介导类胡萝卜素合成酶基因LycB转化菊花的研究[J];吉林农业大学学报;2005年03期
10 徐建兴;细胞色素c在线粒体中的抗氧化功能[J];中国科学院院刊;2003年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 董晓霞,郭洪海,孔令安,赵树慧;杂交酸模耐盐性鉴定的生理指标筛选[J];山东农业科学;1999年06期
2 柳展基,于翠梅,张月杰,李晓燕,刘世强;不同盐浓度下水稻胚性愈伤组织生理生化指标分析[J];山东农业科学;2000年03期
3 梁超;张学英;杨秀凤;张秀田;王玮;;耐盐丰产小麦品种德抗961的耐盐生理机制[J];山东农业科学;2007年01期
4 陈奕吟;陈玉珍;;低温锻炼对胡杨愈伤组织抗寒性、可溶性蛋白、脯氨酸含量及抗氧化酶活性的影响[J];山东农业科学;2007年03期
5 刘文宝;李青;段友臣;侯涛;杨鹏;张文杰;朱振林;王芳;;S-诱抗素在花生抗旱栽培上的应用效果初报[J];山东农业科学;2007年05期
6 张晗;高永超;沙伟;郑琦;李汝玉;姚凤霞;许金芳;王东健;;低温胁迫下紫萼藓科植物保护酶活性的变化[J];山东农业科学;2009年02期
7 杜永丽;张卫华;曹齐卫;肖杰;韩欣;孙小镭;;砧木南瓜耐高温理化指标的初步筛选[J];山东农业科学;2009年03期
8 邱乾栋;吕晓贞;臧德奎;张雷;张立才;杜淑辉;;植物抗寒生理研究进展[J];山东农业科学;2009年08期
9 李利斌;李化银;刘国明;刘立锋;高建伟;;大白菜LEAFY新基因BrLFY1的生物信息学解析[J];山东农业科学;2009年10期
10 牛永强;高鹏;路来明;杨华;;草坪草的低温胁迫及抗寒性的研究进展[J];山东农业科学;2012年03期
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1 陈淑芳;周舟;;渗透胁迫对黄瓜幼苗膜脂过氧化和渗透调节物质含量的影响[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2 张蒙蒙;王永清;严娟;陶炼;;枇杷成花基因研究进展[A];第五届全国枇杷学术研讨会论文(摘要)集[C];2011年
3 陈栋;李靖;谢红江;孙淑霞;涂美艳;江国良;陈昆松;张波;;程序降温对枇杷果实贮藏生理指标的影响初探[A];第五届全国枇杷学术研讨会论文(摘要)集[C];2011年
4 孙霞;郑成淑;王秀峰;邢世岩;束怀瑞;;菊花花芽分化期叶片和茎尖转录组表达分析[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
5 任洪艳;孙霞;郑成淑;束怀瑞;;利用cDNA-AFLP技术筛选菊花开花相关基因[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
6 徐雁飞;陈素梅;陈发棣;滕年军;;2个自交结实小菊自交后代若干性状分离研究[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
7 王希;夏伯顺;王彩云;;菊花杂种一代的花色、瓣型及花型遗传特性的初步探讨[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
8 钱仁卷;刘洪见;林霞;黄建;张旭乐;;不同苗龄无柄小叶榕对低温胁迫的生理响应研究[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
9 胡昊;熊威;毛静;王彩云;;蚜虫高感大菊品种叶片离体再生体系的建立[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
10 孙文泰;张江红;赵明新;张玉星;;外源水杨酸对鸭梨呼吸链的影响[A];梨科研与生产进展(五)[C];2011年
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5 高轩;小麦抗冻蛋白基因的分离与遗传转化研究[D];华中科技大学;2010年
6 张妙霞;野生香蕉(Musa spp., AB group)抗寒相关基因的克隆与表达分析[D];福建农林大学;2010年
7 侯钰荣;伊犁绢蒿生理生态适应性的研究[D];新疆农业大学;2010年
8 何小勇;翅荚木种源遗传多样性及其抗低温胁迫能力研究[D];中南林业科技大学;2007年
9 郑维列;西藏色季拉山长鞭红景天种群生态学特性研究[D];中南林业科技大学;2010年
10 刘卫东;湖南假俭草遗传多样性、生理学特性及护坡性能研究[D];中南林业科技大学;2010年
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1 刘红梅;农杆菌介导百子莲抗寒基因CBF1高效转化体系的建立[D];华中农业大学;2010年
2 彭英;水稻脯氨酸累积相关基因多样性及与苗期耐盐性关系[D];华中农业大学;2010年
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5 陈卫卫;耐高温水稻资源高温诱导表达蛋白鉴定与分析[D];华中农业大学;2010年
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9 赵世杰;高温胁迫对转甜椒甘油-3-磷酸酰基转移酶基因烟草PSⅡ光化学活性的影响[D];山东农业大学;2009年
10 王长宪;利用基因工程创造香樟抗寒树种新种质技术研究[D];山东农业大学;2009年
【同被引文献】
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1 龚学臣,季静,王罡,抗艳红,任永霞;应用农杆菌介导法进行菊花的遗传转化[J];北方园艺;2005年02期
2 邓雪柯;殷建华;曹毅;;3种5’RACE技术的比较与优化[J];成都医学院学报;2007年01期
3 周思军,李希臣,刘昭军,刘丽艳,杨庆凯;大豆农杆菌介导转化系统的优化研究[J];东北农业大学学报;2001年04期
4 郑世英,陈吉美;植物的抗盐生理[J];德州高专学报;2000年04期
5 苏军,段榕琦,胡昌泉,王锋,李永平;小白菜再生和农杆菌介导转化体系的建立[J];福建农业学报;2002年04期
6 赵焕英;包金风;;实时荧光定量PCR技术的原理及其应用研究进展[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2007年04期
7 陈洁,林栖凤;植物耐盐生理及耐盐机理研究进展[J];海南大学学报(自然科学版);2003年02期
8 钱方;高志芳;滕木子;安利佳;;转基因作物的安全标记基因[J];河南农业科学;2007年07期
9 李东栋,石玮,邓秀新,伊华林;不同根癌农杆菌菌株对柑橘愈伤组织遗传转化效率的影响[J];华中农业大学学报;2002年04期
10 任永霞,季静,王萍,王罡;农杆菌介导类胡萝卜素合成酶基因LycB转化菊花的研究[J];吉林农业大学学报;2005年03期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 周波;UV-A特异诱导津田芜菁花青素合成基因表达调控的研究[D];东北林业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 徐海峰;以PMI基因为选择标记雪柑转基因体系的建立[D];福建农林大学;2007年
2 周涌;菊花再生体系的建立及根癌农杆菌介导DAD1基因转化体系的优化[D];湖南农业大学;2007年
3 张晓磊;星星草PtDHAR及PtFer基因的克隆与表达分析[D];东北林业大学;2008年
4 姜宁宁;根癌农杆菌介导的LEAFY同源基因DFL转化菊花的研究[D];北京林业大学;2009年
【二级引证文献】
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1 闵远琴;‘津田’芜菁UV-A诱导的泛素化相关基因BrUBC1和BrRUB1的克隆及表达分析[D];东北林业大学;2011年
【二级参考文献】
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1 王淑杰,王家民,李亚东,王春梅;可溶性全蛋白、可溶性糖含量与葡萄抗寒性关系的研究[J];北方园艺;1996年02期
2 高亦珂,赵勃,丁国勋,张启翔;菊花茎叶外植体再生体系的研究[J];北京林业大学学报;2001年01期
3 王艳青,陈雪梅,李悦,蒋湘宁,刘群录,李素艳;植物抗逆中的渗透调节物质及其转基因工程进展[J];北京林业大学学报;2001年04期
4 戴思兰,陈俊愉;菊属7个种的人工种间杂交试验[J];北京林业大学学报;1996年04期
5 姚洪军,罗晓芳,田砚亭;植物组织培养外植体褐变的研究进展[J];北京林业大学学报;1999年03期
6 王文奎,周春玲,戴思兰;毛华菊花朵形态变异[J];北京林业大学学报;1999年03期
7 李荣富,王丽雪,张华;果树抗寒性的细胞生物学研究进展[J];北京农学院学报;1996年02期
8 郭洪海,孔令安,董晓霞;盐胁迫下外源Se对杂交酸模耐盐性的影响[J];草业学报;2001年01期
9 夏丽华,郭继勋;磁处理种子对羊草生长及抗盐碱性的影响[J];草业学报;2001年01期
10 余玲,王彦荣,孙建华;环境胁迫对布顿大麦种子萌发及种苗生长发育的影响[J];草业学报;2002年02期
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3 唐俊;张富生;廖志华;;基于草甘膦筛选的菘蓝转化体系的建立[J];江西农业学报;2011年03期
4 杨小蕊;张明生;曹然;;发根农杆菌A4菌株诱导三分三毛状根的研究[J];山地农业生物学报;2011年02期
5 尚爱芹;陈颖;赵梁军;田颖川;;爬行卫矛再生体系建立及根癌农杆菌介导的遗传转化[J];农业生物技术学报;2008年01期
6 秦红霞;张海超;刘敬梅;宋玉霞;;Prd29A:PaDREB2植物表达载体的构建及转化新疆杨的研究[J];北方园艺;2010年13期
7 秦永华;张上隆;;影响根癌农杆菌介导的丰香草莓遗传转化因素分析[J];核农学报;2007年05期
8 梁超;王景雪;裴雁曦;杨婷;;根癌农杆菌介导的番茄高效遗传转化体系的研究[J];华北农学报;2009年02期
9 庄志扬;王汉宁;张金文;温睿婷;李永生;郑琪;;农杆菌介导玉米幼胚愈伤组织遗传转化体系的优化[J];甘肃农业大学学报;2010年06期
10 冯頔;张莉弘;魏毅;刘金亮;潘洪玉;张世宏;;苏云金芽孢杆菌cry1基因的克隆、植物表达载体的构建及转化大豆[J];中国农学通报;2011年07期
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1 王春台;;一个新的烟草糖基转移酶的初步研究[A];中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编(2004-2008)[C];2008年
2 田爱梅;曹家树;;白菜雄性不育相关基因BcMF15启动子的克隆、序列分析及植物表达载体的构建[A];中国园艺学会十届二次理事会暨学术研讨会论文摘要集[C];2007年
3 郝建江;刘望夷;谢伟军;黄骏麒;龚蓁蓁;;抗真菌蛋白(AFP)基因转化棉花和烟草的研究[A];植物分子育种——第四届全国植物分子育种学术研讨会论文集[C];2004年
4 林炳英;李梅;;乙肝表面抗原基因植物表达载体的构建[A];2006中国植物细胞发育与分子生物学学术研讨会论文集[C];2006年
5 陈红漫;祝令香;董志扬;;酿酒酵母海藻糖-6-磷酸合成酶基因克隆及植物表达载体的构建[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
6 高水平;范丙友;刘改秀;史国安;李嘉珏;孔祥生;;牡丹ACS反义基因植物表达载体的构建[A];中国观赏园艺研究进展(2010)[C];2010年
7 刘丽锋;张俊红;古勤生;李汉霞;叶志彪;;甜瓜高效遗传转化体系的研究[A];中国园艺学会2011年学术年会论文摘要集[C];2011年
8 周庆丰;曹永长;毕英佐;;传染性法氏囊病病毒VP2基因植物表达载体的构建[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2002年
9 罗齐军;朱昌叁;周鹏;曾富华;;Rs-AFP2基因植物表达载体的构建及其转化辣椒的研究[A];2005年全国植物逆境生理与分子生物学研讨会论文摘要汇编[C];2005年
10 胡根海;喻树迅;范述丽;宋美珍;王清连;付远志;;陆地棉叶绿体超氧化物歧化酶基因的克隆与植物表达载体的构建[A];中国棉花学会2007年年会论文汇编[C];2007年
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1 本报记者  朱伟光 特约记者 朱伟华;追求高教发展的新高度[N];光明日报;2006年
2 校园记者 刘晓娜;爱在日常间 随处做环保[N];黑龙江经济报;2010年
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10 王馨恬;大陆交换生在台湾[N];人民日报海外版;2010年
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1 佟友丽;露地菊耐低温特性研究及遗传转化体系的构建[D];东北林业大学;2008年
2 吴建慧;碱茅(Puccinellia tenuifolra)超氧化物歧化酶基因功能解析及对杨树(Populus×euramericana 'Guariento')遗传转化研究[D];东北林业大学;2008年
3 范爱丽;大白菜细胞质雄性不育基因orf224和orf138表达载体构建及遗传转化[D];西北农林科技大学;2009年
4 宋春丽;草莓乙烯受体FaEtr2基因RNAi植物表达载体构建及遗传转化研究[D];河北农业大学;2009年
5 姚庆荣;木薯遗传转化体系的建立与优化及转AGPase基因的研究[D];华南热带农业大学;2007年
6 杨晓红;BADH基因、反义4CL基因对二色胡枝子的遗传转化研究[D];北京林业大学;2009年
7 张国裕;甘蓝显性细胞核雄性不育相关基因及其启动子序列的克隆与功能分析[D];西北农林科技大学;2006年
8 王冬梅;毛白杨花芽分化规律与开花调控的分子基础研究[D];北京林业大学;2007年
9 赵飞;小菊锌指蛋白基因的表达分析及耐盐差异蛋白的分离鉴定[D];东北林业大学;2007年
10 孙亚卿;核糖体失活蛋白(RIPs)基因的克隆及其对甜菜遗传转化的研究[D];内蒙古农业大学;2007年
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1 赵楠;锌指蛋白基因的克隆及遗传转化的研究[D];东北林业大学;2009年
2 王智博;构建反义双价TuMV-Nib和LFY基因植物表达载体转春大白菜研究[D];吉林农业大学;2008年
3 张栋;DHAR基因植物表达载体的构建及转化仙客来研究[D];西北农林科技大学;2008年
4 於维维;番茄中BR相关基因的遗传转化研究[D];浙江大学;2005年
5 刘秀根;番茄果实SPS反义表达载体的构建及遗传转化的研究[D];福建农林大学;2008年
6 吴英;芦荟遗传转化体系的建立及人胰岛素样生长因子I转化芦荟的初步研究[D];华南热带农业大学;2005年
7 黄海波;海南黄灯笼辣椒遗传转化体系建立及CMVcp基因的转化[D];华南热带农业大学;2006年
8 侯杰;露地菊品种组培体系的建立及转F3'H基因的研究[D];东北林业大学;2012年
9 肖艳华;特种经济植物天绿香和驱蚊香草遗传转化体系的建立及转昆虫抗冻蛋白基因的研究[D];新疆大学;2008年
10 孙靖棣;农杆菌介导龙胆花色素苷5-O-葡糖基转移酶基因的番茄遗传转化体系的建立及优化[D];吉林师范大学;2012年
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