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《东北林业大学》 2008年
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迷迭香抗氧化剂的高效分离与抗氧化活性研究

张莹  
【摘要】: 为了解决目前迷迭香抗氧化剂生产企业产品纯度低、得率低的难题,研究了迷迭香抗氧化剂——鼠尾草酸和迷迭香酸的高效分离纯化工艺;同时,由于迷迭香抗氧化剂因制备方法不同而有着不尽相同的抗氧化活性,本文对制备的三种不同纯度鼠尾草酸的抗氧化能力进行了测试,并研究了鼠尾草酸对葵花籽油的氧化稳定性的影响,通过与人工合成抗氧化剂比较,从而考查其作为食品添加剂的抗氧化效果;此外,本文还对迷迭香酸进行了体外抗氧化能力测试,并通过迷迭香酸对小鼠体内抗氧化活性和对小鼠肝、肾组织超微结构影响的研究,考查其作为功能食品补充剂的抗氧化效果,具体研究结果如下: 1、创建了迷迭香抗氧化剂——鼠尾草酸(CA)的高效分离纯化工艺。首次采用pn值控制匀浆技术从迷迭香枝叶中提取CA,研究了提取过程中不同工艺参数对提取效果的影响,获得了优化的提取工艺,优化条件下粗提物中的CA纯度为24.9%(CA25),回收率达93.9%。CA25经酸碱交替法纯化,优化条件下获得的CA纯度可以达到60.5%(CA60),回收率达80.5%。CA60再经中压柱层析进一步纯化,优化条件下CA的纯度可以高达98.3%(CA98),回收率达62.2%。 2、研究了CA的抗氧化能力。首次对不同纯度CA的抗氧化能力进行了比较,得出CA的还原能力、清除DPPH·和ABTS·~+能力均与其纯度呈正相关。其中,CA98的还原能力强于合成抗氧化剂TBHQ、BHA和BHT;总体上CA对DPPH自由基的清除能力稍弱于TBHQ,但较BHA和BHT强;研究发现CA对ABTS·~+的清除能力较差,均低于合成抗氧化剂TBHQ、BHA和BHT;在FRAP测试体系中,CA与人工合成抗氧化剂的还原活性顺序为TBHQ>BHA>CA98>CA60>BHT>CA25,说明CA具有较强的还原活性。 3、考查了CA作为食品添加剂对葵花籽油的抗氧化效果,将CA应用到葵花籽油当中,通过定期取样检测油脂初级氧化产物和次级氧化产物指标(过氧化值、硫代巴比妥酸值、p-茴香胺值及游离脂肪酸含量),对比研究了不同纯度的CA与合成抗氧化剂在加速氧化条件下(60℃)对葵花籽油氧化稳定性的影响。研究结果表明,随着CA纯度的增加,CA对葵花籽油的抗氧化能力增强,其抗氧化能力强于或相当于BHA、BHT的活性,但不如TBHQ的抗氧化活性。 4、创建了迷迭香抗氧化剂——迷迭香酸(RA)的高效分离纯化工艺。首次采用中压硅胶柱层析法分离RA,采用乙酸甲酯单一溶剂作为洗脱液,研究了纯化过程中不同工艺参数对纯化效果的影响,获得了优化的纯化工艺条件:1200mm×80mm不锈钢中压层析柱装填160~280目层析硅胶,洗脱流速为30mL/min,负载量为35g/kg,此优化的工艺条件下可以获得纯度高达98.1%的迷迭香酸产品,回收率达90.5%。与传统方法相比具有以下优点:溶剂用量少、单一的洗脱液可回收利用、层析填料价格低廉,除杂快速、方便、生产周期短、分离效果好,易于实现连续工业化清洁生产。 5、研究了RA的抗氧化能力。RA对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH·以及ABTS·~+均具有明显的清除作用和量效关系,对四种自由基的清除效果分别为:清除羟自由基的SC50值达到0.634μg/mL;清除超氧阴离子自由基和DPPH·的SC50值分别为0.1073mg/mL和0.1371mg/mL;清除ABTS·~+的能力9644,与VC和VE相比,相同条件下,RA的抗氧化能力具有明显的优势。 6、考查了RA作为功能食品补充剂的抗氧化效果。通过检测空白对照组与灌胃给药组小鼠体内的抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px的活性及脂质过氧化物MDA的含量来考查RA对小鼠的体内抗氧化活性。结果显示,高剂量RA可显著提高血清、肝及肾组织的SOD和CAT活力;高剂量RA可使肾组织GSH-Px酶的活力明显升高,但肝组织中的GSH-Px酶的活力却没有明显的变化(p>0.05);高剂量RA还可以降低血清、肝及肾组织MDA含量,证实了RA具有提高小鼠体内的抗氧化酶活性,同时降低小鼠体内脂质过氧化物含量的作用。 7、研究了RA对小鼠肝和肾组织超微结构的影响。通过TEM(透视电镜)观察小鼠肝、肾组织切片,发现RA可以减少小鼠肝组织中脂滴的数量,并仅会使小鼠肾小管微绒毛发生轻度融合,说明RA可以明显促进小鼠肝脏脂肪的代谢过程,并不会对小鼠的肾脏造成伤害。
【学位授予单位】:东北林业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:TQ914.1

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【引证文献】
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 翟婷;迷迭香中迷迭香酸的提取及提取物活性测定的研究[D];广西大学;2008年
2 苗春晖;由海绵Spongosorites sp提取出bromotopsentin的抗氧化活性的研究[D];沈阳药科大学;2008年
3 刘长姣;红景天总黄酮超高压提取工艺及其粗提物生物活性的研究[D];吉林大学;2007年
4 贾薇;大米肽体外抗氧化活性及应用研究[D];东北农业大学;2008年
5 张晓璞;虎杖根茎和桂花果肉的抗氧化活性初探[D];广西师范大学;2008年
6 吉宁;茶多酚毒理学安全性及抗氧化作用评价[D];中国疾病预防控制中心;2008年
7 宋振;蛹虫草胞内硒多糖提取及其抗氧化活性研究[D];山东农业大学;2009年
8 张志英;山茶油抗氧化防辐射活性成分及其机理的研究[D];浙江大学;2006年
9 朱晓丽;油菜蜂花粉中活性肽的制备及其抗氧化性的研究[D];中国农业科学院;2007年
10 邵建萍;冷藏苹果蜡质中酚类物质及抗氧化活性的研究[D];山东农业大学;2008年
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