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《黑龙江中医药大学》 2010年
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儿黄散治疗CIN临床观察及其诱导宫颈癌Hela细胞凋亡机制实验研究

陈海丽  
【摘要】: 目的:观察儿黄散治疗CIN临床疗效,为临床治疗宫颈上皮内瘤变提供简便,有效的治疗方法,为进一步探讨儿黄散作用机制,以宫颈癌hela细胞为研究对象,观察儿黄散诱导hela细胞凋亡的分子机制,为临床用治疗CIN及宫颈癌提供可靠依据,探讨宫颈上皮内瘤变发病趋势。 方法:临床研究:(1)分析60例宫颈上皮内瘤变患者发病年龄与其相关的病史,探讨其发病趋势;(2)儿黄散外敷法治疗宫颈上皮内瘤变,分析病变治疗前后组织病理学变化。实验研究:(1)HE染色法检测Hela细胞形态学改变;(2)透射电镜检测Hela细胞超微结构改变;(3)免疫组化法检测bcl-2基因蛋白表达;(4)RT-PCR法检测survinin的mRNA表达;(5)流式细胞术检测Hela细胞凋亡率。 结果:临床研究:(1)60例CIN患者发病年龄在20岁~62岁之间,平均发病年龄38.9±8.00岁(;2)CIN确诊时间距月经初潮时间多在20~30年,平均为24.0年;(3)CIN确诊时间与妊娠次数,最多妊娠4次,妊娠1-2次占77%;(4)CIN经儿黄散3个疗程治疗后,通过分析病理变化,治疗组与对照组的有效率分别为:90.0%、66.7%,根据X2检验分析,按α=0.05为水准,P0.01,具有明显统计学意义,表明治疗组与对照组具有明显的差异。 实验研究:(1)光镜下可见细胞密度降低,细胞形态发生改变:细胞膜完整,细胞核固缩,见细胞核碎裂,呈大小不等、数量不等的小球形、半月形,核仁消失,核染色呈紫或浅褐色;(2)电镜下可见细胞表面微绒毛减少,细胞核体积减小,脂滴明显增多,线粒体膜性结构破损、模糊不清;(3)不同浓度儿黄散不同时间作用于Hela细胞,hela细胞内Bcl-2蛋白表达下降(P0.05);(4)2.5mg/ml儿黄散作用Hela,随时间延长凋亡率呈现增高的趋势;(5)儿黄散可下调Hela细胞中survinin的mRNA的表达。 结论:(1)儿黄散具有减轻宫颈局部炎性反映、提高宫颈局部免疫功能;(2)儿黄散可治疗宫颈上皮内瘤变,有效阻止宫颈癌的发病;(3)儿黄散可诱导hela细胞凋亡,在形态学上有明显的改变(4)儿黄散对hela细胞具有抑制其生长并诱导其凋亡的作用,具有时间和浓度的依赖性;(5)儿黄散诱导hela细胞凋亡,其分子机制可能与下调Bcl-2蛋白表达有关及survinin的mRNA表达有关;(6)宫颈上皮内瘤变可能具有发病年龄早的趋势。
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