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《黑龙江中医药大学》 2014年
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经痛愈舒对子宫内膜异位症大鼠NF-κB表达的防治作用

杜娟  
【摘要】:目的: 1采用自体移植法建立子宫内膜异位症(EMs)大鼠模型并动态观察其异位内膜病理学改变,确定经痛愈舒预防及治疗EMs的给药时间。 2观察经痛愈舒治疗性用药对EMs大鼠异位内膜组织病理学改变的影响,及其对NF-KB蛋白、RNA表达的干预效果,探讨经痛愈舒治疗EMs的可能机制,并为其临床应用提供实验依据。 3通过比较研究经痛愈舒预防性与治疗性用药干预EMs大鼠病理学表现及NF-KB蛋白、RNA表达的效果,探讨经痛愈舒预防性用药对EMs的影响及潜在作用机制。 方法: 1实验第一部分选用20只雌性未孕SD大鼠,随机分为5组;模型3天组、模型5天组、模型4周组、模型6周组及模型8周组,每组4只。均采用自体移植法建立EMs模型,各组分别于造模后第3天、第5天、第4周、第6周及第8周处死,苏木素伊红(HE)染色法观察异位内膜组织病理形态改变,并与正常SD大鼠子宫内膜对照 2实验第二部分选用造模成功的EMs大鼠72只,随机分为模型4周组、模型8周组,经痛愈舒低、中、高剂量组及西药组,每组12只,另取12只雌性未孕SD大鼠作为正常对照。各组大鼠分别予生理盐水或对应药物灌胃。其中模型4周组于造模4周后处死,其他各组均于造模后8周处死。HE染色观察各组大鼠异位内膜病理形态改变,免疫组.化法观察异位内膜NF-KB表达,Western blot法、RT-PCR法观察异位内膜NF-κB蛋白及RNA表达。 3实验第三部分选用36只EMs模型大鼠,随机分为模型组、经痛愈舒预防性用药组及经痛愈舒治疗性用药组,每组12只,另取12只雌性未孕SD大鼠作为正常对照。经痛愈舒预防性用药组于造模后5天给药,治疗性用药组于造模后5天予生理盐水,至造模后4周后再予经痛愈舒中药。各组大鼠均于造模后8周处死。HE染色观察各组大鼠异位内膜病理形态改变变化,免疫组化法、Westernblot法、RT-PCR法观察NF-κB表达。 结果: 1实验第一部分自体移植EMs大鼠模型造模成功率约70%。HE染色结果显示:与正常对照组比较,造模后3天异位内膜仅有少量炎性细胞侵润。造模后5天异位内膜间质结构松散、血供较差,尚未形成典型的内膜组织结构。造模后4周可观察到典型异位内膜组织形成。造模后6周及8周异位内膜病理表现与4周相似。 2实验第二部分异位内膜HE染色可见:经痛愈舒高剂量组及西药组内膜上皮细胞柱状增生,内膜间质松散,较多腺体萎缩,血供明显变差。 3免疫组化结果显示:模型4周组、8周组、经痛愈舒各组及西药组NF-κB表达明显高于正常对照组;经痛愈舒各组及西药组NF-κB表达明显低于模型8周组,且经痛愈舒高剂量组效果优于西药组。 4Western blot结果显示:模型4周组、8周组、经痛愈舒各组及西药组NF-κB蛋白表达明显高于正常对照组;经痛愈舒各组及西药组NF-κB蛋白表达明显低于模型8周组,且经痛愈舒中、高剂量组效果优于西药组。 5RT-PCR结果显示:模型4周组、模型8周组、经痛愈舒各组及西药组NF-κB RNA含量明显高于正常对照组;经痛愈舒各组及西药组NF-κB蛋白表达明显低于模型8周组,其中经痛愈舒中、高剂量组效果优于西药组。 6实验第三部分HE染色结果显示:经痛愈舒预防性及治疗性用药组内膜上皮萎缩变薄,间质细胞数量减少,异位内膜组织出现萎缩退变,其中预防性用药组改变更明显。 7免疫组化结果显示:模型组、经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达明显高于正常对照组;经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达明显低于模型组,但经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达未见明显差异。8Western blot结果显示:模型组、经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达明显高于正常对照组;经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达明显明显低于模型组,但经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达未见明显差异。 9RT-PCR结果显示:模型组、经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达明显高于正常对照组;经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达明显明显低于模型组,但经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达未见明显差异。 结论: 1通过自体移植法可成功建立EMs大鼠模型,造模后5天可作为预防性用药干预时间点,造模后4周可作为治疗性用药干预时间点。 2经痛愈舒治疗性用药可在一定程度上促使EMs大鼠异位内膜组织萎缩退变,并抑制其NF-κB蛋白及RNA表达。 3经痛愈舒预防性用药亦可在一定程度上促进EMs大鼠异位内膜组织萎缩,并抑制其NF-κB表达,但与治疗性用药比较无明显差异。
【学位授予单位】:黑龙江中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R285.5

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【参考文献】
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