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《黑龙江中医药大学》 2014年
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虫草益肾颗粒对C-BSA肾病大鼠肾组织GRα及P-gp170影响的研究

李慧  
【摘要】:目的:观察虫草益肾颗粒对C-BSA所致膜性肾病大鼠肾脏的保护作用,并探讨该方增加激素敏感性的机制。 方法:实验一:将72只雄性SD大鼠,除12只作为空白对照外,其余60只采用多次尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)的方法进行造模,最后一次尾静脉注射后,收集造模大鼠24h尿液,根据24hUPQ分为模型组、西药对照组、虫草益肾颗粒低、中、高剂量组,每组12只。造模结束后开始灌胃给药,虫草益肾颗粒低、中、高剂量组分别给予中药溶液3.24g/kg/d,6.48g/kg/d,12.96g/kg/d(含颗粒量),西药组给予环孢素A(31.5mg/kg/d)联合醋酸泼尼松混悬液(0.945mg/kg/d)。空白组及模型组给予等体积生理盐水。连续灌胃4周。观察大鼠一般状态、测定24h尿蛋白定量(24hUPQ);治疗结束麻醉状态下采血检测各组大鼠血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)等生化指标;光镜及电镜观察肾脏组织病理改变。Real Time PCR方法检测各组肾组织中糖皮质激素受体a(GRa)mRNA、多药耐药基因(MDR1)mRNA的表达情况;免疫组化法检测各组肾组织中GRα、MDR1基因表达产物P糖蛋白170(P-gp170)的表达情况。实验二:48只雄性SD大鼠,分为空白组、单纯模型组、激素干预后模型组(简称激素组)、激素干预后中药治疗组(简称激素加中药组),每组12只。其中单纯模型组同实验一方法造模,激素干预后模型组是在单纯模型基础上给予醋酸泼尼松混悬液(6.3mg/kg/d)灌胃,制备经激素干预后的C-BSA肾病大鼠模型。激素加中药组给予虫草益肾颗粒中剂量(6.48g/kg/d)溶液灌胃,其余三组给予等体积生理盐水,连续给药4周。观察大鼠一般状态,24hU PQ,给药结束后麻醉状态下采血检测各组大鼠血清TP.ALB.TG.C HO L等生化指标,光镜及电镜观察肾脏组织病理改变;Real Time PCR方法检测各组肾组织中GRamRNA、MDR1mRNA的表达情况;免疫组化法及Western Blot法检测各组肾组织中GRα、P-gp170的表达情况 结果:(1)模型组大鼠皮毛松散,无光泽,活动少、精神萎靡,足趾皮肤松弛处可观察到水肿,摄食量少,皮毛脱落。虫草益肾颗粒各剂量治疗组大鼠状态明显改善,活动增多、摄食量增加,水肿消退。西药组大鼠水肿消退,但状态不及中药治疗组,且出现死亡。 (2)虫草益肾颗粒各剂量治疗组大鼠的24hUPQ低于模型组(P0.01);血清ALB、TP水平高于模型组(P0.01);TG.CHOL水平低于模型组(P0.01)。 (3)激素加中药组大鼠的24hUPQ低于单纯模型组及激素组(P0.01);血清ALB、TP水平高于单纯模型组及激素组(P0.01);TG、CHOL水平低于单纯模型组及激素组(P0.01)。 (4)Real Time PCR及免疫组化结果显示,单纯模型组大鼠肾组织中GRα及P-gp170的表达在基因与转录水平上均与空白组无明显差异(P0.05)。 (5)Real Time PCR.免疫组化及Western Blot结果显示,与空白组相比,激素组大鼠肾组织中GRamRNA以及GRa的表达减少(P0.01),MDR1mRNA及P-gp170的表达升高(P0.01)。 (6)Real Time PCR.免疫组化及Western Blot结果显示,与激素组相比,激素加中药组肾组织中GRαmRNA以及GRα表达上调(P0.01)而MDR1mRNA及P-gp170表达降低(P0.01)。 结论:(1)虫草益肾颗粒可改善C-BSA肾病大鼠的一般状态,该方面的作用优于西药组。 (2)虫草益肾颗粒可减少C-BSA肾病大鼠蛋白尿,改善低蛋白血症、调节脂质代谢紊乱,并可减轻C-BSA肾病大鼠肾脏病理改变,保护肾小球。 (3)虫草益肾颗粒协同激素治疗C-BSA肾病大鼠起效快,效果显著,较单纯应用激素治疗效果明显,缩短病程。 (4)单纯的C-BSA肾病大鼠模型肾组织中可能不存在GRα及P-gp170表达的改变。 (5)糖皮质激素可能会减少C-BSA肾病大鼠肾组织中GRa的表达,上调P-gp170的表达。 (6)虫草益肾颗粒可增加激素敏感性,其机制可能与上调肾组织中GRα、下调P-gp170的表达有关
【学位授予单位】:黑龙江中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R285.5;R277.5

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【参考文献】
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