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GC-MS法对石菖蒲挥发油的质量分析及β-细辛醚、α-细辛醚的药动学研究

李晶  
【摘要】:石菖蒲(Acori tatarinowii rhizoma)为芳香开窍药,为天南星(Araceae)菖蒲属(Acorus L.)植物石菖蒲(Acorus tatarinowii Schott)的干燥根茎。近代药理研究表明石菖蒲的挥发油组分可作用于中枢神经系统,表现为镇静催眠、抗惊厥、抗癫痫、保护神经细胞、益智等。本论文以石菖蒲挥发油为研究对象,考察了石菖蒲挥发油的提取方法,对其化学成分进行GC-MS分析,对主要成分β-细辛醚、α-细辛醚和甲基丁香酚三种苯丙素类化合物同时测定其含量,研究p-细辛醚和a-细辛醚在大鼠体内的药物动力学过程。 本试验首先采用水蒸气蒸馏法提取石菖蒲挥发油,选取药材的浸泡时间、料液比、提取时间三个因素,运用单因素法对提取工艺进行优化,以挥发油的得率为标准,最终确定提取条件为:以料液比1:9(w/v)的蒸馏水浸泡药材2h,提取5h,为最佳提取工艺。 采用GC-MS法分析了浙江、四川、江西、江苏四个产地的石菖蒲挥发油成分,共定性61个化学成分,四个产地共有成分为21个,不同产地挥发油的组成成分和含量存在一定的差异。采用峰面积归一化法对各个检出成分的相对含量进行分析,四川产地药材中挥发油的含量、β-细辛醚和α-细辛醚的相对含量最高,江西产地最低。 运用GC-MS建立石菖蒲挥发油中β-细辛醚、α-细辛醚和甲基丁香酚的含量测定方法。试验结果表明,β-细辛醚、α-细辛醚和甲基丁香酚在考察浓度范围内线性关系良好(R≥0.9996),方法灵敏度高。三个化合物精密度、稳定性、重现性的RSD值均≤2.0%,加样回收率分别为103.7%、102.7%、99.40%。 采用GC-MS联用技术测定大鼠灌胃给予挥发油后,p-细辛醚和α-细辛醚在大鼠血浆及脑组织中的含量,并研究其在体内的药动学行为。选用α-萘酚为内标化合物,乙腈-甲醇(9:1,V/V)溶剂沉淀蛋白法处理样品,利用梯形面积法等计算药动学参数。大鼠血浆中主要药物学参数为:p-细辛醚Tmax、Cmax、t1/2.AUC(0-t)分别为1.58±0.34h、2605.7±536.6μg·L-1、2.04±0.14h、12499.2±1314.4gg.h.L-1:α-细辛醚Tmax、Cmax、t1/2、AUC(o-t)分别为1.58±0.61h、264.8±29.1μg·L-1、2.92±0.66h、1399.5±191.1μg·h·L-1。β-细辛醚和α-细辛醚的达峰时间相近,在体内的吸收、分布、消除行为相似,这与二者是同分异构体,结构相近有关。脑组织中主要药物学参数为:β-细辛醚Tmax、Cmax、tl/2、AUC(o-t)分别为0.7±0.27h、3160.8±577.1ng·g-1、1.39±0.11h、6702.2±860.1ng·h·g-1;α-细辛醚Tmax、Cmax、t1/2.AUC(0-t)分别为0.7±0.27h、639.9±109.8ng·g-1、0.94±0.38h.979.3±165.6ng·h·g-1。给药后5min即可在脑中检到β-细辛醚和α-细辛醚,说明二者易通过血脑屏障,二者作为挥发油中的主要成分,表明石菖蒲作为典型的芳香开窍药用于中枢神经系统疾病的治疗是有其科学依据的。 本论文的研究结果表明,石菖蒲挥发油的提取工艺简单、可行;GC-MS法建立的挥发油成分分析,及p-细辛醚、α-细辛醚和甲基丁香酚三个主要成分含量测定方法准确度高、重现性好,为石菖蒲药材的质量控制提供了更为全面、科学的评价方法;β-细辛醚、α-细辛醚的药物动力学研究为石菖蒲治疗中枢神经系统疾病提供了科学基础。


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