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《黑龙江中医药大学》 2015年
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电针神庭、百会对脑缺血再灌注大鼠认知功能障碍的机制研究

张蕴  
【摘要】:目的:探讨电针神庭、百会对脑缺血再灌注大鼠认知功能的影响及其作用机制,以期更好地为电针神庭、百会治疗脑卒中后认知功能障碍提供客观的理论依据。方法:用随机数字表法,将1 20只大鼠随机分为3组,即假手术组、模型组、模型+电针组,每组各40只,待模型建立完毕后24h开始进行电针神庭和百会,每天1次,共7天,每天电针后进行神经行为学评分,然后利用Morris水迷宫和跳台实验评估各组大鼠的学习记忆能力,取各组大鼠脑组织进行TTC染色以测量脑梗死体积,尼氏染色及透射电镜扫描观察神经元的形态及超微结构,酶联免疫法检测海马CA1 区谷氨酸(Glu)的含量,Western Blot检测海马CA1区谷氨酸受体NR1、NR2A和NR2B的蛋白表达及Real-Time测定这些受体的mRNA表达,激光共聚焦扫描检测海马CA1区钙离子的荧光强度。结果:1行为学实验结果:①在电针的第1、2天,模型+电针组大鼠的神经行为学评分与模型组比较变化不大,从电针第3天开始,模型+电针组的神经行为学的评分有所降低,且与模型组比较差异具有统计学意义(P0.05)。②水迷宫(MWM)实验结果发现,模型、模型+电针组大鼠的逃避潜伏期及游泳路程比假手术组均显著延长(P0.05),从测试的第3天开始,模型+电针组大鼠的逃避潜伏期及游泳路程比模型组大鼠明显地缩短了(P0.05)。空间探索实验发现,模型组大鼠穿越平台的次数比假手术组明显减少(P0.05),模型+电针组大鼠穿越平台的次数比模型组明显增多(P0.05)。③跳台实验结果显示:模型组大鼠与假手术组比较,其遭受电击的次数增多,保持在平台安全区的时间缩短,差异具有统计学意义(P0.05);模型+电针组与模型组比较,遭受的电击次数减少,保持在平台安全区的时间延长,二者有显著性差异(P0.05)。2脑梗死体积、神经元形态及超微结构检测结果:①TTC染色检测脑梗死体积显示:模型+电针组大鼠脑梗死体积明显小于模型组,具有统计学意义(P0.05)。②在尼氏染色的实验中,假手术组神经元细胞排列有序,形态规则密集,模型组神经元细胞排列稀疏,尼氏体的阳性细胞数明显少于假手术组(P0.05),模型+电针组神经元细胞的形态比较完整,尼氏体的阳性细胞数比模型组明显增多(P0.05)。③透射电镜扫描结果显示:假手术组的神经元细胞的包膜完整,染色质是均匀的,粗面内质网丰富,线粒体结构完整;模型组的神经元细胞的形态不规则,结构紊乱,包膜受到严重的破坏,核仁消失,染色质凝集成块状或溶解,线粒体消失,粗面内质网脱颗粒也非常明显;模型+电针组神经元细胞的包膜基本完整,染色质相对较均匀,线粒体无明显肿胀。3大鼠海马CA1区谷氨酸(Glu)的含量模型组大鼠谷氨酸的含量明显高于假手术组,差异具有统计学意义(P0.05);模型+电针组与模型组相比,谷氨酸的含量明显减少(P0.05);模型+电针组与假手术组比较,谷氨酸的含量增加(P0.05)。4海马CA1区NR1、NR2A、NR2B蛋白及mRNA的表达模型组与假手术组比较,NR1、NR2B的蛋白表达明显增加、NR2A的蛋白表达则下调,差异具有统计学意义(P0.05);模型+电针组与模型组比较,NR1、NR2B的蛋白表达有所减少,NR2A的蛋白表达增加,具有显著性差异(P0.05);模型+电针组与假手术组比较,NR1、NR2B的蛋白表达上调(P0.05),NR2A的蛋白表达则下调(P).05)。各组 NR1、NR2A、NR2B 的 mRNA 表达水平与 Western Blot的实验结果呈现相同的趋势,二者得到了相互印证。5海马CA1区钙离子的荧光强度利用激光共聚焦对各组大鼠海马CA1区进行扫描,蓝色荧光代表细胞核(ch1-T1),绿色荧光代表钙离子((ch2-T2),ch2-T2/ch1-T1代表钙离子荧光强度,结果显示:与假手术组相比,模型组和模型+电针组的钙离子的荧光强度都有所增加(P0.05),与模型组相比,模型+电针组钙离子荧光强度在电针的刺激下明显的降低(P0.05)。结论:1电针神庭、百会可以改善脑缺血再灌注大鼠的神经功能缺损。2电针神庭、百会可以改善脑缺血再灌注大鼠的空间及被动学习记忆能力。3电针神庭、百会能减少脑缺血再灌注大鼠脑梗死的体积,保护神经元细胞。4电针神庭、百会能抑制脑缺血再灌注大鼠谷氨酸(Glu)的过度释放,调节NMDAR受体的表达,减少Ca2 +超载。
【学位授予单位】:黑龙江中医药大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R245

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【参考文献】
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