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《黑龙江中医药大学》 2017年
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尖叶假龙胆对佐剂型关节炎模型大鼠的研究

邹德龙  
【摘要】:目的:以尖叶假龙胆为研究对象,通过尖叶假龙胆对佐剂型关节炎模型大鼠的药效学实验。方法:以佐剂性关节炎模型大鼠,将SD大鼠随机分为模型组、空白组、阳性组(雷公藤多苷)、尖叶假龙胆高剂量组、尖叶假龙胆中剂量组、尖叶假龙胆低剂量组,每组8只。除空白组外在其余大鼠右后足足跖皮下注射弗氏完全佐剂(CFA)0.1ml致炎,复制模拟AA模型,空白组用生理盐水同法注射。从第14天开始灌胃,连续灌胃18天。定期测量大鼠体重,右足足趾肿胀度,踝关节和脾脏病理HE,ELISA法检测大鼠血清中的TNF-α、IL-10含量,免疫组化法检测滑膜组织里的VEGF、ICAM-1、MMP-3蛋白表达。结果:1尖叶假龙胆各剂量组可以增加AA大鼠的体重、减少AA大鼠足趾的肿胀、降低AA大鼠关节炎评分、降低AA大鼠脾脏白髓的生成。2.尖叶假龙胆各剂量组可以通过降低AA大鼠血清中的TNF-α的含量及提升血清IL-10的含量,以达到缓解佐剂性关节炎的作用。(P0.05)3.尖叶假龙胆各剂量组可以降低AA大鼠滑膜组织VEGF、ICAM-1、MMP3蛋白表达,从而达到缓解滑膜炎症、减轻关节肿胀、延缓关节骨破坏的目的。其中高剂量组效果最明显。(P0.05,P0.01)结论:尖叶假龙胆能有效的抑制继发性关节肿胀,可显著降低AA大鼠血清中的TNF-α的含量及提升血清IL-10的含量,对滑膜组织ICAM-1、VEGF、MMP3蛋白表达调控作用达到缓解滑膜炎症、减轻关节肿胀、延缓关节骨破坏的病理基础。综合来看尖叶假龙胆高剂量组优于中剂量组和低剂量组。
【关键词】:尖叶假龙胆 类风湿关节炎 佐剂性关节炎
【学位授予单位】:黑龙江中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R285.5;R-332
【目录】:
  • 缩略语表6-7
  • 中文摘要7-8
  • ABSTRACT8-10
  • 前言10-11
  • 文献综述11-24
  • 1. 中医对类风湿关节炎的认识11-18
  • 1.1 古代文献对类风湿关节炎相关的认识11-12
  • 1.2 类风湿关节炎的病因病机12-13
  • 1.3 类风湿关节炎的中医治法13-18
  • 2. 西医对类风湿关节炎的认识18-22
  • 2.1 类风湿关节炎定义及诊断标准18-19
  • 2.2 类风湿关节炎诊断研究进展19-20
  • 2.3 类风湿关节炎的药物治疗进展20-22
  • 3 尖叶假龙胆研究概述22-24
  • 3.1 植物学概述22
  • 3.2 性味归经功效22
  • 3.3 主治及应用22
  • 3.4 药理作用22-24
  • 实验研究24-46
  • 研究一 尖叶假龙胆对AA大鼠的作用研究24-30
  • 1. 实验材料24
  • 1.1 动物24
  • 1.2 饲养条件和环境24
  • 1.3 药品及试剂24
  • 1.4 主要仪器24
  • 2. 实验方法24-25
  • 2.1 药物制备和分组及造模24-25
  • 2.2 给药剂量和方式25
  • 2.3 麻醉方法25
  • 3. 观察项目与方法25-26
  • 3.1 体重测量25
  • 3.2 足趾容25
  • 3.3 关节炎指数25-26
  • 3.4 踝关节病理26
  • 3.4.1 踝关节取材及固定26
  • 4. 统计学处理26
  • 5. 结果26-30
  • 5.1 大鼠状态及体重26-27
  • 5.2 右后足趾体积变化27-28
  • 5.3 关节炎评分28
  • 5.4 踝关节病理变化28-30
  • 研究二尖叶假龙胆对AA大鼠血清TNF-α、IL-10的影响30-37
  • 1. 实验材料30
  • 1.1 实验动物30
  • 1.2 实验药物30
  • 1.3 实验试剂30
  • 1.4 实验仪器30
  • 2. 实验方法30-31
  • 2.1 给药剂量和方式30
  • 2.2 分组及造模30
  • 2.3 麻醉方法30
  • 2.4 实验流程30-31
  • 3. 观察项目与方法31-33
  • 3.1 脾脏病理切片检查31
  • 3.2 HE染色31-32
  • 3.3 ELISA检测血清TNF-α的水平32
  • 3.4 ELISA检测血清IL-10的水平32-33
  • 4. 统计学处理33
  • 5. 结果33-36
  • 5.1 脾脏HE33-34
  • 5.2 血清中TNF-α的变化影响34-35
  • 5.3 血清中IL-10的变化影响35-36
  • 6. 小结36-37
  • 研究三尖叶假龙胆对AA大鼠滑膜组织修复机制的影响37-46
  • 1. 实验材料37
  • 1.1 实验动物37
  • 1.2 实验药物37
  • 1.3 实验试剂37
  • 1.4 实验仪器37
  • 2. 实验方法37-38
  • 2.1 给药剂量和方式37
  • 2.2 分组及造模37
  • 2.3 麻醉方法37
  • 2.4 实验流程37-38
  • 3. 免疫组化法测量滑膜组织中ICAM-1、VEGF、MMP-3的蛋白表达38
  • 3.1 PV二步法免疫组化38
  • 3.2 结果分析38
  • 4. 统计学处理38-39
  • 5. 结果39-45
  • 5.1 AA大鼠VEGF的表达39-41
  • 5.2 AA大鼠ICAM-1的表达41-43
  • 5.3 AA大鼠MMP-3的表达43-45
  • 6. 小结45-46
  • 讨论46-52
  • 1. 动物与药物选择46-47
  • 1.1 动物模型选择及建立46-47
  • 1.2 对照药物的选择47
  • 2. 尖叶假龙胆对AA模型大鼠的药效学作用47
  • 2.1 尖叶假龙胆对AA模型大鼠体重的影响47
  • 2.2 尖叶假龙胆对AA模型大鼠炎症的影响47
  • 3. 病理结果47-48
  • 3.1 踝关节病理47-48
  • 3.2 脾脏病理48
  • 4. TNF-α、IL-10在RA发病中之关键作用48-49
  • 5. 尖叶假龙胆对AA大鼠滑膜组织修复机制的影响49-52
  • 5.1 对AA大鼠滑膜组织VEGF的调节作用49-50
  • 5.2 对AA大鼠滑膜组织ICAM-1的调节作用50-51
  • 5.3 对AA大鼠滑膜组织MMP-3的调节作用51-52
  • 结论52-53
  • 附图53-54
  • 参考文献54-59
  • 致谢59-60
  • 发表论文情况60-62
  • 个人简历62

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