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《哈尔滨商业大学》 2016年
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西洋参在大鼠血液及脑脊液中主要移行成分的研究

王冬雪  
【摘要】:目的:对西洋参总皂苷提取工艺研究,定量研究西洋参的主要成分及西洋参中几种主要成分在大鼠血液、脑脊液中原型成分含量测定,以期阐明药物原型成分在血液和脑脊液中的吸收情况以及二者相关性,为进一步确定西洋参与其他中药的配伍的药效物质基础提供实验依据。方法:①采用比色法,以人参总皂苷含量为评价指标,用正交试验设计优选西洋参总皂苷提取工艺;采用D101大孔吸附树脂,优选西洋参总皂苷富集工艺。②采用UPLC-MS/MS对西洋参中主要皂苷类进行定量检测:色谱柱为Waters Acquity BEH C18柱(100mm×2.1mm,1.7μm)色谱柱,流动相为0.1%甲酸水(A)-乙腈(B),梯度洗脱,流速0.25mL·min-1,柱温35℃;采用电喷雾离子源(ESI),多离子反应监测(MRM)模式进行含量测定。③Wistar大鼠灌胃给予西洋参提取物(6g生药·kg-1·d-1),给药三天,每天二次。在末次给药后1.5h,颈静脉采血3mL,采脑脊液0.2mL,制备含药血清及脑脊液,采用固相萃取法进行样品预处理,薯蓣皂苷为内标。利用UPLC-MS/MS进行定量分析。结果:①最佳提取富集工艺为:加入8倍量70%乙醇回流提取2次,每次3h。0.5BV上样液(0.5g mL-1)通过D101大孔树脂,5BV 水洗,3BV20%乙醇洗脱,6BV70%乙醇洗脱,收集70%乙醇洗脱液。测定人参皂苷总皂苷转移率为81.04%、纯度73.75%。②确定西洋参提取富集物主要成分为人参皂苷Rb1(3.90mg·g-1)、人参皂苷Re(14.54mg·g-1)、人参皂苷 Rc(2.72mg·g-1)、人参皂苷Rd(7.71mg·g-1)、人参皂苷 Rb2(6.24mg·g-1)、人参皂苷Rb3(4.34mg·g-1)、人参皂苷Rg1(1.71mg·g-1)、拟人参皂苷F11(2.03mg·g-1)。③确定西洋参给药后血中的移行成分中原型成分为人参皂苷Rb1(167.27ng·mL-1)、人参皂苷 Rb2(31.27ng·mL-1)、人参皂苷 Rb3(13.54 ng·mL-1)、人参皂苷Re(2.14ng·mL-1)、人参皂苷Rc(9.81ng·mL-1)、人参皂苷Rd(21.25ng·mL-1)。确定西洋参给药后脑脊液中的移行成分中原型成分为人参皂苷Rb1(32.01ng·mL-1)。结论:①本实验优选的提取及富集工艺条件合理、可行、稳定。②采用UPLC-MS/MS对西洋参提取富集物进行分析。该方法稳定、可靠、重复性好,得到的西洋参提取富集物含量稳定。③西洋参在大鼠血液、脑脊液中原型成分含量测定的研究方法适用于西洋参的物质基础研究,该方法稳定、可靠、重复性好。分析得到西洋参在体内吸收入血主要原型成分为人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Re、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd,西洋参在体内吸收入脑主要原型成分为人参皂苷Rb1。
【学位授予单位】:哈尔滨商业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R285.5

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