收藏本站
《复旦大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

白藜芦醇对糖尿病肾病的保护作用及其机制初探

温东海  
【摘要】:背景在我国,糖尿病肾病(DN)的发病率和患病率呈现出一个明显上升的趋势,是导致终末期肾脏病(ESRD)的第二位病因,给人民的健康带来了严重的威胁。但是,目前对于DN的治疗并没有很好的办法,DN仍然具有很高的致死率和致残率。因此,如何更好地了解DN的发病机制及其病理生理变化,从而更好地防治DN,就成为了一个亟待解决的问题。目前已有不少的研究提示,血管内皮生长因子(VEGF)及其2型受体Flk-1 (VEGF-Flk-1)系统在DN的发病过程中具有重要的作用。在动物实验中,使用拮抗VEGF-Flk-1系统的药物也能够很好地缓解DN的病变。因此,拮抗VEGF-Flk-1系统有可能为DN的治疗带来新的手段和更好的疗效。但是,另一方面,目前的拮抗VEGF-Flk-1系统药物还存在一些比较严重的副作用,很难用于临床实践之中。因此,如何研究和开发副作用较小的抗VEGF-Flk-1系统药物,从而更好地防治DN就显得尤其的重要。白藜芦醇作为一种天然的植物提取物,其副作用很小,已广泛地用于人类的生活保健之中。而新近有研究提示,它也有很好的拮抗VEGF的作用,从而应用于肿瘤的研究之中。而另一方面,已有不少研究表明,白藜芦醇能够通过激活沉默信息调节子1 (SIRT1),对糖尿病及其并发症具有多方面的保护作用。而近来有研究亦提示,SIRT1本身也具有很强的抑制VEGF表达的作用。因此,本课题旨在研究白藜芦醇是否能够通过激活SIRT1,抑制VEGF-Flk-1系统,而缓解DN的病变,从而为DN的防治提供一个更好的手段。 方法(一)动物实验:对SD大鼠予以单肾切除后,使用链唑霉素造成1型糖尿病肾病的大鼠模型,随机分成对照组、糖尿病肾病组、以及糖尿病肾病加白藜芦醇治疗组,8周后收集尿及肾脏标本。(1)检测各组大鼠的体重、血糖、尿白蛋白排泄率、肌酐清除率、肾重的水平;用过碘酸-雪夫氏染色的方法检测各组大鼠肾小球的大小、肾小球内基质的沉积水平和用透射电镜检测其肾小球基底膜的厚度;以及使用免疫组织化学术和Western blot等方法检测其肾脏纤维化水平,包括Ⅳ型胶原、纤连蛋白、转化生长因子-β1、结缔组织生长因子、纤溶酶原激活物抑制剂-1等的表达水平。(2)用免疫组织化学术检测大鼠肾脏中SIRT1的表达位置,用Western blot检测各组大鼠肾脏内VEGF和Flk-1,以及Tie-2和血管生成素-1 (Ang-1)的表达水平,用Real time PCR检测各组大鼠肾脏内血管生成素-2(Ang-2)的mRNA转录水平。 (二)体外实验:(1)体外培养小鼠肾小球足细胞,分别给予正常糖、高糖、以及高糖加白藜芦醇干预,而后使用Western blot. Realtime PCR和ELISA的方法,检测各组细胞内VEGF表达和分泌的变化;并且通过以慢病毒为载体的RNA干扰进一步研究SIRT1在其中所起的潜在介导作用。(2)体外培养小鼠肾小球内皮细胞,分别给予正常糖、高糖、以及高糖加白藜芦醇干预,而后使用Western blot、Realtime PCR的方法,检测各组细胞内Flk-1表达的变化;并且通过以慢病毒为载体的RNA干扰以及转染过表达质粒的方法,进一步研究SIRT1在其中所起的潜在介导作用。(3)体外培养小鼠肾小球内皮细胞,分成正常对照组、VEGF刺激组和VEGF加白藜芦醇干预组,使用免疫荧光的方法,观察各组内皮细胞间细胞连接的变化;并且通过使用一种体外血管通透性试剂盒,进一步检测各组细胞通透性的变化。 结果(一)动物实验:(1)糖尿病肾病组和白藜芦醇治疗组大鼠的体重和血糖水平无显著性差异,但较正常组分别有明显的下降和升高;与正常组大鼠相比,糖尿病肾病大鼠的尿白蛋白排泄率、肌酐清除率、肾重的水平均显著地增加,而白藜芦醇治疗组则较糖尿病肾病组有明显的下降;糖尿病肾病组大鼠的肾小球直径、肾小球系膜基质沉积水平、以及肾小球基底膜的厚度均较正常组显著地增加,而白藜芦醇治疗组则较糖尿病肾病组有明显的下降;在肾脏纤维化方面,糖尿病肾病组大鼠肾脏内Ⅳ型胶原、纤连蛋白、转化生长因子-β1、结缔组织生长因子、纤溶酶原激活物抑制剂-1等的表达水平均较正常组显著的增加,而白藜芦醇治疗组则较糖尿病肾病组有明显的下降。(2)在大鼠的肾小球内,SIRT1在足细胞、系膜细胞以及内皮细胞核中均有较明显的表达;VEGF和Flk-1的表达水平在糖尿病肾病组的大鼠肾脏内均明显的升高,而在白藜芦醇治疗组其肾脏内的表达水平较糖尿病肾病组有显著的下降;Tie-2的表达水平在糖尿病肾病组中则明显的下降,治疗组则有所回升,而Ang-1的表达水平在各组间均无明显的差异。Ang-2的mRNA转录水平在糖尿病肾病组中明显升高,而使用白藜芦醇治疗组其Ang-2的转录较糖尿病肾病组减少。 (二)体外实验:(1)在培养的肾小球足细胞中,白藜芦醇能够显著地抑制由高糖刺激引起的足细胞内VEGF表达和分泌的升高,并且呈明显的剂量和时间依赖性;而下调足细胞内SIRT1的表达后,白藜芦醇的这种对VEGF表达的抑制作用明显减弱。(2)在培养的肾小球内皮细胞中,白藜芦醇能够显著地抑制由高糖刺激引起的内皮细胞内Flk-1表达的增加,并且呈明显的剂量和时间依赖性;而下调内皮细胞内SIRT1的表达后,白藜芦醇的这种对Flk-1表达的抑制作用明显减弱;上调其细胞内SIRT1的表达则能够明显地抑制Flk-1的表达。(3)在培养的肾小球内皮细胞中,白藜芦醇能够明显地保护由VEGF刺激引起的内皮细胞连接的破坏;并且能够显著地降低由于VEGF刺激引起的内皮细胞通透性的增加。 结论白藜芦醇能够通过激活SIRT1,抑制VEGF-Flk-1系统,从而缓解糖尿病肾病
【学位授予单位】:复旦大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R587.2;R692.9

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王振;;糖尿病肾病的防治工作不可耽误[J];糖尿病新世界;2011年09期
2 李建波;;白藜芦醇的制备方法研究进展[J];河南科技;2011年10期
3 徐玉梅;;糖尿病肾病食疗方[J];健康生活;2011年08期
4 韩履祺;宋跃飞;高峰;王琴;王世荣;钱雅玉;;于家菊教授治疗糖尿病肾病经验[J];中国中西医结合肾病杂志;2011年07期
5 舒展;;糖尿病肾病的治疗概况[J];中国医学工程;2011年05期
6 葛丹枫;章可谓;甘莉;;补肾泄浊汤治疗糖尿病肾病氮质血症42例[J];中国中医药科技;2011年04期
7 闫香梅;;中药治疗糖尿病肾病58例临床分析[J];中国社区医师(医学专业);2011年21期
8 邱慧琳;;糖尿病肾病饮食注意要点ABCD[J];食品与健康;2000年02期
9 刘红梅;;将糖尿病肾病阻断在可逆转期[J];大家健康;2010年02期
10 张海燕;;糖尿病肾病健康教育的研究进展[J];中国社区医师(医学专业);2011年19期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈纯白;都霞;赵乐萍;王林;吴淑娟;潘建春;;白藜芦醇拮抗围绝经期抑郁模型小鼠的行为异常及机制研究[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
2 王子坪;瞿金鸿;;活血化瘀治疗糖尿病肾病临床观察[A];中华中医药学会中医、中西医结合治疗常见病研讨会论文集[C];2007年
3 尹绍峰;;从络辨治糖尿病肾病[A];中华中医药学会第二十一届全国中医肾病学术会议论文汇编(下)[C];2008年
4 王光丽;周小辉;傅玉才;;白藜芦醇改善肝细胞脂肪变性的相关调节机制[A];第十八次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2009年
5 田翀;彭晓琳;张嫦慧;唐玉涵;任玮叶;孙秀发;郝丽萍;应晨江;;VEGF在白藜芦醇缓解内皮细胞高通透性的作用[A];营养与慢性病——中国营养学会第七届理事会青年工作委员会第一次学术交流会议论文集[C];2010年
6 杨静玉;孟雪莲;陈国良;张丽佳;赵思奇;王笑笑;连国宁;吴春福;;白藜芦醇及其衍生物抑制小胶质细胞活化的作用研究[A];第十届全国抗炎免疫药理学学术会议论文集[C];2010年
7 宋立群;周波;马艳春;孙许涛;张立净;肖洪彬;;糖尿病肾病的中医治疗研究及展望[A];第十一届全国中西医结合肾脏病学术会议论文汇编[C];2010年
8 都霞;陈玲;林蒙蒙;王林;潘建春;;白藜芦醇对围绝经期模型小鼠的抗抑郁及神经保护作用[A];中国药理学会第十一次全国学术会议专刊[C];2011年
9 顾连方;;糖尿病肾病防治及中西医结合治疗[A];第六届全国中西医结合肾脏病学术会议论文汇编[C];2000年
10 陆安錩;;清上补下汤治疗中糖尿病肾病的体会[A];全国第七届农村基层中西医结合学术暨工作交流会论文汇编集[C];2002年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 上海二医大内分泌科 教授 宁光;什么是糖尿病肾病[N];家庭医生报;2004年
2 王敏 曹蕾;糖尿病肾病的临床治疗[N];农村医药报(汉);2003年
3 主持人 向红丁博士;糖尿病肾病须早防早治[N];人民政协报;2002年
4 四川大学华西医院肾脏内科主任 付平;糖尿病肾病诊治要抓“早”[N];健康报;2008年
5 陕西省人民医院临床营养室 张英;三低一少 助糖尿病肾病康复[N];健康报;2009年
6 北京电力医院内分泌科 赵若楠;8个要点预防糖尿病肾病[N];健康时报;2009年
7 刘奕深;糖尿病肾病的防治对策[N];潮州日报;2009年
8 江苏省南京市中大医院 陆青松;糖尿病肾病每日组合餐[N];健康时报;2009年
9 王迪;白藜芦醇渐入补充剂行业法眼[N];医药经济报;2009年
10 湘雅二医院 张红;防治糖尿病肾病(四):保护肾功能[N];大众卫生报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王颖辉;糖尿病肾病证候演变及其中医药干预研究[D];北京中医药大学;2010年
2 温东海;白藜芦醇对糖尿病肾病的保护作用及其机制初探[D];复旦大学;2011年
3 谭从娥;肾虚证在糖尿病中的分布特征及其免疫遗传机制研究[D];成都中医药大学;2009年
4 张翥;Megalin在糖尿病肾病大鼠的表达及干预措施对其作用的实验研究[D];四川大学;2005年
5 肖晓燕;TLR4在1型糖尿病肾病及TLR3在自身免疫性肝炎中作用的研究[D];山东大学;2010年
6 张惠萍;基于多种分析技术的胰腺癌与糖尿病血清代谢组学研究[D];上海交通大学;2011年
7 王评;温肾健脾法对脾肾阳虚型糖尿病疗效及生存质量的临床研究[D];广州中医药大学;2010年
8 路晓光;L-FABP/GPx3/TGF-β三种蛋白在2型糖尿病肾病中的作用及中医药干预研究[D];北京中医药大学;2011年
9 傅余芹;ET、TGF-β与糖尿病肾病的关系及虫草菌丝对其影响的实验研究[D];山东大学;2005年
10 肖湘成;糖尿病肾病肾小管上皮细胞表型转化及罗格列酮对其干预作用的实验研究[D];中南大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 任俊伟;白藜芦醇对局灶脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用及机制研究[D];重庆医科大学;2011年
2 姜瑞清;花生根中白藜芦醇的分离纯化工艺研究[D];中南林业科技大学;2008年
3 闻剑飞;补充白藜芦醇对小鼠运动性骨骼肌微损伤修复的影响[D];河北师范大学;2010年
4 王莉莉;大孔吸附树脂分离虎杖中白藜芦醇的研究[D];长安大学;2010年
5 孔晓霞;白藜芦醇对大鼠卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响及其相关调控机制研究[D];汕头大学;2010年
6 张瑞;白藜芦醇抗真菌作用及其机制研究[D];河北医科大学;2011年
7 贾美玲;浆果类水果生物活性成分分析[D];辽宁师范大学;2010年
8 张硕;白藜芦醇和木樨草素对小鼠乳腺癌的抗转移作用[D];河南大学;2010年
9 赵赛;白藜芦醇对2型糖尿病大鼠胰岛细胞保护作用及其机制的研究[D];河北医科大学;2011年
10 赵康;桑椹中白藜芦醇及其苷的含量和光稳定性研究及MaPAL基因的克隆分析[D];西南大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026