糖基化终产物通过树突状细胞促进动脉粥样硬化机制的研究
【摘要】：在糖尿病患者中,动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)等慢性血管并发症已成为主要致残和致死原因,研究表明,高级糖基化终术产物(Advanced glycosylation end products,AGEs)在动脉粥样硬化发生发展过程中起重要作用。近年来研究提出AS是一种慢性炎症和免疫性疾病,树突状细胞(dendritic cells,DCs)在免疫过程中起重要调控作用,AGEs对DCs作用的研究在国内外尚未见报导,本研究以其作为干预因素,以期探讨AGEs通过DCs促进AS发生的可能机制,全文由三个部分组成:
第一部分:糖基化终产物对树突状细胞清道夫受体A和糖基化终产物受体表达的影响
目的:探讨AGEs对DCs清道夫受体A(scavenger receptor A,SR-A)和糖基化终产物受体(receptor for advanced glycosylation end products,RAGE)表达的影响。
方法:用葡萄糖和牛血清白蛋白制备糖基化牛血清白蛋白(AGE—BSA),即糖基化终产物。用免疫磁珠分离人外周血CD14~+单核细胞,经含重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)(100ng/ml)和重组人白细胞介素-4(rhlL-4)(50ng/ml)的RPMI1640培养,使其分化为DCs,第8天分别加入不同蛋白浓度的AGE=BSA(0、BSA、50、100、200、300μg/ml)干预24小时和蛋白浓度为200μag/ml的AGE-BSA干预0、6、12、24、36小时,用RT-PCR和Western-blot技术检测SRA基因和蛋白的表达。200μg/mL AGE-BSA干预DCs24小时,用RT-PCR和Western-blot技术检测RAGE基因和蛋白的表达。
结果:(1)与空白对照相比,浓度为50μg/ml和100μg/ml AGE-BSA干预24小时即可分别上调SR-A mRNA和蛋白的表达(P0.05),200μg/ml时达峰值(P0.01),在干预的不同时间组,12h和24h可分别上调SR-A mRNA和蛋
【关键词】：树突状细胞 动脉粥样硬化 糖基化终产物 清道夫受体A 糖基化终产物受体 丝裂原激活蛋白激酶 免疫 【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R543.5
【目录】：
- 中文摘要4-7
- 英文摘要7-11
- 前言11-14
- 第一部分 AGEs对DCs SRA和RAGE表达的影响14-35
- 1．材料和方法14-21
- 2．结果21-32
- 3．讨论32-35
- 第二部分 AGEs对DCs SRA和RAGE表达影响机制的研究35-47
- 1．材料和方法35-39
- 2．结果39-45
- 3．讨论45-47
- 第三部分 AGEs对DCs成熟和免疫功能影响的研究47-62
- 1．材料和方法47-49
- 2．结果49-59
- 3．讨论59-62
- 论文总结62-63
- 参考文献63-75
- 致谢75-76
- 综述176-81
- 综述281-87
- 附录87-88
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