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《复旦大学》 2005年
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p16基因在乙肝病毒相关性肝细胞肝癌发生发展中的作用

王兆文  
【摘要】:目的:本研究通过对原发性肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)、癌旁及肝硬化(Liver cirrhosis, LC)组织中乙型肝炎病毒(Hepatitis virus B, HBV)的感染状态、p16基因及其蛋白的表达改变、Rb (Retinoblastoma susceptibilitygene)蛋白表达和核转录因子κ B (Nuclear factor xappaB, NF-κ B)活性的检测,分析乙型肝炎病毒基因整合、p16基因改变、p16蛋白及Rb蛋白表达和NF-κ B结合活性之间的关系,并分析这些因素与肝细胞肝癌的关系,初步探讨p16基因的异常改变在HBV相关性肝细胞肝癌发生发展中的作用,为进一步研究HBV相关性肝细胞肝癌发生发展的分子生物学机制及利用p16基因进行肝细胞肝癌的预防、诊断和治疗提供部分实验依据。 方法:以35例原发性肝细胞肝癌手术切除标本及同时期35例肝硬化患者(后因标本量少减为31例)手术中活检组织为研究对象,标本分为三组,分别为肝细胞肝癌组、癌旁组及肝硬化组。三种组织标本由病理学专家进行常规病理学检查;以聚合酶链式反应(Polymerase chain reactions, PCR)检测三种组织中HBV DNA;以大片段DNA回收后PCR再扩增的方法检测组织中HBV DNA的X片段及S片段的整合状态;以Southern blot证实HBV-DNA是否整合;以聚合酶链式反应(PCR)检测三种组织中p16外显子1α及外显子2、3的纯合性缺失;聚合酶链式反应-单链构象多态性分析(Polymerase chain reaction-single-strandconformation polymorphism, PCR-SSCP)检测p16基因外显子的突变;用甲基化修饰试剂盒及甲基化检测试剂盒检测p16基因的甲基化状态;以逆转录-聚合酶链式反应(Reverse transcfiptase PCR, RT-PCR)检测肝细胞癌、癌旁及肝硬化组织中p16基因mRNA的表达;用Western Blot检测肝细胞肝癌、癌旁及肝硬化组织中p16蛋白及Rb蛋白的表达;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清甲胎球蛋白(Alpha-fetoprotein, AFP)的水平;以凝胶电泳迁移实验(ElectrophoreticMobility Shift Assays, EMSA)、竞争实验和超迁移实验检测组织中NF-κB转录活性。 结果:大部分肝硬化、癌旁和肝细胞癌组织中肝炎病毒仍然活跃复制,HCC、癌旁及LC组织中HBV DNA检出率分别为94.3%、91.4%及94.3%;三组HBV DNA整合率分别为71.4%、65.7%及60.0%,差异无显著性(P0.05)。HCC组以X
【学位授予单位】:复旦大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R735.7

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1 孙庆丰;丁继光;徐道振;李蕴铷;王文冰;;乙型肝炎病毒e抗原阴性的慢性乙型重型肝炎[A];中华医学会全国第九次感染病学学术会议论文汇编[C];2006年
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3 ;乙肝肝硬化的中医治疗[N];上海中医药报;2007年
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