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《复旦大学》 2005年
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ADM在延髓头端腹外侧区对应激性高血压大鼠心血管活动的调节作用

李霞  
【摘要】:目的:通过观察应激致高血压过程中肾上腺髓质素(ADM)及其受体在延髓(尤其是延髓头端腹外侧区)的动态变化以及微量注射或微电泳ADM至延髓头端腹外侧区(rVLM)对大鼠收缩压(SBP)、心率(HR)和神经元细胞外放电频率的影响,初步探讨ADM在应激性高血压发生发展中的作用,为了解ADM对心血管活动的中枢调节作用以及在应激致高血压这一病理过程中可能的病理生理意义提供实验依据。 方法:以足底电击结合噪声建立条件反射为基本应激手段,连续应激15天制备应激性高血压大鼠模型;采用逆转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)、放射免疫测定(RIA)、原位杂交(ISH)和免疫组织化学(IHC)等方法,观察应激致高血压过程中大鼠延髓ppADM及其特异性受体组件—降钙素受体样受体(CRLR)、受体活性修饰蛋白2和3(RAMP2和RAMP3)的表达以及ADM含量变化;应用中枢核团微量注射、中脑导水管周围灰质背侧(dPAG)电刺激以及细胞外放电记录的方法,观察大鼠肾上腺髓质素(rADM)在rVLM的作用及可能机制。 结果:(1) 大鼠连续应激15天后股动脉收缩压(SBP)逐渐上升,应激第15天达到高峰,SBP为148.34±7.84mmHg,与对照组血压(114.89±6.38mmHg)相比两者差异具有显著统计学差异(P0.01)。同时,应激5天内大鼠HR显著加快,由378±9.78b/min增加到442±12.34b/min(P0.01),应激10、15天虽然HR加快较前有所减慢,但较对照组仍明显加快(P0.01)。说明应激性高血压模型制备成功;(2) RT-PCR和RIA结果表明:与对照组相比,除应激第1天外,应激组动物ppADM的基因表达均明显下调(P0.05或P0.01);ADM含量在应激第15天显著升高(P0.01),而在其它时间点变化幅度无明显差异;ADM特异性受体组件—CRLR和RAMP2基因表达在应激第5天均明显下调,而在应激第15天明显上调(P0.05);RAMP3基因表达在应激过程中虽有下调趋势,但与对照组比较无统计学差异;(3) ISH和IHC形态学结果显示,在闩前1.0~3.0mm之间的延髓组织中ppADM mRNA杂交信号和免疫阳性细胞在rVLM、面神经核分布最多,中缝核、巨细胞背核、舌下神经核和下橄榄核等处尚有中等量阳性细胞,而孤束核较少。在应激第5天,rVLM区ppADM mRNA表达和ADM免疫阳性细胞较对照组明显增加(P0.01),但在应激第1、10、15天无显著变化(P0.05);(4) 单侧rVLM微量注射0.001pmol、0.01pmol或0.1pmol rADM可引起正常大鼠出现剂量依赖性SBP升高和HR加快效应,其中0.01pmol和0.1pmol rADM对心血管活动的影响维持约40min到1h;在应激性高血压大鼠,采用单侧
【学位授予单位】:复旦大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R544.1

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