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《复旦大学》 2007年
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利用生物芯片技术检测转基因农作物

许嘉  
【摘要】: 随着转基因农作物检测技术的不断发展,PCR技术已经成为最主要的检测方法之一。但是常规的PCR每次只能扩增一个基因,而单独的多重PCR和常规电泳相结合的技术由于受多重PCR技术自身限制,每次扩增的基因数目也很有限,因此不能满足当前转基因农作物检测的要求。 寡核苷酸芯片是一种在基片上点有若干寡核苷酸探针的基因芯片,每个点都含有序列特异的探针以和感兴趣的基因相互补结合。因此,寡核苷酸芯片可以和多重PCR技术相结合用来同时检测多种目标基因。 在这篇论文中,我们开发了多重PCR技术和DNA芯片技术相结合的方法,在同一个反应中同时检测多个目标基因,以达到检测转基因农作物的目的。 我们设计了两大类芯片,其中一类用来检测样本是否是转基因农作物,另一类用来检测样本来自于哪一种转基因品系。 对于第一类芯片,我们使用了20种探针用以检测转基因农作物,按照具体功能可以分为三种:第一种,根据一些普通元件例如启动子、终止子、报告基因等来检测是否为转基因农作物;第二种,根据目标基因例如抗除草剂或是抗虫害基因来做特定基因的检测确认;第三种,根据物种特异性基因来检测该样本来自于哪种作物。为保证方法的有效性,设立不同的阳性对照和阴性对照来鉴定该实验方法,并且通过常规PCR反应和测序来进一步验证。结果表明这种方法可以快速识别样本是否为转基因农作物,并且花费少,效率提高。这种方法可以检测目前95%以上的转基因作物,并且对于大豆的最低检出率是0.5%,玉米是1%。 对于第二类芯片,根据唯一的、品系特异的宿主与插入片断间连接区域的基因序列,通过多重PCR和寡核苷酸芯片相结合的技术,以达到检测出样本来自于哪种转基因品系的目的。转基因农作物商品大豆(GTS 40-3-2)和六种转基因玉米(MON810,MON863,Bt176,Bt11,GA21和T25)通过这种方法进行检测。结果表明对于这些转基因大豆和玉米,该方法均可以适用。 以上两种芯片被证明是一种新的转基因农作物检测的常规方法。
【学位授予单位】:复旦大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S188

【引证文献】
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1 程涛;王慧煜;黄新;余多慰;韩雪清;;转基因玉米Bt176液相芯片检测方法的建立[J];生物技术通报;2012年04期
2 孔金明;;生物芯片技术在食品安全领域的应用综述[J];郑州轻工业学院学报(自然科学版);2013年01期
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1 刘萍;转基因作物环境安全法律问题研究[D];东北林业大学;2012年
2 程涛;4种转基因玉米液相芯片检测方法的建立[D];南京师范大学;2012年
【共引文献】
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1 吴志平;植物转基因方法在桑树上的应用[J];安徽农学通报;2003年04期
2 李飞武;李葱葱;董立明;邢珍娟;张明;;转基因大豆MON89788转化体特异性定性PCR检测[J];安徽农业科学;2010年13期
3 李飞武;邵改革;邢珍娟;李葱葱;夏蔚;张明;;转基因大豆MON89788检测质粒标准分子的构建与应用[J];安徽农业科学;2010年23期
4 罗万春;易东;刘恩;龚利红;;整数非线性规划模型在乳腺癌转移相关基因表达调控网络建立中的应用[J];北京生物医学工程;2008年02期
5 马猛;钮俊清;宁岩;郑浩然;王煦法;;聚类和关联规则挖掘在基因表达数据分析中的应用研究[J];北京生物医学工程;2008年04期
6 敖金霞;高学军;仇有文;郭士成;;实时荧光定量PCR技术在转基因检测中的应用[J];东北农业大学学报;2009年06期
7 ;Comparison of Two Real-time PCR Technigues for Quantification of GMO Contents in Highly Processed Products of Soybean[J];Journal of Northeast Agricultural University(English Edition);2010年01期
8 李飞武;李葱葱;邢珍娟;刘娜;康岭生;宋新元;邵改革;张明;;第二代抗草甘膦大豆PCR检测方法研究[J];大豆科学;2009年02期
9 金志超;吴骋;高青斌;姜洋;贺佳;;基于时间序列表达数据基因调控网络模型的研究进展[J];第二军医大学学报;2008年09期
10 江宁;刘学武;刘文超;刘新平;;用比较基因组学方法分析人NDRG2的生物学功能[J];第四军医大学学报;2009年18期
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1 黄素英;陈华;;胃癌转移相关的肿瘤标志性基因筛选研究[A];第十届中国科协年会论文集(三)[C];2008年
2 邓欣;高必达;赵廷昌;孙福在;;转基因作物的生物安全评价方法研究进展[A];农业生物灾害预防与控制研究[C];2005年
3 陈红运;黄文胜;赵文军;朱水芳;陈洪俊;;应用实时荧光PCR方法检测转基因植物产品[A];中国植物病理学会2004年学术年会论文集[C];2004年
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1 于化龙;基于DNA微阵列数据的癌症分类技术研究[D];哈尔滨工程大学;2010年
2 徐兆华;基因芯片数据统合分析方法的若干拓展[D];浙江大学;2010年
3 黎刚果;基因模块识别与分析相关问题研究[D];国防科学技术大学;2010年
4 苏长青;适合转基因抗虫水稻和棉花PCR检测标准质粒的构建及试用[D];中国农业科学院;2011年
5 祁云嵩;微阵列数据分析中的基因选择及样本分类方法研究[D];南京理工大学;2011年
6 田芳;饲料及原料中转基因大豆检测技术的研究[D];内蒙古农业大学;2011年
7 郭懿;基于基因芯片的鼻咽癌研究[D];复旦大学;2009年
8 姚佳;孕酮与干扰素-τ对体外培养的牛子宫内膜细胞基因组表达谱的影响[D];四川农业大学;2011年
9 缑葵香;基于贝叶斯理论的基因调控网络建模研究[D];天津大学;2010年
10 范净;柑橘转GFP、AP1和LFY基因植株群体的分子鉴定与基因表达研究[D];华中农业大学;2010年
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1 王卫杰;食品中肠出血性大肠杆菌O157:H7和鼠伤寒沙门氏菌同时快速检测方法的研究[D];山东农业大学;2010年
2 孙翠;核桃(Juglans regia L.)坚果仁维生素E含量分析及jrMPBQ基因克隆[D];山东农业大学;2010年
3 乾义柯;葡萄金黄化植原体基因芯片检测技术及RFLP分析的研究[D];新疆农业大学;2010年
4 朱国坡;RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测CSISV在SPF雏鸡体内分布[D];河南科技学院;2010年
5 郭燕风;转基因玉米中外源基因检测方法的研究[D];山东农业大学;2011年
6 赵郅;一种改进的双聚类算法及其应用[D];吉林大学;2011年
7 陈亮;基于DMarker系统的癌症特异性标志物挖掘[D];吉林大学;2011年
8 陈贞;转基因作物的多重PCR检测体系的研究[D];暨南大学;2011年
9 刘玉杰;基于小波分析的基因芯片数据的特征提取[D];山东轻工业学院;2011年
10 汪巧;转cry1Ac基因抗虫棉鄂杂棉1号外源插入序列分析及特异性PCR检测方法[D];中国农业科学院;2011年
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1 杜珍媛;;转基因生物技术的生态风险及对策研究[J];安徽农业科学;2010年19期
2 宋君;雷绍荣;刘勇;向冰;王东;尹全;张富丽;刘文娟;常丽娟;;实时荧光定量PCR检测转基因玉米MON863结构特异基因的测量不确定度[J];安徽农业科学;2011年33期
3 杨永莉;王静;乔舜;孙肖红;杨宇;单麟军;谢士嘉;胡孔新;张乐;;液相蛋白芯片法与BAS-ELISA法检测病原抗体的方法比较[J];中国国境卫生检疫杂志;2009年06期
4 何英;陆学东;;液相芯片技术及其临床应用[J];国际检验医学杂志;2006年12期
5 兰添颖;宋文芹;张守攻;齐力旺;韩素英;;转基因农作物检测技术及其应用与发展[J];广西植物;2006年05期
6 詹爱军;王新卫;花群义;卢体康;阮周曦;曾少灵;陈兵;秦爱建;;西尼罗热液相芯片快速检测方法的初步建立[J];扬州大学学报(农业与生命科学版);2010年01期
7 黄吉光;诸世楠;彭杰;;基于生物芯片技术的食品安全管理[J];经营与管理;2012年05期
8 徐友刚;考察美国生物安全立法情况的报告[J];科技与法律;2003年01期
9 刘旭霞;余桢;;中外转基因作物产业化法律规范比较[J];科技与法律;2007年03期
10 毛新志,周锋;美国、欧盟有关转基因食品的管理、法律法规对我国的启示[J];科技管理研究;2005年02期
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1 季新成;牛传染性鼻气管炎病毒和牛病毒性腹泻病毒分子生物学检测技术研究[D];西北农林科技大学;2010年
2 廖慧敏;转基因植物的生态环境风险分析与安全评价方法研究[D];中南大学;2010年
3 肖性龙;多重荧光PCR与液相芯片高通量病原体检测体系的建立与应用[D];华南理工大学;2010年
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1 郭燕风;转基因玉米中外源基因检测方法的研究[D];山东农业大学;2011年
2 陈贞;转基因作物的多重PCR检测体系的研究[D];暨南大学;2011年
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5 胡瑞;四种病原菌的xMAP液态芯片多重快速检测技术的研究[D];西北农林科技大学;2008年
6 罗渊;五种虫媒病毒悬浮芯片检测方法的建立[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
7 胡玉茹;我国转基因产品安全性的立法研究[D];合肥工业大学;2009年
8 袁磊;转基因玉米MON88017及其产品的实时荧光定量PCR检测[D];山东师范大学;2010年
9 张澧华;我国转基因生物安全的法律控制[D];湖南大学;2010年
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2 ;澳大利亚农业部强烈支持转基因农作物[J];北京农业;2009年26期
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5 吴明;转基因农作物的研究(Ⅱ)[J];世界农业;1991年11期
6 袁铁琰,张大兵,王全喜;试纸条技术在转基因农作物检测中的应用[J];生物技术通报;2004年05期
7 利国;;越南乡村造纸业采用环保新技术[J];农村.农业.农民(A版);2007年03期
8 ;世界各国对转基因农作物的态度[J];畜禽业;2011年01期
9 陶锦琰;;转基因农作物造福发展中国家[J];农药市场信息;2000年10期
10 苏筱娟;转基因农作物与“分子农业”[J];中国农村科技;2001年03期
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1 张启发;;转基因农作物的安全性及管理[A];新世纪科技与湖北经济发展——2001首届湖北科技论坛论文集[C];2001年
2 陈章良;;农业生物工程研究及产业的现状及我国发展的策略[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
3 谭万忠;;入侵生物安全与食品安全的关系及对策[A];新观点新学说学术沙龙文集44:转基因植物与食品安全[C];2010年
4 邓江;罗海吉;;转基因食品的现状、检测技术及安全性评价[A];中国营养学会特殊营养第五届学术会议论文摘要汇编[C];2002年
5 ;专家简介[A];新观点新学说学术沙龙文集44:转基因植物与食品安全[C];2010年
6 王慧中;应奇才;钟国庆;田菊霞;陈河;黄大年;钱前;;转mtlD/gutD双价基因稻米对小鼠的毒性试验[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2003年学术交流会论文摘要集[C];2003年
7 彭于发;;转基因技术是保障食品安全的一个方向[A];新观点新学说学术沙龙文集44:转基因植物与食品安全[C];2010年
8 马奎蒙;;上海生物技术科研优势转化为产业优势探讨[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
9 陈社员;官春云;王国槐;刘忠松;;基因工程技术与油菜育种[A];21世纪作物科技与生产发展学术讨论会论文集[C];2002年
10 黄俊明;;转基因食品及其食用安全性[A];广东省环境诱变剂学会、广东省预防医学会卫生毒理专业委员会2010年学术会议资料汇编[C];2010年
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1 周月光;海南加强转基因农作物试验与种植监管[N];农民日报;2009年
2 记者 周月光;我省将加强监管转基因农作物试验[N];海南日报;2009年
3 王晓郡;欧盟成员国可自主决定是否引种转基因农作物[N];中国食品质量报;2010年
4 柯继;英国皇家学会建议发展转基因农作物[N];中国食品报;2009年
5 本报记者 钟欣;生命科学论坛研讨转基因农作物技术应用与安全管理[N];农民日报;2009年
6 综合;三种转基因农作物领安全证书[N];江苏科技报;2009年
7 本报记者 刘霞;你的地盘你做主[N];科技日报;2010年
8 郑焕斌;转基因农作物在南非日渐生根[N];科技日报;2005年
9 刘霞;欧盟“开绿灯”欲打破转基因农作物僵局[N];粮油市场报;2010年
10 序谋;美国转基因农作物播种面积大幅增加[N];农民日报;2001年
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1 张朝辉;转基因农作物产业化的法律问题研究[D];郑州大学;2011年
2 李翔宇;我国农业转基因生物安全管理法研究[D];中国海洋大学;2013年
3 柳毅;环介导等温扩增技术快速检测转基因大豆研究[D];河北农业大学;2009年
4 马荣群;转基因农作物荧光PCR检测方法的研究[D];西北农林科技大学;2002年
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8 成晓维;新型生物晶片检测食品中转基因成分方法的建立及其应用研究[D];华南理工大学;2012年
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