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《复旦大学》 2009年
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社交应激性抑郁对小鼠肺癌的影响及淫羊藿苷干预的研究

吴金峰  
【摘要】:目的以肿瘤生长转移为主要疗效指标,评价淫羊藿苷对肺癌伴抑郁的疗效。从直接抗抑郁、抗炎症、抗血管生成和抗肿瘤等环节,探讨淫羊藿苷的疗效机理。 方法1.建立肺癌伴抑郁模型,并采用淫羊藿苷干预。观察肿瘤重量及肺转移结节数目;免疫组化法测血管生成相关指标VEGF、CD31并行MVD计数,炎症相关指标CD11b;流式细胞术测免疫抑制相关指标MDSC;ELISA测VEGF和IL-6。2.建立社交应激性抑郁模型,并采用淫羊藿苷干预。MED动物行为分析仪记小鼠运动轨迹及社交区域停留时间;ELISA法测皮质酮、IL-6;放射性配基和western blot法测糖皮质激素受体(GR)。3.建立脂多糖炎症模型,采用淫羊藿苷及其代谢产物干预。ELISA法测炎症因子TNF-α、IL-6和PGE2;GriessReagent法测NO;western blot法测炎症相关酶iNOS和COX2;流式细胞术测CD11b。4.建立肺癌模型及血管新生模型,采用淫羊藿苷及其代谢产物干预。体外部分:CCK-8试剂盒测其对小鼠肺癌细胞株(LLC)细胞毒作用;流式细胞术测LLC细胞周期;流式细胞术和Tunel法测LLC调亡;HUVEC划痕闭合实验和鸡胚绒毛尿囊膜实验(CAM)评价抗血管生成疗效。体内部分:观察肿瘤重量及肺转移结节数目;免疫组化法测VEGF、CD31并行MVD计数;流式细胞术测MDSC;ELISA法测VEGF和IL-6。结果:1.肺癌伴抑郁模型的肿瘤生长转移明显增加,淫羊藿苷则显示了干预作用,同时可降低MDSC、CD11b、IL-6、VEGF及MVD水平。2.淫羊藿苷可增加社交应激性抑郁模型社交区域活动时间,同时降低皮质酮及IL-6水平,部分恢复GR蛋白表达和结合活性。3.淫羊藿苷及其代谢产物可抑制脂多糖炎症模型TNF-α、IL-6、PGE2、NO、CD11b水平,同时降低iNOS和COX2表达。4.淫羊藿苷代谢产物(淫羊藿次苷Ⅱ)对LLC细胞株显示细胞毒作用、周期阻滞和促凋亡作用;淫羊藿苷代谢产物(淫羊藿素)显示了抗血管生成作用;淫羊藿苷体内可抑制肿瘤生长转移。结论:1.社交应激性抑郁可促进小鼠肿瘤生长转移,同时伴免疫抑制、炎症加重和肿瘤血管新生增强。淫羊藿苷能部分逆转上述进程。2.淫羊藿苷可通过直接抗抑郁、抗炎症、抗肿瘤、抗血管生成和提高免疫等多环节对肿瘤伴抑郁干预。3.淫羊藿素和淫羊藿次苷Ⅱ可能是淫羊藿苷干预肺癌伴抑郁的体内主要效应物质。
【学位授予单位】:复旦大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R734.2;R285

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