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恒电位法对氨基酸的测定

刘婷婷  
【摘要】:生命科学是二十一世纪一项最为重要的研究,而氨基酸分析是生命科学研究中最重要的技术之一。目前氨基酸分析方法主要有离子交换色谱(IEC)、高效液相色谱(HPLC)、气相色谱(GC)或毛细管电泳(CE)等,而以恒电位滴定法对氨基酸进行分析研究尚不多见。恒电位滴定法的原理在于滴定曲线上的每一电位(或pH值)处滴定剂消耗的量与待测物的浓度成比例关系。本文以氢离子选择性电极为工作电极,以一定浓度的氢氧化钠溶液为滴定剂(根据需要可加入一定量的盐酸调节pH在较大范围内变化),采用恒电位滴定法对单组分谷氨酸、丝氨酸、组氨酸、丙氨酸、赖氨酸溶液及其两组分混合溶液进行研究,做了以下工作:(1)测定了谷氨酸、丝氨酸、组氨酸、丙氨酸、赖氨酸溶液的含量,实验结果良好,实验误差基本控制在3%以内。(2)测定了谷氨酸和丝氨酸、组氨酸和谷氨酸、丝氨酸和组氨酸、谷氨酸和丙氨酸、组氨酸和赖氨酸的混合溶液的含量,实验误差一般不超过5%,体现了较好的实验效果。其中,丝氨酸和组氨酸混合溶液测定时采用分段电位区间选取,从而增加了累积误差,因此此组实验误差相对较大。(3)探讨了上述五种氨基酸在水溶液中的存在形式、混合溶液中的反应顺序等理论问题,并且进一步讨论了两种氨基酸在滴定方向上的电离平衡常数的相关规律及不同类别氨基酸水溶液所呈现pH的规律。(4)分析和讨论了谷氨酸和丝氨酸、组氨酸和谷氨酸、丝氨酸和组氨酸混合溶液的滴定曲线,从而进一步探讨了混合氨基酸溶液中的反应情况。在此基础上,对恒电位滴定时工作电位的选择方法进行了一定的总结。(5)讨论了实验误差及造成误差的各种影响因素。(6)总结了恒电位滴定法测定氨基酸的优点及局限性。


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