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《上海交通大学》 2011年
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氧化应激对动物自由基代谢、消化道损伤及抗氧化剂干预作用的研究

赵珂立  
【摘要】:目的:本试验探讨氧化应激状态下肠道自由基代谢与肠道结构与功能的变化,及其复合抗氧化剂的干预作用,研究复合抗氧化剂、肠道自由基代谢和肠道结构与功能的关系,从而提出了通过营养调控技术修复氧化应激引起的肠道损伤的途径。 方法:试验一选用36只42日龄的SD大鼠随机分成3组,每组12只。对照组和脂多糖LPS(lipopolysaccharide, LPS)诱导组饲喂基础日粮,修复组在基础日粮中添加复合抗氧化剂(每kg复合抗氧化剂含有200 mg VC、100 mg VE、450 mg茶多酚和5g微生物抗氧化剂),诱导组和修复组在试验的第5、9、13和17天腹腔注射0.8 mg LPS/kg体重,对照组注射等量生理盐水;第22天时,每组选取6只大鼠,进行D-木糖灌胃试验,测定肠道吸收功能。试验期间观察各个组大鼠的生长情况;试验结束后,并计算大鼠脏器指数,测定大鼠血清中丙二醛(Malondialdehyde, MDA)、肝脏组织中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase, GSH-Px)活力、肠脂肪酶、麦芽糖酶和肠道绒毛高度与宽度。 试验二选择12窝14日龄哺乳仔猪,随机分为三组,即为对照组、断奶组和修复组,每组4窝。对照组和断奶组饲喂基础饲料,修复组在基础饲粮中添加复合抗氧化剂。断奶组和修复组仔猪在21日龄统一断奶,试验期22天。试验期间记录仔猪的生长及采食量,计算日增重和料重比;在仔猪21日龄、28日龄、35日龄,每窝取三只仔猪前腔静脉采血,用于分析血清中MDA、SOD、一氧化氮(NO)和GSH-Px含量;在24日龄,对每窝选取一只仔猪进行D-木糖灌胃试验,测定肠道吸收功能;在试验结束后测定肝脏中过氧化氢酶(CAT)、MDA、SOD、NO和GSH-Px含量、肠道消化酶活性,及绒毛结构。 结果:试验一:与对照组相比,诱导组大鼠日增重降低,血清MDA含量有所增加、肝SOD和GSH-Px活力显著下降(P0.05);肝脏脏器系数下降11.13%(P0.05);肠道D-木糖含量下降72.72%(P0.05);肠脂肪酶和麦芽糖酶活力分别下降66.00%和65.74%(P0.05)。与诱导组相比,修复组MDA含量下降49.31%(P0.05),SOD和GSH-Px活性分别上升40.96%和35.04%(P0.05),肝脏脏器系数升高(P0.05),D-木糖含量、麦芽糖酶活性和绒毛高度显著升高(P0.05),隐窝深度显著降低(P0.05)。 试验二: 28日龄和第35日龄断奶仔猪体重较对照组降低18.45%和28.39%(P0.05);以电化学法测得断奶组仔猪血清中NO的浓度分别提高199.42%和34.00%(P0.05);O_2浓度下降和6.32%和11.81%。;28日龄断奶仔猪SOD活性降低47.81%,NO活性显著上升(P0.05),MDA含量提高34.74%(P0.05);断奶组仔猪肠道D-木糖含量,肠蔗糖酶、麦芽糖酶、淀粉酶、脂肪酶、肠胰胰蛋白酶均显著降低(P0.05);回肠pH值升高7.11%(P0.05);二胺氧化酶(DAO)活性断奶组和修复组仔猪分别显著下降32.31%和30.00%(P0.05);断奶仔猪的十二指肠、空肠和回肠的隐窝深度显著下降。与断奶组相比,21日龄、35日龄修复组仔猪血清NO浓度分别显著下降30.86%和22.81%(电化学法),修复组仔猪血清中O_2浓度均上升7.76%(P0.05);修复组仔猪SOD活性显著提高61.48%(P0.05)和6.15%,28日龄、35日龄修复组NO活性,MDA含量分别显著降低50.07%,52.46%, 33.45%(P0.05)和38.15%;修复组仔猪麦芽糖酶活力、肠胰蛋白酶活性、胰胰蛋白酶活性分别显著提30.54%,70.11%和100.35%(P0.05),回肠pH值显著降低5.36%(P0.05)。各组仔猪肠道绒毛长度、肠道胰蛋白酶活性与自由基H2O_2检测量(μM)、NO检测量(nM)之间均存在着负相关关系(P0.05),其相关系数和回归关系显著(P0.05)。 结论:氧化应激会导致动物体内产生大量自由基,使其抗氧化能力下降,对肠道结构和功能造成损伤。在氧化应激过程中,自由基H2O_2、NO和肠道绒毛与肠胰蛋白酶的活性是肠道损伤与修复的主要生物标志物。使用复合抗氧化剂能够显著提高仔猪抵抗氧化应激的能力,减轻肠道损伤,是有效的干预断奶应激的方法。
【学位授予单位】:上海交通大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R96

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【引证文献】
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